肝癌转移抑制基因在8p21.1-23.1染色体上的功能定位

目的:分析人类染色体8p21.1-23.1上肝癌转移抑制基因相关染色体缺失状况,为进一步寻找克隆可能的肝癌转移抑制基因奠定基础.方法:从NCBI的UniSTS数据库查询STS的引物序列,以微细胞杂交克隆DNA为模板(A9/C5F-1和A9/C5F-2为转移不抑制组,A9/C5F-4、A9/C5F-8和A9/C5F-10为转移抑制组)进行STS-PCR扩增.结果:人类染色体8p上D8S552(12786562-12786681),D8S1733(22576582-22576836),D8S1734(22851217-22851336),D8S254(16652480-16652550)及D8S1973(28681110- 28681363)等STS位点所在区域在转移抑制组杂交克隆(A9/C5F-4,A9/C5F-8,A9/C5F-10)存在STS位点的不同程度的获得和转移不抑制组杂交克隆组(A9/C5F-1,A9/C5F-2)STS位点的缺失.结论:D8S552-D8S1973所在的人类染色体8p21.1-23.1区域可能存在肝癌转移抑制基因.     

lncRNA NEAT1调控miR-206对缺氧复氧大鼠心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1调控miR-206对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和凋亡的影响和机制。方法 体外培养H9c2心肌细胞,构建心肌细胞缺氧复氧模型。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测缺氧复氧诱导后lncRNA NEAT1和miR-206的表达水平。将lncRNA NEAT1小干扰RNA(si-lncRNA NEAT1)、miR-206模拟物(miR-206 mimics)分别转染H9c2细胞,缺氧复氧诱导后,检测细胞中丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量以及细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)和cleaved Caspase-9蛋白表达。利用荧光素酶报告基因实验以及RT-qPCR验证lncRNA NEAT1和miR-206的靶向结合关系。结果 缺氧复氧诱导后H9c2细胞中lncRNA NEAT1的表达显著升高,miR-206的表达显著降低(P＜0.05)。转染si-lncRNA NEAT1或miR-206 mimics处理缺氧复氧H9c2细胞,细胞存活率显著升高,MDA、ROS含量以及LDH活性显著降低,cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9蛋白的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低(P＜0.05)。lncRNA NEAT1靶向miR-206并负调控miR-206表达。抑制miR-206部分逆转沉默lncRNA NEAT1对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化损伤和凋亡的影响(P＜0.05)。结论 沉默lncRNA NEAT1通过上调miR-206可减轻缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激损伤和细胞凋亡,进而发挥心肌保护作用。     

大肠癌组织中DOC-2和c-Fos蛋白的表达

目的：探讨DOC-2和c-Fos在大肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法检测132例大肠癌组织及48例正常肠黏膜组织中DOC-2和c-Fos蛋白的表达情况。结果：大肠癌组织与正常肠黏膜组织中DOC-2的阳性表达率分别为31.1%（41/132）和81.2%（39/48）,c-Fos的阳性表达率分别为56.1%（74/132）和12.5%（6/48）,2组间差异均有统计学意义（χ2分别为35.911,27.051,P〈0.001）。大肠癌组织中DOC-2的表达与患者年龄、性别、组织学类型、分化程度和临床分期无关（P〉0.05）,但与淋巴结及肝转移有关（P〈0.05）;c-Fos蛋白的表达与患者年龄、性别、组织学类型、临床分期、淋巴结及肝转移无关（P〉0.05）,但与分化程度有关（P〈0.05）。大肠癌组织中DOC-2与c-Fos蛋白的表达呈负关联（rP=-0.368,P=0.001）。结论：DOC-2和c-Fos蛋白的异常表达可能在大肠癌的发生发展中起重要作用。     

DLC-1基因表达对HCCLM3细胞基质金属蛋白酶分泌相关性的研究

目的:观察DLC-1蛋白表达对肝癌高转移细胞系HCCLM3细胞基质金属酶分泌的影响,进一步研究DLC-1基因在肝细胞癌转移复发中的作用.方法:构建peDNA3.1(-)-DLC-1重组表达质粒,用脂质体转染方法转染肝癌高转移细胞系HCCLM3,通过ELISA、明胶酶谱方法,研究重组质粒转染后对HCCLM3细胞基质金属蛋白酶分泌的影响.结果:成功构建peDNA3.1(-)-DLC-1重组质粒后转染高转移肝癌细胞系,重组质粒转染组HC-CLM3细胞培养上清中MMP-2和MMP-9分别为(46.887±2.03)和(34.683±1.98)ng/mL含量低于未处理的HC-CLM3细胞组[(47.172±2.12)和(34.468±2.54)ng/mL]和空质粒转染组[(35.528±2.89)和(31.542±2.38)ng/mL],其中MMP-2的降低差异有统计学意义.结论:DLC-1基因表达可降低细胞基质金属蛋白酶的分泌,与肝细胞癌的侵袭转移密切相关,可能是肝癌的转移抑制相关基因之一.     

高通量测序技术在胎儿染色体拷贝数变异检测中的应用

目的探讨高通量测序技术对于除21、18、13等常见的染色体非整倍体异常外染色体拷贝数变异检测的临床意义。方法选取自愿参与无创产前检测(non-invasive prenatal test,NIPT)的孕妇37 306例,对NIPT结果提示存在基因组拷贝数变异(copy number variation,CNV)并愿意接受产前诊断的52例孕妇进行羊水穿刺,进行羊水细胞染色体核型分析及染色体微阵列芯片分析(chromosomal microarray analysis ,CMA),并对所有NIPT提示存在CNV的病例进行随访。结果在37 306份NIPT样本中共检测到CNV 78例,阳性率为2.09‰。其中52例孕妇行进一步产前诊断,共检出与NIPT结果较一致的拷贝数变异15例,阳性率达28.85%。此外,对未进行诊断的26例孕妇进行了随访,其中自然流产2例,超声提示胎儿结构畸形后选择引产2例,新生儿多发畸形1例(CMA检测结果与NIPT较为一致),异常率高达19.23%,明显高于正常活产儿的异常率。结论 NIPT提示胎儿拷贝数缺失或重复是胎儿染色体异常的高危指征,联合应用染色体核型分析及...     

男性不育与女性不孕患者婚姻调适状况及人格特征的分析

目的分析男性不育与女性不孕患者婚姻调适状况及人格特征。方法选取2015年3月~2017年3月我院生殖医学中心进行诊治的不孕不育患者136例作为研究对象,根据婚姻调适状况分为婚姻调试良好组76例和婚姻失调组60例。对患者一般情况进行调查;采用Locke-Wollance婚姻调试测定量表、艾森克人格问卷(EPQ)和中文版医学应对问卷(MCMQ)进行婚姻状况和人格特征的分析。结果婚姻调试良好组婚龄、内外倾向量表、情绪性量表评分显著高于婚姻失调组,心理变态量表评分显著低于婚姻失调组(P0.05);婚姻调适良好组面对评分显著升高,回避评分显著降低(P0.05)。结论婚龄是影响不孕不育患者心理状况和人格特性的重要因素,且婚姻调适良好的患者应对不孕不育问题时态度更加积极。在早期对不孕不育患者进行心理干预,减轻其心理压力,提高生活质量。     

应用鼻窦电动手术器行增殖体切除术治疗小儿鼾症35例

鼾症是中老年人的发病,但儿童期鼾症亦不少见,其特点是睡眠时打鼾,严重憋气,亦称为阻过时性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）。小儿OSAS的发生其后果较成人更为严得,它不但影响儿童的身体发育及智力发育,而且可伴发多种并发症,引起小儿鼾症最常见的原因为扁桃体或增殖体肥大,近年来,随着鼻窦内窥镜技术在临床的应用,我科对35例小儿鼾症患者在鼻窦内窥镜直视下使用全自动鼻窦电动手术器切除增殖体组织,取得了良好疗效。     

乙型肝炎病毒相关肝细胞癌中的肝癌相关mRNA的筛选和分析

目的 观察乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌的mRNA表达谱的变化,并进行生物信息学分析.方法 用长链RNA芯片检测肝癌组织和正常肝组织mRNA的表达谱,并进行GO分析将差异表达的基因进行功能和细胞定位.结果　肝癌mRNA表达量与正常对照组比较,2倍以上变化,差异有统计学意义(P＜0.05)的mRNA认为是差异表达的mRNA,共991条,占所有基因总数的5.7%.其中2倍以上升高的共733条;2倍以上降低的共258条;5倍以上升高的共94条;5倍以上降低的共39条;10倍以上升高的共18条;10倍以上降低的共11条.GO分析表明差异性表达的mRNA参与了重要生物学调节功能,其中一些基因可能是HBV相关肝癌所特有的.结论　HBV相关肝癌的mRNA表达谱发生显著变化,差异基因参与了细胞的重要生物调节过程,可能参与肝癌的重要调节过程;HBV相关肝癌的表达谱与其他病因相关的肝癌有共性,也有一定的特性.

Abstract：

Objective To explore mRNA expression profile variation of hepatitis B virus ( HBV)related hepatocellular carcinoma and analyze bioinformazics. Methods Long-chain RNA chip was used to inspect mRNA expression profile in HBV-related hepatocellular carcinoma and normal hepatic tissue and make GO analysis for function and cellular localization of genes with differential expression. Results By comparing mRNA expression level of liver cancer with normal control group, 991 mRNA which had more than 2 times variation and significant difference (P＜0.05 ) by statistical analysis were regarded as differential expression mRNA, accounting for 5.7% of all genes. 733 mRNA were increased by more than 2times and 258 decreased by more than 2 times; 94 increased by more than 5 times, 39 decreased by more than 5 times; 18 increased by more than 10 times, 11 decreased by more than 10 times. GO analysis revealed that differential expression mRNA involved in significant biological regulatory function, and some genes may be particular to HBV-related liver cancer. Conclusion The mRNA expression profile in HBVrelated liver cancer changes significantly, and the different genes participate in significant biological regulation process of cells and maybe participate in significant regulation process of liver cancer; HBV-related liver cancer' s expression profile has certain characteristics and something in common with liver cancers relating to other pathogenesis.     

不同转移潜能的小鼠肝癌淋巴道转移和淋巴管生成的研究

目的探讨小鼠淋巴道高、低转移潜能的肝癌细胞的体内淋巴道转移状况和淋巴管生成对淋巴道转移的影响。方法将淋巴道高、低转移潜能的肝癌细胞接种于Balb／C小鼠，观察成瘤及转移情况，对肿瘤组织进行淋巴管染色，观察淋巴管生成情况。另取高、低转移潜能的细胞株进行体外淋巴管生成实验并进行小鼠肿瘤转移基因芯片检测，对血管内皮细胞生长因子C、D（VEGF—C、D）进行半定量逆转录聚合酶链反应及实时定量聚合酶链反应分析。结果高，低转移细胞在小鼠髂总动脉旁、肾门淋巴结的转移差异有统计学意义（P=0．0l8）。高转移潜能组诱导淋巴管生成的数量大于低转移组和对照组（P=0．032）。高转移组的CD44、E-cadherin．HER2／neu、H—Ras．VEGF—C的表达均高于低转移组，nm23A．nm23-E4、pl6ink4a、CD61等均低于低转移组。半定量逆转录聚合酶链反应表明，高转移组vEGF—C高于低转移组，VEGF—D低于低转移组。实时定量聚合酶链反应分析高转移组的VEGF—D分泌显著小于低转移组，vEGF—C／VEGF—D在高转移组明显高于低转移组。结论肝癌的淋巴道转移与淋巴管生成有关，VEGF—C、D相关基因表达的改变影响淋巴管生成。VEGF—C／VEGF—D比值可能是有效判断并影响肝癌淋巴道转移潜能的指标之一。