Tim-3基因4个SNP位点多态性与宁夏地区回族人群类风湿性关节炎易感性的关联性分析

目的:探讨宁夏地区回族人群中Tim-3基因4个单核苷酸多态性(SNP)位点多态性与类风湿性关节炎(RA)易感性的关联性,为RA的早期预防提供理论依据.方法:采用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)及限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)2种方法检测113例RA患者及111例健康个体Tim-3基因-574、-...     

白癜风患者血清前黑素小体蛋白17自身抗体的检测

目的 获取重组前黑素小体蛋白17(Pmel 17)并用于检测白癜风患者血清中Pmel 17自身抗体的分布.方法 通过RT-PCR从原代黑素细胞中获得人的Pmel 17基因,先后插入克隆载体pMD19-T和表达载体pGEX-4T-1,以构建重组质粒.IPTG诱导Pmel 17蛋白表达后以亲和层析法进行纯化.间接ELISA检测白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体的阳性率.结果 重组质粒经测序,与预期设计完全一致,同时Pmel 17蛋白成功表达和纯化.ELISA检测进展期白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体阳性率为22％,稳定期白癜风患者阳性率仅为2％,健康对照组未检测到抗Pmel 17自身抗体,进展期和稳定期阳性率差异具有统计学意义.结论 成功表达了Pmel 17重组蛋白,证明Pmel 17自身抗体与白癜风的疾病严重程度有一定关系.     

ALKBH5调控GEFT的m6A修饰对胆管癌转移及EMT的实验研究

目的 探究alkB同源蛋白5(ALKBH5)调控鸟嘌呤核苷酸交换因子T(guanine nucleotide exchange factors T, GEFT)的m6A修饰对胆管癌转移和上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）的影响。方法 将HuCCT1细胞按照转染类别分为Control组,NC-sh组、ALKBH5-sh组、NC-LV组、ALKBH5-LV组、ALKBH5-LV+NC-sh组和ALKBH5-LV+GEFT-sh组。Control组细胞不进行转染,使用Lipofectamine 2000对其他组细胞分别转染相应的慢病毒。采用MTT法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭水平。采用RT-qPCR分析HuCCT1细胞中的ALKBH5,GEFT,Bax,Bcl-2,MMP2,MMP9,E-cadherin,N-cadherin和Vimentin的mRNA水平。采用Western blot分析HuCCT1细胞中的ALKBH5和GEFT蛋白水平。采用MeRIP-qPCR分析HuC...     

NB-UVB对黑素细胞黑素合成相关基因表达的影响

目的：研究NB-UVB照射对黑素细胞的细胞活性、黑素合成、黑素合成相关基因表达的影响。方法：培养黑素细胞系PIG1，利用MTT法检测不同剂量NB-UVB（400、800、1200、1600、2000 mJ/cm2）照射后细胞的增殖率，采用NaOH裂解法测定细胞中的黑素含量，RT-PCR和Western blot方法检测UVB照射后12个黑素合成相关基因Tyr、Tyrp1、Tyrp2、OA1、MART-1、Pmel17、VAT-1、OCSP、syntenin、CHCHD3、flotillin-1、GPNMB的mRNA和蛋白的表达。结果：NB-UVB照射剂量在400、800、1200 mJ/cm² 时，细胞活力无明显变化，照射剂量为1600、2000 mJ/cm²时细胞活力明显下降。NB-UVB照射剂量为400、800、1200 mJ/cm² 时，随着照射剂量的增加，黑素的合成增加；NB-UVB照射后，12种黑素体蛋白中，Tyr、Tyrp2、GPNMB、Syntenin、MART-1的基因mRNA及蛋白表达显著升高。结论：UVB照射显著增加了黑素合成和相关基因的表达。     

Tim-1基因4个SNP位点及其单倍型与宁夏地区回族人群类风湿性关节炎的关联性分析

目的:探讨Tim-1基因4个SNP位点及单倍型与宁夏地区回族人群类风湿性关节炎(RA)的关联性,旨在为RA的早期预防提供理论依据.方法:采用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)及限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)2种方法对108例RA患者及104例健康个体Tim-1基因-1637 A＞G、-1454 G...     

超声引导下腹直肌鞘阻滞对腹式全子宫切除术后镇痛效果研究

目的:探讨分析超声引导下腹直肌鞘阻滞对腹式全子宫切除术后镇痛效果方法 :选择我院2017年10月-2018年7月期间收治的需要进行腹式全子宫切除手术治疗的患者84例,遵从患者的自我意愿前提下把患者分为治疗组和对照组各42例,其中治疗组的患者在患者术后利用超声引导下进行腹直肌鞘注射0.4%罗哌卡因40 ml,而对照组的患者不进行该项处理,对比两组患者术后的镇痛效果。结果 :治疗组患者术后疼痛的程度要请于对照组的患者,而且术后使用镇痛药物的患者也要少于对照组,两组数据对比差异具有统计学意义,p0.05。讨论使用超声引导下腹直肌鞘阻滞对腹式全子宫切除术后具有较好的镇痛效果,可以明显改善患者术后疼痛不适。     

Tim-4基因rs7700944位点多态性与宁夏回族人群RA的关联性分析

目的对宁夏回族人群Tim-4基因rs7700944位点多态性与类风湿关节炎(RA)的关联性进行分析,旨在为RA的早期预防提供理论依据。方法采用限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,对宁夏回族210例RA患者(RA组)和198名健康个体(对照组)Tim-4基因rs7700944位点进行基因型检测及分析。结果在对照组及RA组间,基因型频率(χ2=29.051)及等位基因频率(χ2=14.106)的分布差异均有统计学意义(P<0.01);等位基因A的频率在对照组中显著高于RA组,OR(95%CI)为0.549(0.400～0.752);而等位基因G的频率在对照组中显著低于RA组,OR(95%CI)为1.823(1.330～2.498)(P<0.01)。结论 Tim-4基因rs7700944位点多态性与宁夏回族人群RA的发生具有关联性,其中等位基因G为宁夏回族人群易患RA的危险因子,而等位基因A为保护因子。     

三聚氰胺单克隆抗体不同纯化方法的比较

为了建立更适用于三聚氰胺单克隆抗体的纯化方法,分别采用了硫酸铵两次沉淀法、正辛酸-硫酸铵沉淀法、凝胶过滤层析法、亲和层析法、阴离子交换层析法对三聚氰胺单克隆抗体进行纯化。对纯化后的三聚氰胺单克隆抗体的纯度、浓度、效价进行鉴定,对比不同纯化方法之间的差异。结果证明亲和层析法对于三聚氰胺单克隆抗体纯化最为适宜。由于亲和层析法纯化纯度高,快速便捷,对三聚氰胺单克隆抗体损伤小,最为推荐。研究者也可结合自身条件,参考文中数据结果,根据实验需要自行选择适合自身的纯化方法。     

血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa基因多态性与急性缺血性脑卒中的关系研究

背景血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体与纤维蛋白原有效结合是血小板聚集、血栓形成的最后通路,近年来从分子生物学角度研究GP基因多态性与急性缺血性脑卒中(AIS)的关系成为研究热点。目的分析GPⅡb、Ⅲa基因多态性与AIS的关系。方法选取2017年10月—2018年11月陕西省人民医院神经内一科收治的AIS患者110例作为病例组,另选取同期在门诊体检中心的体检健康者90例作为对照组。比较两组受试者一般资料(包括性别、年龄及吸烟、饮酒情况)、实验室检查指标〔包括PAC-1阳性血小板百分比、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FPG)及同型半胱氨酸(Hcy)〕及GPⅡb、Ⅲa基因型和等位基因分布频率,并比较不同GPⅡb、Ⅲa基因型患者PAC-1阳性血小板百分比。结果 (1)两组受试者男性比例、年龄、吸烟率、饮酒率及TG比较,差异无统计学意义(P0.05);病例组患者PAC-1阳性血小板百分比、TC、FPG、Hcy高于对照组(P0.05)。(2)病例组与对照组受试者基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。病例组患者GPⅡb ab基因型、bb基因型及b等位基因分布频率高于对照组(P0.05);两组受试者GPⅢa基因型和等位基因分布频率比较,差异无统计学意义(P0.05)。(3)GPⅡb bb基因型患者PAC-1阳性血小板百分比高于aa基因型(P0.05)。(4)不同GPⅢa基因型患者PAC-1阳性血小板百分比比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 GPⅡb基因多态性与AIS的发生有关,携带b等位基因者可能通过增强血小板活化程度而增加AIS发生风险,而GPⅢa基因多态性则与AIS的发生无关。     

活血通络膏对大鼠神经根性疼痛的影响

目的:研究活血通络膏对大鼠神经根性疼痛的影响。方法:采用大鼠神经根型颈椎病动物模型,术后外用贴敷活血通络膏0.4,0.2,0.1g·kg-1,以强生关节止痛膏为阳性对照,1次/d,连续用药15 d,观察大鼠手术后每日自主行为及对神经根炎症的反应程度,测定大鼠压足痛阈值,作颈神经根病理组织学观察。结果:活血通络膏高、中剂量可明显提高神经根炎大鼠压足痛阈值,改善神经根病变程度,促进模型动物行为学改变的恢复。结论:活血通络膏对大鼠神经根炎疼痛有明显的防治作用。