APP17肽对糖尿病小鼠脑Tau蛋白的影响

应用免疫组化方法 ,观察对照组、糖尿病组和糖尿病APP1 7肽治疗组小鼠脑内Tau蛋白的分布 ,以探讨APP1 7肽对糖尿病小鼠脑神经元Tau蛋白表达的影响。结果 :用Tau 1单染 ,正常小鼠脑及APP1 7肽治疗的糖尿病小鼠脑压后颗粒皮质及海马阳性反应神经元数目多。糖尿病小鼠只有用蛋白磷酸酯酶 (PP 2B)脱磷酸后阳性反应神经元数目及染色程度才与正常组接近。提示 :糖尿病小鼠脑内正常Tau蛋白表达障碍 ,有过度磷酸化 ,而APP1 7肽可改善Tau蛋白过度磷酸化     

肾上腺髓质素与血压的构效关系

肾上腺髓质素（Ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎ，ＡＭ）是１９９３年日本学者首次从人的嗜铬细胞瘤中发现的一种新型降压肽〔１〕。ＡＭ由５２个氨基酸组成，生物活性为扩张血管，降低血压，作为循环系统中的新型激素，对血压及心血管系统功能的调节起重要作用〔２〕。曾有报道，Ｎ端截断型的ＡＭ１３５２与ＡＭ的降压活性无差别〔３〕，但有关ＡＭ构效关系的深入研究未见报道。本研究目的在于观察ＡＭ不同片段对大鼠血压的影响，初步探讨ＡＭ结构与功能之间的关系。一、材料和方法Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雄性，体重２００ｇ左右，腹腔注射１０…     

糖尿病大鼠脑外侧膝状体神经元退行性变及APP17肽的作用

目的 通过观察糖尿病大鼠外侧膝状体神经元超微结构改变和神经元内凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Cyto C的表达，证实糖尿病大鼠是否存在脑内视觉传导通路外侧膝状体神经元退行性改变，APP17肽对其是否有改善作用。方法 用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发糖尿病模型，10周后取脑组织行Bax、Bcl-2、Cyto C的免疫组化染色，同时取外侧膝状体处脑组织作电镜观察。结果 糖尿病组外侧膝状体腹侧核内Bax、Cyto C阳性反应神经元数目多、染色深，Bcl-2三组间无明显差异，APP17肽治疗组的Bax、Bcl-2、Cyto C的表达接近正常组。超微结构发现糖尿病组神经元有固缩、核膜凹陷、线粒体肿胀等退行性变，给予APP17肽后上述改变明显好转。结论 糖尿病大鼠发生了外侧膝状体神经元的退行性改变，神经元可能处于凋亡前状态；APP17肽可改善糖尿病大鼠外侧膝状体神经元的退行性改变。     

糖尿病小鼠脑组织超磷酸化及其机理研究

目的研究糖尿病小鼠脑内Ｔａｕ蛋白是否过度磷酸化并观察ＡＰＰ１７肽的作用。方法用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型,并皮下注射ＡＰＰ１７肽对糖尿病小鼠进行保护。４周后,取脑组织做ＡＴ８、Ｔａｕ１、ＰＰ２Ｂ及用ＰＰ２Ｂ脱磷酸后的Ｔａｕ１免疫组化染色。结果糖尿病小鼠脑内ＡＴ８阳性反应神经元数目多,胞浆和突起深染,而正常小鼠及ＡＰＰ１７肽保护的糖尿病小鼠脑内阳性反应神经元数目少,染色淡;糖尿病小鼠海马内ＰＰ２Ｂ阳性反应神经元数目比正常小鼠明显减少,用ＡＰＰ１７肽保护后染色结果与正常小鼠接近。结论糖尿病小鼠脑内出现Ｔａｕ蛋白的过度磷酸化,即在丝氨酸２０２／苏氨酸２０５位点被磷酸化,ＰＰ２Ｂ表达减少可能是导致Ｔａｕ蛋白过度磷酸化的主要原因。用ＡＰＰ１７肽可使ＰＰ２Ｂ表达正常而保护Ｔａｕ蛋白不被过度磷酸化。     

APP17肽对谷氨酸引起神经毒作用的影响

目的　通过观察APP17肽和谷氨酸对人神经母细胞瘤株SY5Y生长及NT 3、NF表达的影响 ,初步证实APP17肽对谷氨酸引起的神经元毒性具有一定保护效应。方法　MTT代谢率、LDH漏出率测定、细胞计数 ,WesternBlot观察SY5YNT 3、NF表达。结果　谷氨酸可使MTT代谢率降低、细胞计数减少 ,LDH漏出率升高 ,NT 3、NF表达减少 ,加入APP17肽可使上述指标恢复或接近正常。结论　谷氨酸对神经元有毒性作用 ,而APP17肽可减轻这种损伤 ,对神经元产生保护作用。     

App17肽对糖尿病大鼠坐骨神经中钠-钾ATP酶活性的影响

Ａｐｐ１７肽是产生老年斑的主要成分　－淀粉样前体蛋白中具有促进神经轴突生长、突触形成作用的一个肽段。为探讨Ａｐｐ１７肽在治疗糖尿病大鼠神经病变中的作用,本研究用链脲佐菌素（ＳＴＺ）诱发大鼠糖尿病,以坐骨神经中Ｎａ－Ｋ／ＡＴＰａｓｅ作为检测手段,观察了 Ａｐｐ １７肽对糖尿病大鼠的治疗效果。１材料和方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只,随机分为三组,正常组７只,糖尿病组９只,Ａｐｐｌ７肽治疗组８只。除正常组外,其余均按６０ｍｇ／ｋｇ体重的剂量腹腔注射链崛佐菌素（０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲液稀释为２％浓度）…     

β淀粉样肽前体蛋白N端319～335肽段APP17肽 对糖尿病大鼠外周神经损伤的防治作用

目的　研究β淀粉样肽前体蛋白中的319～335肽段(APP17肽)对糖尿病大鼠神经病变的保护作用。方法　链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病,皮下注射APP17肽4周,测定痛阈及大鼠坐骨神经肌电图,并取脊髓组织冰冻切片做NT3和NF免疫组化染色。结果　用APP17肽的糖尿病大鼠组的潜伏期及传导速度较糖尿病组显著加快,其痛阈较糖尿病组有提高(P<0.05)。免疫组化染色脊髓前角区大多角细胞神经元NT3和NF表达接近正常大鼠,阳性细胞计数及色素数值(反应染色强度)与糖尿病组比较P<0.05。结论　糖尿病大鼠坐骨神经的传导速度减慢,潜伏期延长,痛阈降低,其脊髓前角区运动神经元NT3与NF的表达明显减少。而给予APP17肽的大鼠组,在所观察的指标均接近正常组,提示APP17肽具有防治糖尿病神经元病变的功效。     

快速老化小鼠P10海马PI3K信号转导通路的变化及APP17肽的影响

目的探讨APP17肽对快速老化小鼠P10（SAMP10）学习记忆、海马组织抗氧化酶活性和PI3K信号转导通路蛋白质变化的影响。方法采用通道式水迷宫实验观察SAMP10行为学改变,采用羟胺法和硫代巴比妥酸（TBA）比色法、黄嘌呤氧化酶法及免疫组织化学染色技术,测定过氧化脂质降解产物中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、PI3K信号转导通路蛋白质的变化。结果①模型组小鼠存在明显的学习记忆功能障碍,APP17肽治疗组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组与正常对照组无明显差异;②模型组海马神经细胞线粒体SOD活性明显降低（P<0.01）,MDA含量显著升高（P<0.01）;APP17肽组SOD活性高于模型组（P<0.05）,而MDA含量低于模型组（P<0.01）;③模型组PI3K信号转导通路相关蛋白TrkA、Akt/PKB、bcl 2阳性染色细胞数较对照组分别减少63%、50%和45%(P<0.01),经APP17肽治疗后,各种蛋白的表达明显上调(P<0.05);而神经生长因子（NGF）和结合元件蛋白（CREB）的表达无明显差异（P>0.05）。结论SAMP10存在学习记忆障碍,海马组织抗氧化酶活性降低、自由基代谢产物含量增加、PI3K信号转导通路蛋白表达异常,APP17肽能部分纠正这些异常变化。     

β淀粉样肽前体蛋白N端肽段对糖尿病鼠脑凋亡相关改变的作用

目的　研究糖尿病小鼠海马内凋亡相关蛋白表达的变化及神经元是否凋亡。同时,观察β淀粉样肽前体蛋白N端 17肽(APP17肽)的作用。方法　用链脲佐菌素诱发小鼠糖尿病模型,并用APP17肽治疗。4wk后 ,行鼠脑冰冻切片,做Fas、Fas L、NF κB、早老素 1 (PS 1 )、α 共核蛋白 (α Syn)免疫组织化学染色,并检测神经元是否凋亡。结果　正常小鼠海马内有少量的Fas、Fas L、PS 1及α Syn阳性染色神经元,但糖尿病小鼠海马内Fas、Fas L、PS 1及α Syn阳性染色神经元数目比正常小鼠明显增加。正常小鼠海马表达NF κB的阳性神经元数目多,糖尿病小鼠海马内NF κB的阳性染色神经元数目比正常小鼠明显减少。用APP17肽保护后糖尿病小鼠上述各种蛋白质的表达恢复到接近正常小鼠的水平。在 3组小鼠海马切片中均未发现凋亡神经元。结论　糖尿病小鼠海马神经元发生了凋亡相关改变,但未发生明显凋亡现象。APP17肽可改善糖尿病小鼠海马内凋亡相关蛋白的表达,使神经元处于正常状态。     

APP17肽对卵巢去势大鼠学习、记忆功能和海马神经NT-3、NF表达的影响

目的　探讨APP1 7肽是否能提高去卵巢大鼠学习、记忆功能及作用机制。方法　雌性大鼠分三组 :①正常组 ,②去卵巢组 ,③用APP1 7肽保护去卵巢组。通过水迷宫测试 ,观察行为学的改变。而后灌注固定 ,取大脑组织冰冻切片 ,做NT 3、NF免疫组化染色。结果　 (1 )行为学检查 :给予APP1 7肽的卵巢去势大鼠游完全程的时间及错误反应次数均较未给予APP1 7肽的卵巢去势大鼠少 (P<0 0 5)。 (2 )用APP1 7肽保护的卵巢去势大鼠海马区神经元神经营养素 3(NT 3)、神经丝蛋白 (NF)的表达与正常大鼠相似 ,阳性细胞计数及平均灰度 (反映染色强度 )与卵巢去势大鼠比较差异显著 (P <0 0 5)。结论　卵巢去势大鼠存在学习、记忆障碍 ,APP1 7肽具有防治因雌激素缺乏而致神经元退变的功效