阿维A诱导皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1凋亡机制研究

目的 探讨阿维A诱导人皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1细胞凋亡的分子转导机制。方法 采用酶联免疫分析法（ELISA）检测凋亡的诱导情况，吖啶橙染色证实凋亡的发生，Western印迹分析Fas、FasL、Fas相关死亡结构域（FADD）、caspase-8、caspase-3、多聚腺苷二磷酸核糖多聚酶（PARP）蛋白含量的变化。用Fas中和抗体ZB4检测Fas在阿维A诱导SCL-1细胞凋亡中的作用。结果 阿维A能诱导SCL-1细胞凋亡，并具有浓度及时间依赖性。形态学观察可见，SCL-1细胞呈典型的凋亡征象。阿维A能明显上调Fas、FasL、FADD的蛋白表达，活化caspase-8、caspase-3和 PARP。单独应用阿维A的凋亡吸光度为0.78 ± 0.04，与ZB4共同处理SCL-1后，凋亡吸光度下降为0.41 ± 0.03，ZB4显著阻断阿维A诱导的凋亡（Ｐ ＜ 0.05）。结论 阿维A能诱导皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡，其机制与Fas死亡受体信号转导途径有关。     

特应性皮炎患者外周血表达不同细胞因子T细胞亚群的检测

目的 探讨特应性皮炎患者外周血表达不同细胞因子T细胞群的频数及其与疾病严重程度的相关性。方法 采用流式细胞仪，检测外周血表达不同胞质内细胞因子（包括IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF-α）的CD4+ T、CD8+ T、CLA+ T细胞亚群的频数。利用特应性皮炎皮损面积严重度指数积分法方法，获取特应性皮炎患者病情严重程度积分，分析其与表达不同细胞因子的T细胞频数的相关性。结果 特应性皮炎患者外周血中，胞质内表达IL-4和IL-5的CD4+ T、CD8+ T、CLA+ T细胞频数均高于对照组，胞质内表达IFN-γ的CD4+ T、CLA+ T细胞频数低于对照组；差异均有统计学意义。患者组与正常人对照组中，TNF-α在不同T细胞亚群中表达差异无统计学意义。疾病严重程度与IL-4+CD4+ T细胞和IL-5+CLA+ T细胞群的表达频数相关。结论 患者外周血T细胞存在免疫偏移，表达某些细胞因子的T细胞亚群水平可能作为检测疾病严重程度的指标。     

80 例过敏性紫癜肾炎的临床病理分析

 目的通过对80 例紫癜性肾炎患者的临床病理分析,探讨过敏性紫癜患者的临床表现和肾脏病理的联系。方法对
80 例紫癜性肾炎患者的临床及病理资料进行回顾性分析和研究。结果大多数患者（68.75%）紫癜性肾炎发生于紫癜发生后
1个月内。33.75%的患者发病前有感染史。临床分组中以血尿与蛋白尿型者最多（35 例,占43.75%）,其次为肾病综合征型（28
例,占35%）和急性肾炎型（13 例,占16.25%）,孤立性血尿或孤立性蛋白尿组仅有3 例,占3.75%,急进性肾炎型仅有1 例。肾脏
病理分型以II 型最多（29 例,占36.25%）,其次是III 型（25 例,占31.25%）,其余依次为VI 型（13 例,占16.25%）、I 型（7 例,占
8.75%）、IV 型（3 例,占3.75%）、V型（3 例,占3.75%）。免疫复合物多沉积于肾小球系膜区,以单纯IgA 沉积为主,占53.75%。
结论紫癜性肾炎病理改变以II、III 型为主;临床表现与病理分级有关（P < 0.05）,临床表现越重者,病理表现也越重,但临床
表现与免疫复合物沉积水平无相关性（P > 0.05）。     

NZB和NZW小鼠脾淋巴细胞CD48和CD244分子表达及其基因多态性研究

目的：了解NZB小鼠中是否存在与其CD8^＋T细胞增殖相关的CD48和CD244分子表达异常及其机制。方法：利用流式细胞分析技术检测NZB和NZW小鼠脾淋巴细胞表面CD48和CD244分子的表达。利用DNA序列测定进行CD48和CD244基因多态性分析。结果：NZB小鼠活化的CD8^＋T细胞表面CD48和CD244分子表达水平均高于NZW小鼠。DNA序列分析显示CD48和CD244 eDNA序列在NZB和NZW小鼠问不存在多态性，但是NZB小鼠的CD48基因转录起始点上游-119bp处存在5个碱基缺失。结论：NZB小鼠活化的脾淋巴细胞高水平表达CD48和CD244分子可能是其CD8^＋T细胞增生的原因之一。NZB CD48基因转录调控区域异常可能与其高水平表达CD48分子有关。     

中性粒细胞集落刺激因子基因多态性在系统性红斑狼疮中分布的研究

目的:以中国北方汉族人群为研究对象,探讨中性粒细胞集落刺激因子(Granulocyte colony-stimulating factor gene,G-CSF,Csf3)基因多态性与系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)和狼疮性肾炎(Lupus nephritis,LN)的相关性.方法:采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(Polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)方法比较Csf3基因-1931位点单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)在正常人和SLE/LN病人中的分布.结果:SLE病人中 A/G杂合子(60.5%)和等位基因A的频率(53.5%)明显高于正常对照组(51.6%,45.2%;P值分别为小于0.05和0.01).而 G/G纯合子(16.2%)和等位基因G的频率(46.5%)明显低于正常对照组(28.9%,54.8%,P值均小于0.01).Csf3基因-1931位点A/G型在SLE伴有蛋白尿和伴有血尿病人中的频率明显高于对照组,差别具有统计学意义.结论:Csf3基因不仅与中国北方汉族人群SLE的易感性相关,而且与中国北方汉族人群SLE 患者的临床症状蛋白尿和血尿的易感性相关.     

不同恶性度膀胱癌细胞系的比较蛋白组学研究

目的 利用比较蛋白质组学双向电泳技术,观察不同恶性程度和侵袭力的人膀胱移行细胞癌细胞系T24和BIU-87蛋白表达谱的变化.方法 人膀胱癌细胞(BIU-87和T24)经培养后提取总蛋白.双向凝胶电泳,经考马斯亮蓝染色后比较两者蛋白图谱寻找差异表达蛋白质.采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和蛋白质数据库检索鉴定差异蛋白.结果 比较T24和BIU-87的蛋白质斑点发现差异大于2倍的蛋白质点153个,对其中94个差异蛋白斑点进行了质谱鉴定和肽质量指纹图分析.相对于BI-U-87,恶性度高的T24表达上调的蛋白质有Rho GDP-解离抑制因子1、组织蛋白酶D、细胞角化蛋白19、ACTG1蛋白、超氧化物歧化酶、热休克蛋白、ACTB蛋白和硫氧还蛋白4等;表达下调的蛋白有14-3-3 δ蛋白、orphan hormone nuclear receptor RORalpha3等.结论 人膀胱移行细胞癌T24和BIU-87细胞有153个蛋白质的表达发生变化.深入分析这些差异表达蛋白的功能与调控,有望为寻找恶性程度相关的生物学标记物提供重要的实验依据.     

老年肾脏移植的临床特点

目的探讨老年患者肾移植的风险、以及影响肾长期存活的因素。方法对54例≥60岁老年肾移植病例（老年组）进行回顾性分析,并与同期305例〈60岁肾移植病例（对照组）进行对比分析。结果老年患者在术后1年,3年的人/肾存活率分别为92.6%/88.9%、79.6%/75.9%。老年组急性排斥反应发生率为7.4%,与对照组（8.9%）无显著性差异（P〉0.05）。结论老年患者进行肾移植手术,需进行详实有效的术前检查（特别是心脑血管方面的检查）,并积极运用个体化抗排斥药物。     

Fcgr2b基因及H-2复合体对系统性红斑狼疮模型新西兰小鼠IgG抗体产生的影响

目的：比较Ｆｃｇｒ２ｂ基因单独及与Ｈ－２复合体共同作用对自发性狼疮小鼠（ＮＺＢ×ＮＺＷ）Ｆ１血清ＩｇＧ抗ＤＮＡ抗体产生的影响。方法：建立（ＮＺＢ×ＮＺＷ）Ｆ１×ＮＺＷ回交小鼠模型,用特异性荧光抗体染色,流式细胞术检测及ＰＣＲ技术进行基因分型,以ＥＬＩＳＡ法测定血清总ＩｇＧ及抗ＤＮＡ抗体水平进行分析比较。结果：Ｆｃｇｒ２ｂ基因单独作用时,回交小鼠Ｆｃｇｒ２ｂ基因Ｂ／Ｗ型组与Ｗ／Ｗ型组间血清ＩｇＧ抗ＤＮＡ抗体水平差异不显著（Ｐ＞０．０５）。Ｆｃｇｒ２ｂ基因与Ｈ－２复合体共同作用时,Ｈ－２复合体为ｄ／ｚ型时,无论Ｆｃｇｒ２ｂ基因是Ｂ／Ｗ型或Ｗ／Ｗ型,其血清ＩｇＧ抗ＤＮＡ抗体水平明显高于含Ｈ－２复合体ｚ／ｚ型组（Ｐ＜０．０１）;Ｈ－２复合体为ｄ／ｚ型时,含Ｆｃｇｒ２ｂ基因Ｂ／Ｗ型组血清ＩｇＧ抗ＤＮＡ抗体水平明显高于Ｗ／Ｗ型组（Ｐ＜０．０１）。结论：调控ＩｇＧ抗ＤＮＡ抗体产生的主基因为Ｈ－２复合体,Ｆｃｇｒ２ｂ基因单独作用对该抗体产生无明显影响,但与Ｈ－２复合体在该抗体的产生中具有协同作用。     

维生素A对MNNG诱发的器官培养牛胰管上皮癌变过程的抑制作用

应用化学致癌物MNNG作用于体外培养牛胰管上皮,8周时,电镜下观察牛胰管上皮在形态学上发生了明显的异型增生和早期癌样改变;而加入维生素A组上皮细胞仍保持单层柱状上皮。如先加入MNNG培养4周,造成牛胰管上皮细胞的明显增生,停用MNNG,加维生素A继续培养4周,发现可遏制并逆转增生的复层细胞,使之基本恢复为单层柱状上皮;而未加维生素A的相应对照组却出现了癌样增生。本实验从不同方面证实了维生素A在实验性胰腺癌中的化学预防作用,为维生素A在胰腺癌防治领域中的应用奠定了实验基础。     

SLE模型小鼠高IgG血症易感基因-Fcgr2b基因突变及对其表达的影响

目的:测定系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型 (NZB×NZW)F1双亲NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区核酸序列及其表达的改变,明确Fcgr2b基因的突变性质、对该基因表达的影响及与高IgG血症的关系。方法:采用核酸序列分析测定NZB ,NZW小鼠Fcgr2b基因启动子区突变性质;RT PCR检测Fcgr2b基因表达的改变;ELISA法测定比较(NZB×NZW)F1,NZB和NZW小鼠及(NZB×NZW)F1×NZW回交小鼠Fcgr2b基因B/W型与W /W型组间血清总IgG水平。结果:NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区与正常鼠BALB/c相比存在2个部位碱基缺失,分别为13bp及3bp。NZW小鼠除有3个碱基置换外,与BALB/c鼠该基因启动子区序列相同;NZB小鼠Fcgr2b基因mRNA的表达较正常鼠BALB/c降低;NZB小鼠血清总IgG水平明显高于NZW小鼠(P <0 0 5 ) ,回交小鼠Fcgr2b基因B/W型组血清总IgG水平明显高于W/W型组(P <0 0 0 0 1)。结论:NZB小鼠Fcgr2b基因启动子区存在碱基缺失,且该缺失突变可引起其表达的降低而导致高IgG血症