M-FISH用于骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1复杂核型的检测分析

本研究的目的是观察伴有5号染色体缺失的MDS细胞株MUTZ-1细胞的遗传学变化.首先采用R显带技术对染色体标本进行核型分析,再以vysis Spectra VysionTMM-FISH作为探针,检测并分析其复杂异常核型.结果表明M-FISH分析显示有明显的高频率染色体的易位、插入、断裂与重接、缺失、数目增多;染色体分析揭示核型为50,xx,der(1)t(1;2),ins(1;14),+der(2)t(2;19),der(3)t(3;5),der(3)(3522),5q-,der(6)t(3;6),der (7)(18717),+8,+der(9)t(1;9),der(10)t(1;10),+11,+12,der(?13)(101358),der(14)t(8;14),der(14)t(14,15),der(15)t(15;21)×2,+17,+18,-21,-22.结论MDS细胞株MUTZ-1在M-FISH检测下有显著复杂的核型变化;M-FISH能增加高度复杂的异常染色体检测的准确性,有助于MDS的诊断和预后评估.     

三氧化二砷、地塞米松和沙利度胺对骨髓瘤细胞U266凋亡及胞浆内Ca2+浓度的影响

为了探讨三氧化二砷(As2O3)、地塞米松(dexamethasone,Dex)和沙利度胺(thalidomide,Thal)诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对胞浆内Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响,用含15?S的RPMI1640培养液培养U266细胞并按5×105/(ml.well)接种于24孔板中,分别用不同浓度的As2O3、Dex和Thal干预8小时后收集U266细胞,用荧光显微镜观察细胞凋亡,以AnnexinV-FITC/PI双参数流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,负载Fluo-3/AM荧光素FCM检测[Ca2 ]i。结果显示:①随As2O3、Dex和Thal浓度增加,荧光显微镜下带有荧光信号的凋亡细胞逐渐增多;②As2O3、Dex和Thal作用U266细胞后FCM测得凋亡细胞比例从对照组的0.56%分别升至31.54%、28.35%、21.97%;③As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡时[Ca2 ]i升高,升高的程度与药物浓度成正比关系;④Thal诱导细胞凋亡时未观察到[Ca2 ]i有明显改变。结论:[Ca2 ]i的升高是As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡的机制之一,Thal诱导U266细胞凋亡与[Ca2 ]i的变化无明显关系。     

CLLU1在慢性淋巴细胞白血病患者中的表达及其预后意义

目的研究CLLUl在慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者中的表达及其与CLL临床分期、细胞遗传学异常、CD38和ZAPHO之间的关系，并评价其预后意义。方法应用半定量RT-PCR技术检测CLLUl在50例CLL患者中的表达水平；应用三色流式细胞术检测CLL患者骨髓或外周血白血病细胞ZAPHO和CD38的表达；应用间期荧光原位杂交（FISH）技术检测CLL患者细胞遗传学异常。结果50例CLL患者中有26例（52％）表达CLLUl，其中7例（26．92％）在BinetA期，19例（73．08％）在BinetB＋C期，二者表达差异有统计学意义（P〈0．01）；24例CD38^＋CLL患者中，17例（70．83％）CLLUl阳性表达，而在26例CD38-CLL患者中，仅有9例（34．62％）CLLUl阳性表达，二者间差异有统计学意义（P〈0．05）；CLLUl在ZAPHO阳性患者中的表达水平高于ZAP-70阴性患者，但两组差异无统计学意义（P〉0．05）；未发现CLLUl与细胞遗传学异常之间的相关性（P〉0．05）。结论CLLUl与临床分期、CD38密切相关，有可能作为CLL患者预后因素之一。     

典型与不典型免疫表型慢性淋巴细胞白血病的预后相关因素分析

Objective To analyze the proguostic factors for chronic lymphocytic leukemia (CLL) with typical and atypical immunophenotype. The parameters analyzed included sex, age, Binet stages, abso-lute lymphocyte count (ALC), immunoglobulin heavy-chain variable region (IgVH) gene mutation status, ZAP-70 protein, CD38 expression and cytogenetic aberrations. Methods According to the clinical guideline and scoring system for CLL in Britain, among 77 patients, 61 patients with score 5 called typical immunophe-notype CLL, 16 with score 4 or 3 were atypical immunophenotype CI,L. Multiparameter flow cytometry was employed for immunophenotypic analysis in 77 CLL patients for CD5, CD19, CD23, FMC7, slg, CD20, CD79h expression and ZAP-70 protein and CD38. IgVH mutation status was detected by multiplex RT-PCR and sequencing of the purified PCR amplification products. Fluorescence in situ hybridization (FISH) and a panel of probes were used to detect cytogenetic aberrations. Results There was no significant difference be-tween the two groups in sex, age, ZAP-70 and IgVH mutation status (P =0.398, P =0. 189, P =0.268 and P =0. 131, respectively). The incidence of ALC≥50 × 109/L, Binet B + C, CD38 ≥30% in atypical CLL patients(43.8%, 87.5% and 43.8%, respectively) were higher than that in typical group (16.4%, 36.1% and 16.4%, respectively) (P = 0. 026, P < 0. 01 and P = 0. 026, respectively). The proportion of typical patients (26. 8%) with a 13q14 deletion as sole abnormality was higher than that of atypical patients (7.6%), and that with deletion of 11q22 or 17p13 was lower than that of atypical patients (12.2% vs 46.2%) (P = 0. 022). Conclusion There were obvious differences between the typical immunophenotype CLL and atypical CLL in ALC, Binet stages, CD38 expression level and cytogenetic aberrations.     

膜表面免疫球蛋白M检测对慢性淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤的鉴别价值

目的 探讨在慢性淋巴细胞白血病(CLL)和套细胞淋巴瘤(MCL)中诊断和鉴别诊断中,膜表面免疫球蛋白M(sIgM)的应用及意义。方法 回顾性收集2016年5月至2022年8月江苏省人民医院血液科收治的首次确诊的CLL患者420例、MCL患者67例的临床资料;CLL患者中,典型免疫表型CLL(tCLL)298例,不典型免疫表型CLL(aCLL)122例。采用多参数流式细胞术(MFC)检测所有患者肿瘤细胞中sIgM和公认的CLL诊断免疫标记物分化抗原簇(CD)200表达水平,并分析sIgM、CD200以及二者联合在aCLL和MCL中的鉴别诊断价值。结果 sIgM高表达率在MCL(88.1%)、aCLL(23.0%)、tCLL(8.7%)中依次降低(χ²=193.218,P<0.01);而CD200高表达率反之,在MCL(10.4%)、aCLL(78.7%)、tCLL(92.9%)中依次升高(χ²=261.194,P<0.01)。sIgM对MCL鉴别于aCLL的灵敏度,特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度与CD200相近。sIgM联合...     

骨髓增生异常综合征免疫表型研究进展

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组血液系统异质性的疾病,表现为骨髓原始细胞的形态和数目异常,无效造血及不同程度的外周血细胞减少并易转变为急性髓系白血病。本文就MDS疾病的骨髓形态学检查,骨髓活检,染色体核型分析,免疫分型等问题,特别是流式细胞术免疫分型技术检测对MDS诊断和预后意义的研究进展作一综述。     

急性早幼粒细胞白血病143例免疫表型研究

为了探讨急性早幼粒细胞白血病（APL）免疫表型特征,以CD45／SSC设门,对143例APL进行多参数流式细胞术免疫分型,比较初发和复发时免疫表型变化。随机选择同期42例HLA—DR阴性的非APL的急性髓系白血病（AML）患者作为对照,其中31例CD34也为阴性,探讨其与初发APL的免疫表型的差异。结果表明：①初发APL中91．9％表现为cD34和HLA—DR共阴性,复发时CD34和HLA—DR阳性率增高（37．5％vs3．0％,37．5％vs3．9％）。初发APL组CD34阳性率低于DR^-AML组（3．0％vs23．4％）,初发APL组CD34即使阳性,其表达水平也较低（P〈0．05）。②初发APL组CD33阳性率高于各对照组（97．0％vs75．0％,83．3％,83．9％）,其表达水平亦高于各对照组（P〈0．05）。③初发APL组淋系抗原中仅见CD2的表达,未见CD7的表达,而DR—AML组、CD34^-／DR—AML组CD7阳性率分别为12．0％,6．5％,高于初发APL组（P〈0．05）。结论：免疫表型检测可以为APL的快速诊断提供依据,对HLA—DR^-的AML可以从CD34的表达与否、CD33的表达水平、淋系抗原表达情况以及SSC特征等方面与APL进行鉴别。     

合并骨髓坏死的髓系抗原及Ph染色体阳性B急性淋巴细胞白血病一例

为加强对骨髓坏死（BMN）的病因及病理过程复杂性的认识，了解髓系抗原阳性（My^＋）及Ph染色体阳性（Ph^＋）的B急性淋巴细胞白血病（ALL）临床表现的多样性，报道分析了1例以BMN为首发症状的My^＋Ph^＋B-ALL并进行讨论。结果表明：该病例临床特征复杂而多样，通过骨髓涂片和活检，免疫分型，染色体核型分析及FISH明确了诊断。积极治疗原发病改善了患者的预后。结论：My^＋Ph^＋B-ALL并发BMN是一种罕见疾病，应采取多种方法检查明确诊断并积极治疗。     

淋巴瘤比较基因组杂交研究

目的评价比较基因组杂交(CGH)技术在淋巴瘤研究中的应用价值。方法采用CGH技术检测20例淋巴瘤患者核型异常,部分病例与核型分析比较。结果20例淋巴瘤患者CGH核型异常检出率为60%。8例进行常规核型分析的患者,CGH检测出4例常规核型分析未发现的异常。8例弥漫大B细胞淋巴瘤5例发现染色体拷贝数改变,其中3例发现13号染色体长臂扩增。5例滤泡性淋巴瘤中3例分别检测出7q11-21和15q11-14扩增和18号三体。4例小淋巴细胞淋巴瘤中1例6q16-25缺失,1例发现复杂核型异常:1p21-23扩增伴有2p12-ter,9p13-ter,10p13-ter缺失。结论淋巴瘤患者存在多种染色体异常,CGH是一有用的分析淋巴瘤核型异常的分子细胞遗传学工具。     

脱氧胞苷激酶表达与慢性淋巴细胞白血病氟达拉滨耐药的相关性研究

为了探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者白血病细胞内脱氧胞苷激酶(dCK)的基因表达水平与氟达拉滨(flud)耐药的相关性,采用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测30例CLL患者骨髓或外周血标本的dCK mRNA表达,比较Flud敏感与耐药患者dCK表达水平的差异。结果表明:敏感组dCK表达水平高于耐药组(p=0.001),dCK的表达与性别、年龄、Binet分期、IgVH基因突变、CD38、ZAP-70和p53基因突变均无相关性(p0.05)。结论:dCK表达水平低或缺陷的患者可能对Flud药物有耐药性,而dCK表达的预后意义有待进一步探讨。