天芪益智颗粒对Aβ1-42诱导的阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及蛋白质组的影响

目的观察天芪益智颗粒对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)大鼠学习记忆能力和皮层、海马组织蛋白质组的影响,探讨其分子作用机制。方法将实验大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组和天芪益智颗粒高、中、低剂量组,每组12只。灌胃给药,每日1次,连续40 d。给药结束后,采用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,应用TMT蛋白质组学方法进行质谱分析,确定天芪益智颗粒组与模型组间的差异蛋白质,应用PANTHER及STRING软件对差异蛋白进行生物信息学分析,采用Western blot对苹果酸脱氢酶和Fas相关的死亡结构域蛋白的表达变化进行验证。结果水迷宫实验结果显示,与模型组比较,天芪益智颗粒高、中剂量组定位巡航实验中逃避潜伏期缩短,空间探索实验中穿越目标区域次数显著增加(P0.05,P0.01);蛋白质组学结果显示,天芪益智颗粒高剂量组中成功鉴定33个差异蛋白质,这些蛋白及网络的功能涉及能量代谢、神经传递、细胞凋亡、细胞骨架、神经营养等,且Western blot蛋白表达检测结果与蛋白质组学结果一致。结论天芪益智颗粒可明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制与调节能量代谢、神经传递、细胞凋亡、细胞骨架及神经营养蛋白的表达密切相关。     

复方当归注射液对拟缺血损伤大鼠脑微血管内皮细胞的影响

目的观察体外拟缺血损伤大鼠脑微血管内皮细胞丙二醛(MDA)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平变化及复方当归注射液(CAI)对其的影响。方法采用SD大鼠脑微血管内皮细胞原代培养,氧糖剥夺(OGD)法制备拟缺血损伤模型,在造模前和造模中应用1μL/mL复方当归注射液干预细胞,通过微孔检测和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测细胞中MDA和IL-6、TNF-α的含量。结果与正常组比较,模型组MDA、IL-6、TNF-α表达显著升高(P0.05);与模型组比较,CAI组MDA、IL-6、TNF-α表达指标均显著降低(P0.05)。结论体外拟缺血损伤可引起脑微血管内皮细胞的脂质过氧化和炎症反应,CAI可降低脂质过氧化损伤,改善拟缺血引起的炎症反应,这可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

实验性血管性痴呆大鼠模型的实时步态行为分析研究

目的：建立实验性血管性痴呆大鼠模型,研究其实时步态行为。方法采用双侧颈总动脉结扎方法建立大鼠血管性痴呆模型,术后50 d进行实时步态行为训练与测试,记录步行速度、步行周期、步幅、步基、支撑时长、摆动时长等指标共计96项。结果与假手术组比较,实验性血管性痴呆模型组大鼠有19项步态指标出现了显著地统计学差异,模型动物步态行为异常主要体现在前肢步宽增加（P ＜0．05）,各足步行周期延长（P ＜0．05）,各足支撑时长增加（P ＜0．05,P ＜0．01）,摆动时长缩短（P ＜0．05）,同源协调性降低（P ＜0．05）,各足足迹平均面积和平均强度增加（P ＜0．05,P ＜0．01）。结论实验性血管性痴呆大鼠模型实时步态行为异常与临床患者所见症状相似,可为该模型的建立和判断提供借鉴。     

从PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路探讨复方当归注射液对拟缺血神经元的作用

[目的] 探讨复方当归注射液（CAI）干预拟缺血损伤脑微血管内皮细胞（BMECs）后的条件培养液对拟缺血损伤神经元的影响及作用机制。[方法] 原代培养SD大鼠BMECs及皮层神经元,免疫荧光鉴定两种细胞,收集正常BMECs条件培养液（N-CM）、拟缺血损伤BMECs条件培养液（I-CM）及CAI低、中、高剂量干预后的拟缺血损伤BMECs条件培养液（IC-CM,1.25、2.5、5 μL/mL）,分别作用于正常神经元和拟缺血损伤神经元,用CCK8法检测各组神经元活性、蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）信号通路Akt的磷酸化水平[磷酸化Akt（p-Akt）/Akt]、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外信号调节激酶（Erk）信号通路Erk的磷酸化水平[磷酸化Erk（p-Erk）/Erk]。[结果] 与N-CM处理组相比,I-CM处理组神经元活性显著降低（P<0.01）、Akt磷酸化水平下降（P<0.05）、Erk磷酸化水平显著上升（P<0.01）;CAI干预后IC-CM低剂量处理组神经元活性、Akt磷酸化水平高于I-CM处理组（P<0.05）,IC-CM中、高剂量处理组神经元活性、Akt磷酸化水平显著高于I-CM处理组（P<0.01）,各IC-CM处理组较I-CM处理组的Erk磷酸化水平变化不明显（P>0.05）。[结论] CAI可通过干预拟缺血损伤内皮细胞进而对拟缺血损伤神经元达到保护作用,该保护作用可能与活化PI3K/Akt信号通路存在相关性,与MAPK/Erk信号通路关联不大。     

仲景方中葶苈子用药剂量研究

目的 该研究拟在考证容量古今折算标准的基础上,采用文献考证药物品种、产地、炮制与药物实测相结合的方法,并利用数据统计学处理方法,对仲景方中葶苈子剂量开展古今折算研究.研究得出,仲景方中葶苈子应为十字花科植物葶苈(又名苦葶苈)Semen lepidli的种子,大陷胸丸中葶苈子半升(100 ml)宜折算为69.87 g.该研究力求最大限度地接近仲景方葶苈子剂量及相关经方配伍比例的原貌.     

天元克痛方和盐酸曲马多单次给药对大鼠辐射热模型的镇痛作用研究

目的:探讨天元克痛方与盐酸曲马多单次给药后,对大鼠辐射热模型的镇痛作用。方法:63只Wistar大鼠随机分为5组,分别给予无菌蒸馏水、盐酸曲马多和天元克痛方,用辐射热甩尾法测定大鼠痛阈。结果:单次给药后,盐酸曲马多组的痛阈值与空白组相比,在60、90、120min均有显著性差异;与空白组相比,天元克痛方各组基本无显著性差异。结论:盐酸曲马多组在单次给药后60min～120min能使辐射热模型大鼠的痛阈延长(与空白组相比,P<0.05或P<0.01);天元克痛方各组虽有痛阈延长现象,但对辐射热引起的短暂锐痛无明显作用(P>0.05)。     

芪参胶囊质量标准的研究

目的;研究芪参胶囊的质量控制标准;方法：采用薄层色谱法对制剂中黄芪,人参,水蛭,赤芍和川芎进行定性鉴别;同时采用双波长薄层扫描法对黄芪甲苷进行了含量测定。结果：平均回收率为100．14％,RSD为1．9％。结论：该方法灵敏,简便,准确,重现性好,可作为该制剂的质量控制标准。     

增液汤中梓醇的HPLC定量研究

目的建立增液汤中梓醇的HPLC定量测定方法。方法采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),流动相为水(A)-乙腈(B),采用梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果梓醇与其他成分分离度良好,且在0.202 8~4.056μg的检测范围内与峰面积呈现良好的线性关系,其相关系数为0.999 95,加样回收率为100.23%,RSD值为1.86%。应用所建立的方法对增液汤中的梓醇进行了含量测定。结论所建立的含量测定方法准确可靠,可为增液汤的质量控制提供参考。     

大鼠脑缺血动物模型研究现状与展望

脑缺血实验动物模型是研究脑缺血发病机制及治疗途径的必备工具.本文综述了常见全脑和局灶性大鼠脑缺血动物模型的分类与制备方法,分析了制备过程中的影响因素,介绍了模型的评价方法与指标,指出了大鼠脑缺血动物模型研究的发展趋势.     

从PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路探讨复方当归注射液对拟缺血神经元的作用

[目的] 探讨复方当归注射液（CAI）干预拟缺血损伤脑微血管内皮细胞（BMECs）后的条件培养液对拟缺血损伤神经元的影响及作用机制。[方法] 原代培养SD大鼠BMECs及皮层神经元,免疫荧光鉴定两种细胞,收集正常BMECs条件培养液（N-CM）、拟缺血损伤BMECs条件培养液（I-CM）及CAI低、中、高剂量干预后的拟缺血损伤BMECs条件培养液（IC-CM,1.25、2.5、5 μL/mL）,分别作用于正常神经元和拟缺血损伤神经元,用CCK8法检测各组神经元活性、蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）信号通路Akt的磷酸化水平[磷酸化Akt（p-Akt）/Akt]、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外信号调节激酶（Erk）信号通路Erk的磷酸化水平[磷酸化Erk（p-Erk）/Erk]。[结果] 与N-CM处理组相比,I-CM处理组神经元活性显著降低（P<0.01）、Akt磷酸化水平下降（P<0.05）、Erk磷酸化水平显著上升（P<0.01）;CAI干预后IC-CM低剂量处理组神经元活性、Akt磷酸化水平高于I-CM处理组（P<0.05）,IC-CM中、高剂量处理组神经元活性、Akt磷酸化水平显著高于I-CM处理组（P<0.01）,各IC-CM处理组较I-CM处理组的Erk磷酸化水平变化不明显（P>0.05）。[结论] CAI可通过干预拟缺血损伤内皮细胞进而对拟缺血损伤神经元达到保护作用,该保护作用可能与活化PI3K/Akt信号通路存在相关性,与MAPK/Erk信号通路关联不大。