新型聚酮合酶基因簇的分离与部分鉴定

目的 从海洋沉积物中分离新型聚酮合酶(PKS)基因簇,并解析其基因结构,为研究PKS的组合生物合成提供新组件.方法 采集中国东海沉积物样本,并提取宏基因组DNA,以其为模板,通过简并PCR扩增新型PKS片段,用地高辛标记正确的扩增片段作为探针,然后从本研究中构建的海洋沉积物样本Fosmid宏基因组文库中筛选完整基因簇,测序、结构分析.结果 (1)所分离得到的海洋沉积物宏基因组DNA可直接作为PCR模板,简并PCR扩增得到26个新型KS编码片段,并成功提交GenBank;(2)所得DNA构建成滴度约5×108cfu/ml的Fosmid文库,插入片段平均长度约为40kb;(3)将其中的一个KS片段(GenBank登录号DQ942531)用地高辛标记并筛选部分文库,得到4个克隆,测序得到7981bp的序列(GenBank登录号EF568935),结构分析发现含典型的I型PKS组件,如酮缩酶(KS)、酰基转移酶(AT)、酰基载体蛋白(ACP)等.结论 简并引物扩增、宏基因组文库筛选、测序、结构分析,在本研究中被证明是有效的分离新PKS基因簇的途径;通过系统进化树分析得出26条新KS片段属于I型KS片断和杂合PKS/NRPS基因簇,主要来自放线菌门、δ变形菌门、蓝藻门和β变形菌门的微生物.     

多模态超声联合血清学指标在HFpEF患者心肌微循环及心功能评估中的应用研究

目的 联合应用心肌声学造影、斑点追踪技术、三维超声心动图、血清学指标评估射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)患者心肌微循环和心功能的变化,为临床对HFpEF的早期干预提供影像学依据。方法 选取HFpEF患者120例,正常对照组40例,其中HFpEF患者根据超声评估左心室舒张功能结果分为A、B、C 3组,比较各组间测量指标差异。结果 (1)各组间二尖瓣E峰减速时间(DT)、平均E/e′、E/A、RIMP、LAD、LAVI、RVEF差异有统计学意义(P<0.05),C组RVEF较A组和B组低,LAVI、平均E/e′、RIMP均高于A组和B组(P<0.05);(2)各组间LVGLS、LAGLS、RVGLS差异有统计学意义(P<0.05);(3)与其他3组相比,C组β、A值减低(P<0.05)。结论 多模态超声联合血清学指标可全面反映HFpEF患者心肌重塑状态、心肌微循环和心功能变化,为临床提供准确的超声影像学诊断依据。     

基于肝脾相关理论辨治非酒精性脂肪性肝病

肝脾两大藏象系统之间密切相关,在生理状态下相互促进,如疏泄与运化相互为用,藏血与统血相互协调;在病理状态下相互传变,如肝病传脾,脾病及肝,故肝脾不调是非酒精性脂肪性肝病的基本病机。治疗上以理气化湿、祛痰化瘀为主。肠-肝轴是肠道及其微生物群与肝脏之间双向沟通的重要途径,肠道黏膜屏障及肝脏的固有免疫系统对于防止肠道中的有害菌或毒性产物传播至关重要。异常的肠道微生物群可引起肠黏膜屏障破坏,从而使肠道抗原、细菌及其产物进入肝脏,引发肝脏炎症、损伤,释放的血管活性物质和炎症因子等物质随血液循环至肠道,又可进一步造成肠黏膜缺血、缺氧以及血管通透性增加等,加重肠道功能障碍,形成恶性循环。肠道微生态紊乱通过肠-肝轴途径促进非酒精性脂肪性肝病的发生发展。调和肝脾类中药可通过调控肠道微生物组成、修复肠黏膜屏障及平衡胆汁酸代谢等方面,改善非酒精性脂肪性肝病。     

冠状动脉介入治疗后应用氯吡格雷治疗的患者血小板活化情况

目的探讨冠状动脉介入治疗(PCI)后,患者应用氯吡格雷作为抗血小板药物口服治疗,观察血小板活化的变化情况。方法采用流式细胞术(FCM)分别对PCI患者和健康体检人群血小板GPⅡb/Ⅲa进行检测,同时观察PCI患者应用氯吡格雷治疗前、后血小板GPⅡb/Ⅲa水平的变化。结果实验组入选时与健康对照组进行比较,实验组入选时GPⅡb/Ⅲa的水平较健康对照组明显升高,两组血小板GPⅡb/Ⅲa水平差异有统计学意义(P<0.05)。用药7d后其GPⅡb/Ⅲa水平较入选时明显下降,两组血小板GPⅡb/Ⅲa水平差异有统计学意义(P<0.05)。而健康对照组与实验组用药7d后进行比较,两组血小板GPⅡb/Ⅲa水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCI后应用氯吡格雷治疗患者血小板活化水平大部分都有明显下降,但仍有少部分患者没有明显下降,推测可能与血小板抵抗有关。     

腹腔镜下食管裂孔疝修补术中气胸伴严重低血压1例的麻醉处理

<正>1临床资料患者,女,68岁,身高162 cm,体重80 kg,BMI 30.5kg/m²,ASAⅡ级,因“反酸2年,加重2周”为主诉于2021年5月28日入沈阳二四二医院普外一科。患者2年前无明显诱因出现反酸,偶尔胸痛,伴背部放射痛,症状反复发作。患者发病以来,精神状态欠佳,食欲差,睡眠正常,近期体重未见明显增减。既往无高血压、糖尿病、冠心病等疾病史,无手术史、过敏史。     

ACI患者颈动脉斑块CEUS定量分析参数与sdLDL-C的相关性研究

目的 分析ACI患者颈动脉斑块CEUS定量分析参数与sdLDL-C的相关性.方法 选取以ACI入院治疗患者行颈动脉CEUS及CTA检查,分为稳定斑块组和不稳定斑块组;分析两组CEUS定量分析参数与sdLDL-C的相关性.结果 两组间血清TG、LDL、sdLDL-C水平及CEUS定量分析参数有差异且有统计学意义(P＜0....     

人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒NS4B结合蛋白基因的筛选

目的应用酵母双杂交技术筛选人胰腺细胞cDNA文库中与HCV包膜糖蛋白NS4B相互作用的结合蛋白的编码基因。方法扩增人胰腺细胞cDNA文库进行纯化鉴定,并将文库质粒转化酵母菌株Y187。诱饵质粒pGBKT7-NS4B转化酵母菌株AH109,在色氨酸缺陷型培养基（SD/-Trp）上筛选阳性菌落。应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合,在四缺培养基（SD/-Trp/-Leu/-H is/-Ade）和铺有X-α-gal的四缺培养基上进行筛选,提取蓝色酵母菌落质粒,电转化大肠埃希菌DH5α后再提取质粒测序。测序结果进行序列比对。结果成功构建人胰腺cDNA文库以及pGBKT7-HCV NS4B重组质粒,筛选出7种与HCV NS4B蛋白相结合的蛋白基因。结论筛选出的与HCV NS4B蛋白结合的人胰腺细胞蛋白基因中,部分与2型糖尿病、肝脏脂肪变性密切相关。     

北京地区儿童肾功能生化项目参考区间调查

目的调查北京地区健康儿童肾功能常规生化检测项目参考区间,建立儿童肾功能生化指标评价标准。方法采用Olympus2700全自动生化分析仪对548例3～14岁北京地区健康体检儿童血清进行尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C、总蛋白和清蛋白项目的检测。应用SPSS软件对资料进行年龄、性别分组的正态性检验和比较,依据近期发布的卫生行业标准WS／T402-2012建立以上项目北京地区儿童参考区间。结果03～14岁男孩尿素参考区间为4．21±1．02mmol／L,女孩为3．91±1．67mmol／L。②儿童肌酐测定值存在年龄、性别差异,其中3～6岁儿童参考区间为35．43±7．80μmol／L;7～14岁男孩为44．37土12．21μmol／L,女孩为42．58±10．45μmol／L。③3～6岁儿童尿酸、总蛋白和清蛋白的参考区间分别为277．04±110．49μmol／L,69．34±6．78g／L和44．24±3．68g／L,7～14岁儿童尿酸、总蛋白和清蛋白的参考区间分别为305．24±120．52μmol／L,73．21士7．76g／L和45．22±3．86g／L。④3～14岁儿童胱抑素C测定值不存在年龄、性别差异,其参考区间为0．51～1．12mg／L。结论儿童肾功能常规生化检测项目的参考区间与成人存在差异,儿童医院实验室应建立使用儿童参考区间。儿童肾功能常规生化检测项目参考区间的建立要考虑年龄、性别差异。     

短时效肌松药物米库氯铵在儿科日间手术中的应用

目的 评价在小儿日间手术中米库氯铵与顺苯磺酸阿曲库铵2种肌松药的应用效果.方法 选取2018年2月至2020年2月于沈阳二四二医院行小儿扁桃体切除术患者60例,采用随机数字表法分成米库氯铵组(M组)和顺苯磺酸阿曲库铵组(C组),每组各30例.麻醉诱导:M组给予米库氯铵0. 2 mg/kg,C组给予顺苯磺酸阿曲库铵0. ...