人内皮-单核活化多肽-2的重组表达及其活性鉴定

目的：采用原核表达系统重组表达抗肿瘤细胞因子——人内皮．单核活化多肽2（endothelail monocyte—activating polypeptideⅡ，EMAP—Ⅱ），并探讨重组EMAP—Ⅱ的抗肿瘤生物学活性。方法：采用pMAL—p2x表达系统和BL-21菌株克隆表达人EMAP—II147_312，对表达产物进行纯化。以发光底物法测定重组EMAP—Ⅱ介导人脐静脉内皮细胞ECV-304产生组织因子的活性；以流式细胞术测定其增强ECV-304细胞对于TNFα致凋亡的敏感性；以MTF法检测定其对胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制效果。结果：测序证实EMAP-Ⅱ编码序列被正确克隆进表达载体，经诱导表达、纯化，获得重组EMAP-Ⅱ产物，每克菌体（湿重）可获得约500斗g的重组蛋白，纯度为电泳纯。重组EMAP—Ⅱ在体外培养条件下可使ECV-304细胞产生TF因子；并可增强ECV．304细胞对于TNFoz介导凋亡的敏感性，使凋亡率明显增加[（16．6±2．5）％135（25．6±2．3）％，P〈0．01]；在一定的质量浓度（1μg／ml）下，EMAP—Ⅱ对SW1990细胞的增殖有一定抑制作用（P〈0．05）。结论：本研究采用原核表达系统pMAL—p2x可表达高纯度的重组EMAP-Ⅱ，该因子具有良好的抗肿瘤生物学活性。     

新型酰基转移酶AT-EF080951的重组表达及底物结合分析

目的 研究新型聚酮合酶(PKS)基因簇EF568935(Gen Bank登录号)中酰基转移酶(AT)EF080951(GenBank登录号)底物特异性,为PKS的功能研究及组合生物合成研究提供新组件.方法 从酰基转移酶AT-EF080951结构域两端的连接肽区设计引物,通过PCR克隆其结构域基因at-EF080951;连接入原核表达载体pMAL-c2X,与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达;直链淀粉树脂柱亲和层析纯化MBP-AT-EF08095l;融合蛋白用Xa因子切除MBP,得到AT-EF080951单体;以MBP、小牛血清白蛋白(BSA)为对照蛋白,用紫外分光光度法测定MBP-AT-EF080951与AT-EF080951对底物的结合能力,计算结合常数(Ka,μmol/L),分析其结合底物的特异性.结果 (1)MBP-AT-EF080951与底物的结合常数为甲基丙二酰辅酶A,0.0049±0.001;丙二酰辅酶A,0.0049±0.003;乙酰辅酶A,0.107±0.002;辅酶A,0.005±0.003.(2)AT-EF080951与底物的结合常数为甲基丙二酰辅酶A,0.005±0.002;丙二酰辅酶A,0.0041±0.002;乙酰辅酶A,0.120±0.001;辅酶A,0.0042±0.003.结论 MBP-AT-EF080951和AT-EF080951都特异性结合乙酰辅酶A,AT-EF080951可能是乙酰转移酶.     

抗痉挛药物替扎尼定应用的时机与效果比较

背景:脑卒中后痉挛的缓解使改变患者的异常模式成为可能,有利于运动训练进行,使患者肢体功能得以提高,但抗痉挛药物的介入时机尚不确定。目的:比较不同肌张力的脑卒中患者应用替扎尼定干预后上肢运动功能恢复的效应。设计:分层随机对照观察。单位:黑龙江省康复医院神经康复中心。对象:以2001-01/2003-12黑龙江省康复医院神经康复中心收治的110例脑卒中患者为观察对象,病例选择标准:①符合第4届脑血管病会议制订的诊断标准,并经头颅CT或M RI确诊为急性脑卒中首次发作。②不伴有听理解障碍及认知障碍,能配合训练,患者对治疗知情同意。③病程…     

充血性心力衰竭患者的内科治疗

心力衰竭(简称心衰)是各种心脏病进展至严重阶段而引起的一种复杂的临床表现，主要特征为左心室和(或)右心室功能障碍及神经体液调节的改变，常伴液体潴留、运动耐受性降低和生存时间明显缩短。     

FMEA管理模式联合FTS护理对老年骨科手术患者护理质量的影响

目的探讨失效模式和效应分析(FMEA)管理模式联合加速康复外科理念(FTS)护理模式应用于老年骨科手术患者中对手术室护理质量及预后的影响。方法选取陕西省核工业二一五医院2017年5月至2019年6月收治的130例老年骨科手术患者,按照随机数字表法将其分为观察组和对照组,各65例。对照组患者采用常规护理模式,观察组患儿实施FMEA管理模式联合FTS理念护理模式,观察比较两组手术室护理质量及并发症发生情况。结果观察组手术室护理质量评分高于对照组,并发症发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论对老年骨科手术患者实施FMEA管理模式联合FTS护理模式可明显提高护理质量,减少并发症,促进患者恢复。     

血塞通脉冲控释片的处方优化

目的:优化血塞通脉冲控释片的处方。方法:采用单因素试验考察片芯崩解剂种类、片芯崩解剂用量、包衣液组成和包衣增重百分率对药物累积释放率的影响;采用正交试验考察片芯崩解剂用量、包衣液组成、包衣增重百分率对释药时滞时间的影响,优化血塞通脉冲控释片的处方。结果:最佳处方为片芯崩解剂用量为15%,包衣增重百分率为9%,包衣液组成为Eudragit L100∶EC=1.5∶1(m/m);在该处方条件下,血塞通脉冲片的体外释药时滞为6 h左右,然后迅速脉冲式释药。结论:所选处方合理,制备的血塞通脉冲控释片能达到设计要求,体外试验可达到脉冲释药时滞效果。     

市售中药甘草的质量评价

目的:分析评价市售不同来源的甘草饮片有效成分含量,为开展人工种植甘草药材质量调控研究奠定基础。方法:从河北安国和安徽亳州两个药材交易市场收集48份甘草饮片,依据国家药典标准,采用HPLC法测定甘草酸和甘草苷含量,分析评价不同来源的甘草饮片质量。结果:市面上流通的甘草饮片大多来源于甘肃栽培,其中甘草酸和甘草苷含量均值符合国家药典标准,但距离野生药材质量差距较大,且不稳定。结论:人工种植甘草是市售中药甘草的主要来源,其质量仍需进一步提升,才能替代野生药材。     

系统性红斑狼疮患者的外周血淋巴细胞亚群结果分析

目的研究40例系统性红斑狼疮(SLE)患者不同状态的外周血总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+),T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+),B淋巴细胞(CD3-/CD19+),NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56+)的差异并初步探讨其在SLE发病中的意义。方法根据SLE疾病活动积分(SLEDAI)将SLE患者分为活动组(24例)和非活动组(16例),流式细胞仪检测外周血CD3+/CD4+,CD3+/CD8+,CD3-/CD19+,CD3-/CD16+CD56-表达百分率,对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和抗dsDNA抗体水平的相关性进行研究。结果活动组和非活动组SLE患者外周血总T细胞(CD3+)与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);活动组和非活动组SLE患者外周血T细胞(CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)、NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56-)表达百分率与健康对照组相比,T、B淋巴细胞表达的分率差异均有统计学意义(P=0.043,P=0.027);NK淋巴细胞(P=0.612)差异无统计学意义;活动组与非活动组的总T细胞,差异无统计学意义,而T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)差异具有统计学意义,提示T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+),与SLE活动度相关。T、B、NK细胞与SLE临床表现相关性分析显示,T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)与SLEDAI,抗dsDNA抗体呈正相关(P=0.096);B细胞与C3呈负相关(P=0.048);NK细胞与SLEDAI和抗dsDNA抗体呈负相关(P=0.096)。结果显示T、B、NK细胞异常与SLE临床表现明显相关。结论 SLE患者的外周血总T细胞(CD3+)、T辅助淋巴细胞(CD3+/CD4+)、T抑制淋巴细胞(CD3+/CD8+)、B淋巴细胞(CD3-/CD19+)、NK淋巴细胞(CD3-/CD16+CD56+)可作为SLE诊断及评价活动性的指标。     

腹腔镜与输尿管镜治疗妇科手术致输尿管损伤的临床对比研究

目的:探究与分析腹腔镜与输尿管镜治疗妇科手术致输尿管损伤的临床效果。方法:选取我院自2012年9月至2015年9月收治的100例妇科手术致输尿管损伤患者,按照不同处理方式分为腹腔镜组与输尿管镜组,每组各50例,腹腔镜组给予腹腔镜下输尿管修补术联合内支架引流术,输尿管镜组给予输尿管镜下输尿管支架引流术,对比两组患者手术时间、术中失血量、尿瘘平均消失时间、双J管留置时、治疗前后肾功能及并发症发生率。结果:腹腔镜组与输尿管镜组相比尿瘘平均消失时间、双J管留置时间均无明显差异(P0.05)。相比手术时间、术中失血量有显著差异(P0.05),两组患者的随访时间无明显差异(P0.05),且均未出现感染、肾功能异常、肾积水、输尿管狭窄、输尿管梗阻等严重并发症,在随访期间未见1例复发。腹腔镜与输尿管镜组治疗后较治疗前相比Scr降低、BUN降低、肾小球滤过率升高(均P0.05)。两组治疗后相比SCr、BUN及肾小球滤过率无明显差异(P0.05)。结论:采用腹腔镜下输尿管修补术联合内支架引流术与输尿管镜下输尿管支架引流术治疗妇科手术致输尿管损伤均具有显著疗效,易于被患者认可接受,值得推广。     

儿童患者标本中分离的酵母样真菌的分布及药敏试验

目的了解儿童患者标本中分离出的酵母样真菌的临床分布及其耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法收集2008年1月至12月临床分离的266株酵母样真菌,采用科玛嘉念珠显色培养基和API-20CAUX酵母样真菌鉴定试条鉴定,用假丝酵母菌药敏试条ATB-FUNGUS药敏板测定酵母菌对5氟-胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的敏感性,并以WHONET 5.3软件进行结果分析。结果在临床分离的266株酵母样真菌中,白色假丝酵母菌215株(80.8%),其他酵母菌51株(19.2%)。主要分布在下呼吸道。白色假丝酵母菌对5氟-胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑敏感率分别为99.5%、99.5%、94.9%、90.2%。结论酵母样真菌感染中以白色假丝酵母菌为主。5氟-胞嘧啶、两性霉素B对白色假丝酵母菌有很高的敏感率,应加强对白色假丝酵母菌感染与耐药性情况的监测,以指导临床合理使用抗生素。