过表达胶质细胞神经营养因子基因转染骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

文题释义： 胶质细胞源性神经营养因子：作为轴突再生的一种重要神经营养因子,可诱导间充质干细胞向神经样细胞分化并对中枢神经系统退行性疾病、脊髓损伤后神经功能恢复起到重要作用。 突触素：作为突触的特异性蛋白是突触形成过程中最重要的标志物,主要位于神经元胞体及轴突,可调节神经元轴突延伸,参与突触囊泡的介导转运、神经递质释放,对促进脊髓损伤后神经功能恢复起到重要作用。 背景：胶质细胞神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)在诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外定向分化及促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复过程中起到重要作用。 目的：观察过表达GDNF基因的BMSCs分化情况及其促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复的潜在分子机制。 方法：①以重组目的基因腺病毒转染BMSCs并分为Ad-GDNF-GFP转染组、Ad-GFP转染组、未转染组,免疫荧光鉴定各组细胞神经元特异性烯醇化酶及微管相关蛋白2的表达,Western blot检测各组细胞GDNF、Wnt3a、Wnt7a蛋白表达。②以改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型,将造模成功的45只SD大鼠随机分为3组,分别以过表达GDNF基因BMSCs(GDNF-BMSCs)、BMSCs、PBS移植至脊髓损伤局部。移植后4周采用BBB评分法评估大鼠运动功能恢复情况,苏木精-伊红染色观察脊髓形态变化,免疫组化检测损伤局部神经元特异性烯醇化酶、突触素Ⅰ及胶质纤维酸性蛋白表达,Western blot检测损伤局部Bcl-2、肿瘤坏死因子α蛋白表达。 结果与结论：①Ad-GDNF-GFP转染组BMSCs可向神经元样细胞形态转变并表达神经元特异性烯醇化酶、微管相关蛋白2;Wnt3a、Wnt7a蛋白表达量显著高于Ad-GFP转染组、未转染组;②移植后4周,GDNF-BMSCs移植组大鼠BBB评分明显提高、脊髓空洞面积显著缩小。GDNF-BMSCs移植组脊髓损伤局部胶质纤维酸性蛋白、肿瘤坏死因子α表达量显著低于BMSCs移植组及PBS移植组,而神经元特异性烯醇化酶、突触素Ⅰ及Bcl-2表达量显著高于BMSCs移植组、PBS移植组;③结果表明,Wnt信号通路参与过表达GDNF基因 BMSCs向成熟神经元分化过程,移植后通过降低脊髓损伤局部炎症反应、减少细胞凋亡及胶质瘢痕形成、促进轴突再生,提高BMSCs移植治疗脊髓损伤的疗效。 ORCID: 0000-0001-6467-730X(黄成) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

Replication of the association of the aspartic acid repeat polymorphism in the asporin gene with knee-osteoarthritis susceptibility in Han Chinese

A genetic association of osteoarthritis (OA) and functional polymorphisms in the aspartic acid (D) repeat of the asporin gene was reported in Japanese and European Caucasians; however, the results were controversial. Our objective was to evaluate whether the D repeat polymorphism was associated with knee OA in Han Chinese. The D repeat polymorphism was genotyped in 218 patients who suffered from primary symptomatic knee OA with radiographic confirmation and in 454 age-matched controls, and the allelic association of the repeat was examined. Frequencies of the D13 and D14 alleles were similar to those of Japanese, but different from those of European Caucasians. The D14 allele was significantly over-represented in knee OA patients (P=0.0013; odds ratio 2.04; 95% confidence interval 1.32–3.15). D14 was more frequent in early-onset patients than in late-onset patients (P=0.043) and the age at onset in patients with D14 was earlier (P=0.028; log-rank test). Thus, the association of the D14 allele with knee OA susceptibility was replicated in Han Chinese. This was the first instance that association of the OA susceptibility gene was definitely replicated between different ethnic groups.Electronic supplementary material Supplementary material is available in the online version of this article at and is accessible for authorized users.     

The lysogenic cycle of the filamentous phage Cflt from Xanthomonas campestris pv. citri

A phage, Cflt, forming turbid plaques, was isolated from Xanthomonas campestris pv. citri. After infection, infected sensitive cells become immune to Cflt and produce very few phages. These properties were genetically rather stable. The phage was purified and shown to be filamentous with a size of 1157 +/- 73 nm. The genome size is about 7.62 kb. The phage does not affect the growth of host bacteria. Under natural cultivation conditions Cflt-lysogenized cells could be induced spontaneously to give high phage yields, or cured to give phage-free cells. The integration of Cflt DNA into host DNA was proved by Southern blot hybridization. The lysogenic phage was genetically stable in log phase cells and persisted in stationary phase cells through many cell generations in the absence of extracellular phage reinfection.     

人工关节磨损颗粒诱导钛合金植入物松动的实验研究

为比较不同人工关节微小磨损颗粒诱导假体周围骨吸收及假体松动生物效应的差异。方法：本实验采用Ｘ线摄片骨密度灰度值测定以及植入物推出力学强度测试等手段,对Ｔｉ－６Ａｌ－４Ｖ,Ｃｏ－Ｃｒ－Ｍｏ与ＵＨＭＷＰＥ三种微小颗粒诱导的假体周围骨结构改变及假体松动作定量分析。结果统计分析显示,直径２．５微米的Ｔｉ－６Ａｌ－４Ｖ颗粒诱导植入物旁骨吸收与植入物松动的程度明显低于相同直径的Ｃｏ－Ｃｒ－Ｍｏ颗粒或ＵＨＭＷＰ     

胸腰椎爆裂性骨折形态学异常的放射学测量及其与脊髓损伤的关系

目的：探讨胸腰椎爆裂性骨折形态学异常与脊髓损伤的关系。方法：回顾性分析７８例胸腰裂性骨的,根据椎管正中矢状状径计算椎管狭窄率,并按Ｃｏｂｂ法测量后凸畸形角度,同时记录ＡＳＩＡ下肢运动评分结果：无脊髓损伤、不完全脊髓损伤及完全脊髓损伤三组的椎管狭窄率及后凸畸形角度相差无显著统计撑意义（Ｐ〉０．０５）,椎管狭窄率及后凸畸形角度与ＡＳＩＡ评分相关笥无显著统计学意义（ＰＭ〉０．０５）。结论：胸腰椎爆裂性骨     

氟西汀治疗强迫症双盲自身对照研究

为进一步研究氟西汀治疗强迫症的疗效 ,对我院 1 999年 2月～ 2 0 0 0年 2月间住院并符合 CCMD-2 -R诊断标准的强迫症 ( OCD)患者 1 7例 ,进行双盲自身交叉对照研究 ,结果在试验进行到第 1 0例时 ,试验线跨越 U线 ,A药 (氟西汀 )显著优于 B药 (淀粉 ) ,经 Ridit分析 ,前后自身对照有显著性差异 ,说明氟西汀对强迫症确有较好的疗效。     

LPS诱导小鼠脑小胶质细胞的激活及Tomato lectin的表达变化

探讨小胶质细胞对侧脑室注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的反应及时程变化。采用组织化学方法,观察小鼠单次注射LPS入侧脑室后,Tomatolectin阳性的小胶质细胞于不同时间点在脑内的分布及表达的时程变化。LPS注射24h后,Tomatolectin组织化学染色显示血管内皮细胞、静息的和不同激活状态的小胶质细胞均呈阳性反应,其中Tomatolectin阳性的小胶质细胞明显被激活,2d时达表达高峰,巨噬细胞样的细胞和小胶质细胞呈现出肥大的、阿米巴样或杆状细胞等不同激活状态下的形态特征。这些激活的小胶质细胞主要分布于侧脑室周围的脑实质结构,如海马、隔区、胼胝体、纹状体,第三脑室周围的下丘脑及其它间脑结构。本结果提示:LPS能诱导小鼠脑室周围的脑实质内的小胶质细胞被激活,并上调小胶质细胞内Toma-tolectin的表达,这些细胞可能参与脑内刺激的免疫调节。     

胎儿轻度侧脑室增宽的超声诊断及临床意义

目的 探讨轻度侧脑室增宽胎儿的产前超声表现以及和临床结果之间的关系。 方法 于孕中晚期超声测量胎儿侧脑室体部宽度〉10mm且〈15mm时为轻度侧脑室增宽，对轻度侧脑室增宽的胎儿进行系统的超声检查、染色体核型分析、MRI检查、随访观察等，并进行总结分析。 结果 共发现并随访轻度侧脑室增宽的胎儿14例，其中合并右心功能异常6例，染色体异常（21三体）1例，合并其它颅内结构异常2例（分别为Dandy—Walker综合征和蛛网膜囊肿），合并双手畸形1例，巨大儿2例生后发育正常，产前诊断为孤立性轻度侧脑室增宽3例（2例生后正常，1例生后脑瘫死亡）。 结论 产前超声检查不仅能够敏感地检出轻度侧脑室增宽的胎儿，而且能够发现多种颅内外合并畸形，帮助确定恰当的诊疗措施和遗传咨询。     

建立标准手术体位的实施探讨

目的探讨实施标准手术体位的方法和效果。方法在手术医生、麻醉医生、手术室护士共同参与下,根据生理、解剖知识,考虑病人舒适度,并借鉴国外体位专家的经验,制定标准手术体位,并培训和实施。结果实施标准手术体位后,未发生体位安置不当引起的损伤和压疮,手术室护士体位安置合格率达99%。结论实施标准手术体位可提高手术病人舒适度,保证手术安全。     

玉竹提取物A对1型糖尿病小鼠的免疫干预作用

目的：观察百合科黄精属中草药玉竹经水醇法提取而来的玉竹提取物A对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠血糖、T淋巴细胞亚群及外周血细胞因子的影响。方法：①实验于2004—05／2004—12在锦州医学院医学实验中心完成。选用C57BL小鼠60只。随机抽取9只作为正常对照组小鼠（只注射等体积枸橼酸钠缓冲液），其余小鼠应用4昏／L链脲佐菌素溶液，按40mg／kg剂量腹腔注射制备1型糖尿病模型，1次／d，连续5d，以血糖≥11Ammol／L，尿糖卅以上2周，为造模成功，低于此值弃去，造模成功36只。将其随机分为4组，每组9只：模型组，玉竹提取物A1，2，4g／kg组。②正常对照组与模型组腹腔注射生理盐水0．5mL，1次／d，共4周；玉竹提取物A1，2，4g／kg组，分别按1，2，4g／kg剂量腹腔注射0．5mL玉竹提取物A（由锦州医学院免疫教研室潘兴瑜教授提供，玉竹的干燥根茎经水醇法提取而得），1次／d，共4周。③用药4周监测血糖变化，应用流式细胞仪检测用药后1型糖尿病小鼠脾T淋巴细胞亚群含量变化；采用酶联免疫分析法检测用药后1型糖尿病小鼠血清白介素4、白介素10、干扰素1水平变化。④组间比较采用方差分析。结果：造模失败15只。正常小鼠9只及造模成功小鼠36只进入结果分析。①空腹血糖水平：用药前各组差异不明显（P〉0．05），用药后，玉竹提取物各剂量组明显低于模型组（P〈0．05～0．01）。②CD4^＋T淋巴细胞含量和CD4^＋与CD8^＋T淋巴细胞比值：模型组明显高于正常对照组和玉竹提取物各剂量组（P〈0．05～0．01），CD8^＋T淋巴细胞含量：模型组明显低于正常对照组和玉竹提取物各剂量组（P〈0．05-0.01）。③血清白细胞介素4和10水平：模型组明显低于正常对照组和玉竹提取物各剂量组（P〈0．05—0．01）。血清干扰素1水平：模型组明显高于正常对照组和玉竹提取物各剂量组（P〈0．05-0．01）。结论：玉竹提取物A经腹腔注射能明显降低1型糖尿病小鼠血糖，其机制与恢复CD4^＋和CD8^＋t淋巴细胞亚群平衡，调节发病过程中细胞因子水平有关。