细胞-支架复合物体内植入修复肌腱缺损的研究与应用

学术背景:肌腱损伤后传统的手术治疗虽然可以减轻患者的痛苦,但其功能重建结果往往不令人乐观。随着组织工程化肌腱的发展,利用组织工程技术修复肌腱缺损已成为一种新的治疗手段。目的:对种子细胞、支架材料、工程化肌腱的构建以及动物实验的方法和检测等研究进展进行综述。检索策略:由作者应用计算机检索Medline,EBSCO以及google scholar引擎中1990-02/2007-05关于组织工程化肌腱的文献,检索词"tissue engineering,engineered tissue,tissue-engineered tendon,scaffold,implantation in vivo,seed cells",检索词被分别组合进行检索,限定文献语言种类为"English"。同时计算机检索维普数据库1990-02/2007-05关于细胞和支架材料的文献,检索词"组织工程,工程化组织,种子细胞,支架,体内植入,组织工程化肌腱",限定文献语言种类为中文。纳入标准:重点选取与构建组织工程化肌腱以及体内植入修复肌腱缺损相关的基础与临床研究。排除标准:关于配子、胚胎和组织工程化骨、血管等的文章。文献评价:①文献来源有RCT,循证医学系统综述、汇总分析、个例报道、经验交流。②共检索到214篇关于细胞和支架材料以及体内植入的文献,其中与本实验关系密切的文献14篇,间接相关45篇,最终纳入35篇符合标准的文献。资料综合:目前运用于组织工程化肌腱的种子细胞主要有间充质干细胞、胚胎干细胞和成纤维细胞,多用聚乳酸、聚羟基乙酸及二者的共聚物作为支架材料。在复合物的培养方面,提出细胞-支架材料复合物体外构建过程中引入动态的机械力牵拉,可使修复后的肌腱具有更好的生物力学强度。组织工程肌腱植入体内后的检测方法除大体观察和组织学检测外,其力学性能检测也是必要的,且分子生物学检测技术也越来越多的应用于研究中。结论:组织工程化肌腱可以成为一种较好修复临床肌腱损伤的方法,但需要探索最适的种子细胞、支架材料、培养条件以及植入体内后的检测方法。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤5例报告

目的:观察嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床效果。方法:①选取2004-02/2005-10南通大学第二附属医院脊柱外科收治的5例男性创伤性脊髓损伤患者,病程3个月～1年,伤后均曾进行脊髓减压内固定手术,且接受过不同种类的神经营养或神经生长因子、高压氧和针灸治疗以及康复治疗。神经功能已稳定,脊髓损伤部位没有压迫性病变及横断性解剖断裂。②取4个月以上中期引产胚胎的嗅球(产妇及家属知情同意),经分离、培养、纯化后制成单细胞悬液,细胞浓度为2×1010L-1。③5例患者全麻下行病变节段后方正中入路,在脊髓损伤部位与正常脊髓上下交界处分多点注入0.025mL嗅鞘细胞悬液,约5×105个细胞。术后常规给予止血、抗感染等处理,硅胶引流管放置5～7d。④分别于术前和术后8周,采用美国国立急性脊髓损伤研究会脊髓神经功能评分对损伤脊髓神经功能进行感觉检查、运动检查及直肠肛门指诊,测试肛门外括约肌是否为完全性瘫痪。结果:按意向处理分析,实验选取5例男性创伤性脊髓损伤患者均完成术后8周随访。手术前后脊髓神经功能恢复评定结果的比较:与术前比较,嗅鞘细胞移植术后8周,除1例患者运动、触觉、痛觉无明显变化外,其他4例损伤脊髓神经功能均有明显改善。运动功能由术前(44.8±9.2)分提高到(56.0±8.1)分,触觉由术前(55.6±12.3)分提高到(68.8±10.1)分,痛觉由术前(57.6±12.9)分提高到(71.6±9.9)分,P均<0.01。结论:嗅鞘细胞移植安全可行,能帮助脊髓损伤伴完全性瘫痪患者恢复部分脊髓神经功能。     

脑损伤大鼠皮质神经细胞凋亡过程中细胞外调节激酶通路的作用

目的:细胞外调节激酶通路在凋亡信号转导中具有重要作用,观察细胞外调节激酶信号转导通路在颅脑损伤中的作用。方法:实验于2004-09/2006-01在华北煤炭医学院中心实验室完成。选用SD大鼠70只,按随机数字表法分为2组,即对照组(n=28)和模型组(n=42),每组又分为伤后10min,30min,3h,6h,24h,48h和72h7个时相点,对照组每个时相点4只大鼠,模型组每个时相点6只大鼠。按照Mamarou方法建立大鼠重型弥漫性颅脑损伤模型,在不同时相点采用免疫组化、Western-blot法分别检测两组大鼠颅脑损伤后皮质细胞外调节激酶的表达情况,另外分别应用原位杂交方法、原位末端标记法检测半胱氨酸天冬氨酸酶3及凋亡细胞,并进行比较。结果:70只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①模型组大鼠皮质p-细胞外调节激酶1/2蛋白在伤后10min时已较对照组明显升高(P<0.05),逐渐增强,伤后6h达高峰,24h仍有大量表达,明显高于对照组(P<0.01),至伤后48h降至对照组水平(P>0.05)。②模型组大鼠皮质半胱氨酸天冬氨酸酶3mRNA杂交阳性信号表达在伤后3h开始升高,48h达高峰,72h仍明显高于对照组(P<0.01)。③模型组大鼠皮质伤后3h偶见原位末端标记阳性细胞,6h开始增加,明显高于对照组(P<0.01),48h达高峰。④p-细胞外调节激酶1/2蛋白与半胱氨酸天冬氨酸酶3mRNA及原位末端标记阳性细胞均主要分布于损伤中心区及其周围,在分布区域上呈现很大的相似性。结论:脑损伤时p-细胞外调节激酶1/2蛋白表达呈一种过度激活状态,而且与半胱氨酸天冬氨酸酶3mRNA及原位末端标记阳性细胞在分布区域上呈现很大的相似性,推测大鼠脑损伤后细胞外调节激酶通路的过度激活是导致神经细胞凋亡的作用途径之一。     

中国亚健康研究的现状与分析

目的:描述中国亚健康状态研究现状,分析研究进展情况和存在问题,展望研究发展趋势。方法:从症状学、存在率与发生率、病因学、诊断学、自然史及干预措施等6个方面对国内亚健康状态研究的文献进行综述和分析。结果:症状学、存在率的研究已有较丰富的资料,主要存在问题是:自然史与发生率的研究尚处于空白阶段;病因学研究比较薄弱;测量工具有待规范;诊断及疗效判定标准尚未统一;缺乏干预措施的研究。结论:亚健康研究是当前医学科研的热点,前述许多存在问题的原因是研究方法的局限性(目前仅有横断面研究和病例对照研究),前瞻性研究是该领域进一步发展的重要趋势。     

Mutation L437P in the 2B domain of keratin 1 causes diffuse palmoplantar keratoderma in a Chinese pedigree

Diffuse palmoplantar keratoderma (DPPK) is an autosomal dominant genodermatosis characterized by uniform hyperkeratosis of the palm and sole epidermis. This disorder can be caused by mutations in the genes keratin 1 , keratin 9 , keratin 16 , desmoglein 1 and plakoglobin . Here we present a DPPK Chinese pedigree and identify the aetiology as a novel missense mutation, L437P, located in a highly conserved helix motif in domain 2B of KRT1. Functional analysis shows that overexpression of the L437P mutant in cultured cells leads to abnormal intermediate filament networks and filament aggregation. This gain-of-function mutation highlights the role of domain 2B in mediating filament assembly.

Conflicts of interest

The authors declare that they have no actual or potential conflicts of interest to disclose. Appropriate approval and procedures were used concerning human subjects.     

转化生长因子β1抗体复合缓释载体生物蛋白胶应用于鞘管区预防屈肌腱粘连的生物力学分析

目的:单纯生物蛋白胶是一种良好的缓释载体,拟通过与转化生长因子β1抗体复合应用于肌腱损伤局部,观察其对鞘管区屈肌腱粘连的预防作用和对肌腱愈合的影响。方法:实验于2003-01/04在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。①实验动物:将72只来亨鸡(leghorn)按随机化原则分为单纯转化生长因子β1抗体组、单纯生物蛋白胶组、转化生长因子β1抗体复合生物蛋白胶组及生理盐水组,每组18只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:分别将鸡左足第三、四趾趾深屈肌腱横断,作The 4-strand Cruciate repair缝合,然后按照分组,用1 mL无菌注射器,向鞘管区分别注入0.2 mL转化生长因子β1抗体(8 mg/L)和生理盐水,用生物蛋白胶专用注射器向鞘管区分别注入0.2 mL生物蛋白胶和转化生长因子β1抗体生物蛋白胶复合液。③实验评估:术后5 d行早期功能锻炼,在第1,3,8周麻醉后处死取材,第四趾标本分别行大体观察、组织学检查和缝合处粘连评分。第三趾在SHIMADZU SPL-10kN型材料实验机上进行生物力学测试。结果:转化生长因子β1抗体复合生物蛋白胶组术后3,8周,缝合处粘连程度评分、肌腱滑动距离、模拟主动屈曲度及屈曲功均优于其余3组,且差异有显著性意义(P<0.05)。4个处理组的最大抗断裂载荷差异无显著性意义(P>0.05)。结论:转化生长因子β1抗体复合缓释载体生物蛋白胶可以有效预防术后肌腱粘连,并且不影响肌腱的正常愈合进程。     

甲醛存在下阿米卡星的单扫描示波极谱法测定

研究了在Britton-Robinson(pH8.0)介质中,阿米卡星(AMK)甲醛衍生物的单扫描示波极谱行为,并对其电极反应机理作了研究。在选定条件下,AMK浓度在6.0×10^-7～5.0×10^-5mol·L^-1范围内与峰电流呈线性,相关系数为0.9998,检测限为2.4×10^-7mol·L^-1。方法无需前处理即可用于针剂、尿及血清样品中痕量AMK测定,回收率90%～110%,相对标准偏差小于4.1%。     

棉酚衍生物和酚醛类化合物的合成及抗生育作用

合成了一批三羟基萘醛、多羟基联苯醛、多羟基联萘醛和一些棉酚衍生物,提供抗生育研究。     

亚甲基二膦酸的合成

目的：改进工艺，合成药用原料亚甲基二膦酸。方法：以亚膦酸三异丙酯为原料，经取代、缩合、水解等反应而合成目标产物。结果：产物结构经红外光谱、核磁共振等分析确证；制成药盒符合中国药典2000年版标准。结论：此合成工艺实用可行。     

天然有机化合物质谱研究——Ⅺ.苯丙型苷快原子轰击质谱MNa~+的MIKES谱

研究了六种苯丙型苷与Na~+加合离子的快原子轰击质谱(FAB—MS)和质量分离离子动能谱(MIKES)。结果表明:在FAB谱中[M+Na]~+加合离子的丰度要比[M+H]~+离子高得多。由此可给出糖苷的分子量信息,[M+Na]~+离子的MIKES谱可给出糖基序列信息。