甲氨蝶呤损伤大鼠输卵管的实验研究

目的:观察甲氨蝶呤(MTX)对假孕SD大鼠输卵管急性损伤及远期恢复效应.方法:假孕SD大鼠72只随机分4组(每组18只),3组行MTX腹腔注射:1 mg/kg组、2mg/kg组、5 mg/kg组,另1组(对照组)用0.9%氯化钠液.处理后10天、2月分别选取半数大鼠输卵管组织行组织学和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)观察.结果:①MTX处理后10天的各组输卵管标本中,均出现了与MTX作用剂量相关的炎性反应,但2月时逆转至正常;②10天时ER阳性率随MTX剂量增加而下降,且ER阳性率1 mg/kg组、2 mg/kg组在2月时明显高于10天时(P＜0.05),有回升现象,但5 mg/kg组在两个时间点的ER表达则无明显差异(P＞0.05);③PR阳性率10天时各组内不同剂量MTX处理后差异均无统计学意义(P＞0.05),但2月时各组内PR阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.05).结论:MTX作用后的输卵管出现了剂量依赖性的近期及远期、可逆或不可逆性的结构及功能的损伤,为临床使用MTX行肿瘤化疗或保守治疗异位妊娠提供了理论依据.     

宫颈鳞癌中Cyclin E的表达和HPV16感染的相关研究

目的探讨Cyclin E在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与HPV16感染的关系.方法应用免疫组化S-P法对34例宫颈鳞状细胞癌组织进行Cyclin E与HPV16的检测,并与宫颈不典型增生和正常宫颈组织进行比较.结果正常宫颈组织无Cyclin E表达,宫颈不典型增生组织仅有少量袁达(11.11%),宫颈鳞状细胞癌有58.52%表达(P＜0.001),且与HPV16感染有明显相关性(P＜0.05).结论高危HPV感染是宫颈癌的重要病因,HPV感染通过多种途径改变了细胞的周期性调控,诱发细胞周期GI-S期检测点异常,引起细胞恶性增生,HPV感染与Cyclin E异常表达在宫颈癌的发生发展中起重要作用.     

多相脂质体(139)不同温度下的~1HNMR谱变化和~(13)CNMR谱T_1的研究

应用FT-NMR观察多相脂质体(139)不同温度下的~1HNMR谱的变化显示:78～90℃之间,谱线有突变,升至108℃后再冷至室温,振摇,谱线复原。添加兼性大分子化合物,磷脂的亲水端和疏水端的质子峰峰形变矮变宽。其~(18)CNMR的弛豫时间T_1:端甲基为0.90,酰头基为0.60,说明多相脂质体(139)比大豆磷脂双分子层的流动性变小,酰头基的自由度增加。     

浅析代谢综合征的中西医病因病机

代谢综合征(MS)作为一组症候群,因对高血压病、糖尿病、心脑血管病发病作用认识的不断深入以及社会经济不断发展,使人们运动量减少,摄食习惯的改变,生活节奏的加快,造成今天肥胖症等在发展中国家和发达国家的流行.防治代谢综合征,并减少其临床并发症成为今天面临的迫切任务.为探索代谢综合征实质,现对代谢综合征的中西医病因病机学作以浅析.     

5-氮脱氧胞苷及曲古抑菌素A影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性及浓度依赖性

目的:探讨甲基转移酶抑制剂——5-氮脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-dC)和组蛋白去乙酰基酶抑制剂——曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性和浓度依赖性。方法:用不同浓度5-aza-dC及TSA按不同作用时间处理供核细胞(鼠尾尖成纤维样细胞),利用实时定量PCR法检测处理后H19基因的表达。结果:不同浓度的5-aza-dC处理组之间H19的表达无明显差异,但延长作用时间可使H19表达增强;TSA使H19的表达下降,但无时间依赖性。结论:长时间低浓度的5-aza-dC能增强供核细胞中H19基因的表达,而TSA则使H19的表达减弱,为体细胞克隆中表观遗传修饰抑制剂的选择及后续基因印迹研究提供了依据。     

骨髓内皮祖细胞EPCs两种分离方法及其对比研究

目的:研究免疫磁珠法和贴壁换液法分离骨髓内皮祖细胞的可行性和条件,并比较两种方法优缺点.方法:利用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取内皮祖细胞,体外观察细胞生长及形态变化,通过检测细胞血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)、Ⅷ因子相关抗原抗体表达、摄取乙酰化-低密度脂蛋白(Ac-LDL)情况和超微结构等进行鉴定.同时,流式细胞检测分离所得细胞的纯度、细胞计数测定分离所得细胞的数量及MTT法检测细胞生长增殖状况等,对两种分离方法进行对比研究.结果:用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取的细胞,体外培养后细胞呈铺路石形,透射电镜显示细胞内具有特征性的W-P小体,免疫荧光染色检测细胞相关抗原VEGFR-2, Ⅷ/vWF 呈阳性,同时细胞摄取Ac-LDL,证实为内皮祖细胞.免疫磁珠法与贴壁换液法相比,分离所得内皮祖细胞数量是后者2倍,纯度为76%,明显高于贴壁换液法的29%;同时,两者对细胞增殖生长无明显影响.结论:利用免疫磁珠法和贴壁换液法均可分离得到骨髓内皮祖细胞,它将成为新的组织工程种子细胞.免疫磁珠法分离得到细胞纯度更高、数量更大,但步骤复杂、价格昂贵;贴壁换液法得到细胞纯度和数量偏低,但方法简单、经济、实用性强.     

黄河三角洲来源真菌Fusarium oxysporum RD-79次级代谢产物研究

研究一株黄河三角洲滨海湿地来源的真菌Fusarium oxysporum RD-79的次级代谢产物及其生物活性。利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、半制备高效液相色谱等分离方法对该菌株发酵产物进行分离纯化,通过核磁共振（NMR）、质谱（MS）等方法,结合相关文献对比鉴定化合物结构;分别采用CCK8法和Griess法对化合物进行抗肿瘤活性和抗炎活性测试。从Fusarium oxysporum RD-79的发酵产物中分离得到8个单体化合物,分别为5-bμtyl-4-methoxy-6-methyl-2H-pyran-2-one（1）、甲醛甲苯（2）、delitpyroneD（3）、3-hydroxymethyl-6,8-dimethoxycoμmaarin（4）、5-[(1S,2S)-1,2-dihydroxybμtyl]-4-methoxy-6-methyl-2H-pyran-2-one（5）、setosphapyroneA（6）、5-(1-hydroxybμtyl)-4-methoxy-6-methyl-2H-pyran-2-one（7）、9-O-methylscytalol A（8）。化合物1~8均可不同程度抑制NO的产生;在浓度为100μg/mL下,化合物1~8均无抗肿瘤活性。     

用熟悉的语言唤醒对全身麻醉患者苏醒质量的影响

目的 观察用熟悉的语言唤醒对全身麻醉患者苏醒质量的影响.方法 全凭静脉全身麻醉下手术患者100例随机分为观察组和对照组,每组50例.对照组患者围麻醉期给予常规处理.观察组在麻醉苏醒期实施熟悉的语言唤醒:术前1 d通过访视和患者建立融洽关系;术毕,在麻醉药停止使用后,用其熟悉的声音呼唤其姓名,每隔15～20 s呼喊1次,...     

顶空气相色谱-质谱法结合相对气味活度值法分析谷糠、麦麸、蜜糠、蜜麸4种辅料的风味成分

目的 探究谷糠、麦麸、蜜糠和蜜麸特征风味成分及差异性风味成分。方法 利用顶空-气相色谱-质谱法（headspace-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS）对谷糠、麦麸、蜜糠和蜜麸样品进行检测,运用相对气味活度值（relative odor activity value,ROAV）分析其关键香气成分,并结合多元统计分析及关键风味成分（ROAV＞1）,对4种不同辅料挥发性成分中的差异性风味成分进行比较分析。结果 从谷糠、麦麸、蜜糠和蜜麸中分别鉴定出19种、12种、24种、26种挥发性成分。ROAV法确定了谷糠、麦麸、蜜糠、蜜麸风味贡献最大的成分分别为癸醛（柑橘香、青草味）、2-正戊基呋喃（青草味、熟谷味）、癸醛、5-甲基呋喃醛（甜香、焦糖气味）。差异性风味成分分析结果显示,庚醛、正辛醛、癸醛、壬醛、γ-松油烯可作为区分糠类辅料和麸类辅料的风味成分。谷糠、麦麸经蜜制为蜜糠、蜜麸后其原有的清香、果香、花香减弱,增加了引发食欲的焦糖香、烘烤香。结论 “蜜香气”“焦香味”可能与美拉德反应及糖降解反应生成的5-甲基呋喃醛、γ-丁内酯等醛类产物有关,“焦麸气”的香气来源与美拉德反应生成的2,5-二甲基吡嗪等吡嗪类成分密切相关。研究客观地评价4种不同辅料的风味成分,为糠类、麸类辅料炮制饮片提供科学内涵的理论依据。