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目的研究HIV-1的调节基因Nef对ECV304细胞ICAM-1表达的影响,从而为分析HIV-1感染引起内皮细胞生物学活性的变化,以及为阐明Nef参与HIV-1致病的分子机制奠定基础。方法应用本实验室已经建立保存的HIV-1Nef基因在内皮细胞的稳定表达细胞株ECV304-Nef和其阴性对照细胞株ECV304 pcDNA 3.1(+),通过RT-PCR、实时定量PCR(real-time PCR)、Western blot、FCM和细胞黏附试验分析ECV304-Nef细胞ICAM-1的表达水平。结果 RT-PCR、real-time PCR结果显示ECV304-Nef细胞ICAM-1 mRNA表达水平明显升高,为对照组的(4.3±0.2)倍;Western blot结果示ECV304-Nef细胞I-CAM-1蛋白的表达水平高于对照组;FCM分析显示ECV304-Nef细胞和对照组细胞ICAM-1阳性细胞百分率分别为(35.3±2.2)%和(12.5±0.8)%(P0.01),两组间ICAM-1表达有显著差异。细胞黏附实验观察到ECV304-Nef细胞黏附的Jurkat细胞数明显多于对照组,荧光仪定量分析结果显示ECV304-Nef细胞黏附的Jurkat细胞的荧光强度值显著高与对照组(P0.05)。结论本实验证实了HIV-1Nef基因可以上调血管内皮细胞细胞黏附分子ICAM-1的表达。 相似文献
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目的:探讨宫颈癌组织中ATM(毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白,ataxia telangiectasia mutated)表达与放射敏感性的关系。方法:选择13例对放射耐受的宫颈癌患者作为实验组,同时选择34例对放射敏感的宫颈癌患者作为对照。采用免疫组织化学染色方法,对两组患者放疗前癌组织进行ATM蛋白检测。结果:癌组织ATM蛋白的表达在敏感组和耐受组分别为50.0%(17/34)和84.6%(11/13),耐受组明显高于敏感组(P=0.046)。结论:宫颈癌组织中ATM蛋白的高表达可导致肿瘤对辐射的耐受,ATM的表达状态可能作为预测宫颈癌放射敏感性的一项指标。 相似文献
44.
目的 观察腺病毒载体对肝癌细胞的转染效率及其介导的人野生型 p5 3、GM CSF和B7 1基因在肝癌细胞中的表达。方法 不同MOI的Ad GFP感染肝癌细胞 ,48h后计算感染效率 ;BB 1 0 2以5 0MOI感染肝癌细胞 ,48h后免疫组化法及westernblot检测 p5 3表达 ,ELISA检测GM CSF的含量 ,FACS测定B7 1的表达。结果 MOI为 5 0 pfu/细胞时对肝癌细胞的转染效率达 80 %以上 ,目的基因均可在肝癌细胞中高效表达。结论 腺病毒载体对肝癌细胞具有较高的转染效率 ,目的基因均可在肝癌细胞中高效表达 ,为进一步研究BB 1 0 2在肝癌治疗中的应用奠定了基础 相似文献
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目的 探讨肝癌合并门静脉高压症施行联合手术的可行性 ,手术方式及手术适应症。方法 筛选 33例施行联合手术治疗的该类病人作回顾性临床分析。结果 术后并发中等量腹水 5例 ,胸腔积液 4例 ,膈下脓肿 1例 ,1例术后 2周死于肝肾衰竭 ,15例出院后均死于肝癌复发 ,无食管胃底曲张静脉破裂出血死亡 ,此死亡的 17例病人平均生存 2 0 .2 9月。另 16例术后至今仍然存活 ,生活均能自理 ,其中 2例术后 4 2月余仍带瘤生存。结论 合理掌握手术适应症和手术方式 ,对肝癌合并门静脉高压症施行联合手术治疗是安全可行的。 相似文献
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目的:克隆大鼠胰高糖素样肽-1(GLP-1)的编码基因,构建荧光真核表达载体,为研究GLP-1与糖尿病的相关性奠定实验基础。方法:用RT-PCR方法从大鼠胰腺组织中扩增GLP-1的编码基因,克隆至PMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至荧光真核表达载体pEYFP-N1中。结果:测序证实从胰腺中扩增出的GLP-1编码基因的序列及读框全部正确,重组质粒pEYFP-GLP-1经酶切后产生与理论预期长度相符的片段。结论:克隆了大鼠GLP-1的编码基因,成功构建了荧光真核表达载体pEYFP-GLP-1。 相似文献
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目的:比较伯氏疟原虫氯喹抗性(RC)株和敏感(N)株对宿主肝脏细胞色素P450ⅡB1基因mRNA转录影响的差异.方法:以小鼠CYP450ⅡB1基因的cDNA(552bp)为探针,分别与感染伯氏疟原虫RC株和N株的小鼠肝脏总RNA进行Northernblot杂交.结果:感染伯氏疟原虫N株小鼠肝CYP450ⅡB1基因的mRNA明显低于感染RC株鼠及正常对照鼠,而感染RC株鼠与正常对照鼠之间该基因的转录无明显差异.结论:伯氏疟原虫RC株和N株感染对宿主肝脏CYP450ⅡB1基因mRNA转录的影响有显著差异,为氯喹抗药性疟原虫可加速宿主氯喹代谢的抗药性假说提供了分子生物学依据. 相似文献
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