正交试验优选黑骨藤的超声提取工艺研究

目的 研究黑骨藤的最佳提取工艺.方法 以杠柳苷提取率为指标,采用正交试验优选提取工艺参数.结果 最佳工艺条件:溶剂为50％乙醇,料液比1∶15,功率800 W,温度50℃,提取2次,每次20 min.结论 此工艺合理可行,适用于黑骨藤中杠柳苷的提取.     

慢性再生障碍性贫血患儿血浆可溶性干细胞因子及其受体水平测定的意义

目的探讨可溶性干细胞因子(SCF)及其受体(s-kit)与儿童慢性再生障碍性贫血(CAA)发病的关系。方法利用ELISA法测定CAA患儿、正常儿童外周血浆及脐血血浆s-kit及SCF水平。结果CAA组血浆s-kit水平(13.02±5.18)μg/L低于正常儿童组(17.82±5.36)μg/L和脐血组(19.0±5.63)μg/L,CAA组血浆SCF水平(365.5±98.35)μg/L,低于正常儿童组(469.26±102.32)μg/L和脐血组(567.22±135.88)μg/L。结论CAA组血浆s-kit及SCF水平降低,提示s-kit及SCF可能在儿童CAA发病中起一定作用。     

胆红素对新生儿脐血单核细胞髓样分化蛋白-2、肿瘤坏死因子受体相关因子6mRNA表达的影响

目的观察脐血单核细胞(CBMC)经不同水平胆红素孵育后髓样分化蛋白2(MD-2)、TNF受体相关因子6(TRAF6)mRNA表达的变化。方法采集10例健康足月新生儿的脐血,经纤维蛋白结合法分离得CBMC,将其加入含不同水平胆红素(0μmol.L-1、17.1μmol.L-1、42.8μmol.L-1、102.6μmol.L-1、153.9μmol.L-1、220.6μmol.L-1和307.8μmol.L-1)的牛血清清蛋白溶液中孵育1 h,再加入脂多糖(LPS)刺激30 min。收集CBMC,采用反转录-PCR方法测定其MD-2、TRAF6 mRNA的表达水平。结果 1.LPS单独作用对CMBC MD-2 mRNA和TRAF6 mRNA表达水平无明显影响,低水平胆红素(17.1μmol.L-1、42.8μmol.L-1)单独作用对CBMC MD-2 mRNA和TRAF6 mRNA表达水平无明显影响。2.先经不同水平胆红素孵育,再接受LPS刺激,胆红素有抑制细胞MD-2 mRNA表达的趋势,随着胆红素水平的升高,抑制趋势越明显;先经不同水平胆红素孵育,再接受LPS刺激,低水平胆红素促进细胞TRAF6 mRNA的表达,当胆红素≥102.6μmol.L-1时,抑制TRAF6 mRNA表达,胆红素水平越高,抑制作用越明显。在相同胆红素水平作用下,随着MD-2 mRNA表达水平的降低,TRAF6 mRNA表达水平随之降低。结论低水平胆红素对CBMC MD-2 mRNA的表达无明显影响,对TRAF6 mRNA的表达有促进作用。高水平胆红素对二者的表达均有抑制作用,随着胆红素水平升高,抑制作用越来越明显。高胆红素血症患儿免疫功能低下可能与高浓度胆红素对免疫细胞的抑制作用有关。     

尼莫地平对神经元退行性变模型小鼠脑组织中铁离子的影响研究

目的:探讨尼莫地平对神经元退行性变模型小鼠脑组织中铁离子的影响。方法:取小鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和尼莫地平高、中、低(80、40、20mg.kg-1)剂量组,每组35只,后4组脑室内注射0.25氯化铝2μL,每天1次,连续5d,建立神经元退行性变小鼠模型,假手术组注射等体积人工脑脊液;5d后各组灌胃给予相应药物,每天2次,连续30d,末次灌胃24h后观察其脑组织的病理学变化,考察海马组织中丙二醛(MDA)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白、铝离子和铁离子水平变化。结果:与模型组比较,尼莫地平高剂量组神经元损伤明显减轻,其中MDA、HO-1蛋白和铁离子水平明显降低(P<0.05);其余指标及尼莫地平中、低剂量组各项指标均无明显变化。结论:尼莫地平可能通过抑制HO-1蛋白表达维持铁离子代谢平衡,发挥缓解神经元退行性变的作用。     

针刀松解法对肩周炎模型家兔抗氧化能力的影响

目的 观察针刀松解法对不同病理分期肩周炎模型家兔抗氧化能力的影响,探讨针刀松解法对肩周炎干预作用的可能机制.方法 将48只雄性新西兰兔随机分为正常组、模型组、电针组、针刀A组(疼痛期干预)、针刀B组(僵硬期干预)、针刀C组(疼痛期及僵硬期均干预),每组8只.应用持续劳损加冰敷方法制备肩周炎家兔模型,电针组和针刀各组分别行电针和针刀治疗,于实验第33天进行实验取材,分别取血清及肱二头肌、冈上肌、冈下肌、大圆肌,检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)的变化.结果 针刀松解法对不同病理分期的肩周炎模型家兔血清和局部肌肉中的MDA均具有良好的调整作用,可显著降低肩周炎模型家兔血清和局部肌肉组织中异常MDA含量(P＜0.05,P＜0.01),同时对血清和肌肉组织中的SOD和T-AOC也有较好的调整作用.结论 针刀松解法可对肩周炎模型家兔血清和局部肌肉组织中的氧自由基代谢发挥良性调节作用,针刀松解法对不同病理分期的肩周炎模型家兔抗氧化能力的影响,可能是其发挥治疗作用的重要环节之一.     

新型循环动力模式大鼠心脏移植模型的建立

目的目前,国内所有大鼠腹部异位心脏移植均沿袭了Corry的传统的移植心脏血流循环构建模式,但其操作难度限制了其广泛应用,尝试一种新型的、更简介高效的心脏移植循环重建新技术。方法本方法利用大鼠供体大鼠肝脏以上下腔静脉代替肺动脉与受体肾以下腔静脉吻合。结果新方法双血管缝合时间为(30.5±2.1)min,明显短于传统血管吻合方法(39.7±3.6)min,术后心脏复跳时间也由原来的(1.9±0.4)min缩短到(1.1±0.2)min。结论新循环重建技术降低了大鼠心脏移植难度,缩短了移植心脏缺血和复跳时间。     

丁甘仁辨治哮喘思路探析

丁甘仁为孟河四大家的杰出代表,著名的中医临床家、教育家,其著录的《丁甘仁医案》一书,充分反映了丁甘仁诊疗临床各科之经验。《丁甘仁医案》卷四记录14例哮喘医案,可归纳丁甘仁对哮喘的辨治思路：治疗兼顾内外,疏外邪、化内饮以止咳喘,注重调理脏腑气机,重纳肾气、健脾气、降肺气以止咳喘;用药上多选温药化痰,以脾肺肾经药为主,善用鹅管石治喘急,海浮石化老痰,半夏配茯苓杜生痰之源,补骨脂配五味子治肾虚不纳,远志利肺气纳肾气;组方上采撷众方,汤丸并用。     

CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN）能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组（慢性哮喘组）、B组（CpG-ODN干预组）和C组（GpC-ODN对照组）分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组（生理盐水对照组）用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时（d1, d14）和激发阶段（每2周1次）分别给予60μg／mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC）作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液（bronehoalveolar lavage fluid,BALF）作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 （interleukin-4,IL-4）、白介素-13（interleukin-13,IL-13）和γ-干扰素的mRNA（interferon-γ,IFN-γ）表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[（89±10）×10^4／mL]、血清IgE值[（279±53）ng／mL）、IgG1（A值2．151±0．628）、IgG2α（A值0．772±0．245）、BALF中EPS（6．3±1．3）]×10^5／mL）及百分比[（18．1±3．0）％]较D组明显增高（P〈0．01）;且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[（分别为（5．72±3．89）×10^-2、（9．45±5．91）×10^-2和（3．23±1．69）×10^-2）]也明显高于D组（P〈0．05）。用CpG-ODN干预后（B组）,除IgG2α（A值1．186±0．414）和IFNγmRNA表达量[（18．91±9．85）×10^-2]增高外（P〈0．05）,其余指标均低于A组（P〈0．05）。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性（P〉0．05）。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。     

链霉菌多糖的免疫学活性研究

目的 研究链霉菌多糖(SMP)对正常小鼠和免疫抑制模型小鼠的免疫调节活性.方法 通过混合淋巴细胞培养方法检测SMP对正常小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用的影响,用酸性α-醋酸萘酯酶染色法观察免疫抑制小鼠模型外周血中T淋巴细胞的变化,以及流式细胞仪检测免疫抑制模型小鼠脾细胞中T细胞亚群Lyt2 和L3T4 的比例变化.结果 SMP可以明显促进混合淋巴细胞的增殖,并对免疫抑制模型小鼠T淋巴细胞的抑制有保护作用,还可以调节模型小鼠CD4 /CD8 的比值至正常水平.结论 SMP具有调节免疫功能的作用.     

大鼠心肌梗死后心肌高迁移率族蛋白HMGB1的时程变化

目的 探讨大鼠心肌梗死模型后不同时间高迁移率族蛋白(HMGB1)的时程变化.方法 结扎SD大鼠左冠状动脉前降支造成左室大面积心梗,分别于术后1、2、4、8周测心功能判断造模是否成功后开胸取心脏.分别运用实时荧光定量PCR和Western蛋白印迹技术观察心肌梗死后不同时间点HMGB1在mRNA和蛋白水平的表达变化.结果 心功能检测提示造模成功,心梗大鼠术后早期(1 w)HMGB1 mRNA表达上调(P＜0.01),而心梗后期(8周)则表达显著减少(P＜0.01).与mRNA水平变化类似,HMGB1蛋白水平在心肌梗死组大鼠术后早期(1～2周)表达水平增加(P＜0.01),而心梗后期(8周)则显著下调(P＜0.05).结论 HMGB1作为炎症调节因子,在心梗早期对心肌的炎性反应进行调控;并在心梗后期参与调节基因转录,进行心肌修复.在心梗的不同阶段对HMGB1的表达进行干预有望减少心梗并发症,改善预后.提高患者长期存活率.