甘草药材HPLC指纹图谱研究

目的建立甘草药材的HPLC指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法,选用Zorbax SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-1.2%醋酸溶液(梯度洗脱);分析时间70min;检测波长为254nm。结果建立了甘草药材的HPLC指纹图谱,标定了甘草药材38个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。结论方法稳定、可靠、重复性好,可为甘草药材质控标准的制定和含甘草的中药方剂的物质基础研究提供参考。     

护心灵对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 探讨护心灵(HXL)对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法 采用冠状动脉结扎法制备大鼠急性心肌缺血模型,观察护心灵对其心电图、心肌梗死范围以及血清中酶活性的影响。结果 HXL可以改变缺血再灌注损伤大鼠心电图ST段的变化幅度,降低大鼠急性心肌梗死面积,抑制血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活力,同时降低丙二醛(MDA)的含量。结论 HXL对心肌缺血再灌注损伤具有较好的保护作用。     

RNAi载体构建及其对PLC/PRF/5细胞突变p53基因抑制作用的实验研究

目的利用RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术，以突变p53基因为靶基因，构建干扰载体，并观察载体对肿瘤细胞生长周期的影响，为下一步探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计具有小发夹结构的两条DNA序列，经退火成为互补双链，再克隆至干扰载体中，转化TOP10菌株，提取质粒行酶切鉴定，稳定转染PLC／PRF／5细胞，Western blot检测p53蛋白，MTT法观察细胞生长曲线，流式细胞仪分析细胞周期变化。结果成功构建针对突变p53的特异性RNA干扰载体，此干扰载体转染PL／PRF／5细胞后，p53蛋白表达水平降低，肿瘤细胞生长速度减慢，G1期细胞分布明显增多。结论成功构建针对突变p53的RNA干扰载体，此干扰载体可以有效降低p53蛋白表达水平，导致突变p53基因沉默，进而延缓PLC／PRF／5细胞生长速度，阻滞肿瘤细胞停滞于G1期。     

尿毒症患者血清甲状腺功能测定分析

目的 探讨尿毒症患者体内血清甲状腺激素的变化以及血液透析对其的影响，为临床的诊治提供依据。方法 尿毒症患者分为非血液透析组(A组，30例)和血液透析组(B组，20例)，用化学发光的方法测定其血清甲状腺激素包括TT3、TT4、FT3、FT4、TSH；在血液透析组中有10例患者(C组)血液透析前后测定其血清甲状腺激素；并测定了20例年龄、性别相匹配的健康人群的血清甲状腺功能作为对照组(CG)。结果 尿毒症患者与对照组比较，TT4、FT3、FT4均下降，两组数据比较，差异有显著意义，其余差异无显著意义。血液透析前后比较甲状腺激素各项指标差异无显著意义。非血液透析组中BUN、Scr与FT3、FT4呈负相关，与TSH无相关性。结论 在尿毒症患者有较高频率的甲状腺功能减退，在终末期肾脏疾病的患者中检测甲状腺功能应作为常规。     

联合应用化疗药物对三氧化二砷耐药白血病细胞的毒性实验研究

目的:探讨化疗药物联合应用对三氧化二砷(As2O3)耐药白血病细胞(K562/AS2)的毒性作用。方法:细胞毒实验采用MTT法,二药合用时细胞毒性作用采用ChouTalalay联合指数法分析,细胞表面P糖蛋白(Pgp)和细胞内柔红霉素(DNR)浓度测定采用流式细胞术测定。结果:K562/AS2细胞对三氧化二砷、柔红霉素、鬼臼乙叉苷(VP16)、三尖杉酯碱(H)、米托蒽醌(NVT)和阿糖胞苷(AraC)的耐药倍数分别为7.4、2.9、3.8、3.6、2.8和1.1。K562细胞和K562/AS2细胞的细胞表面Pgp或细胞内任意荧光强度无显著的统计学意义(P>0.05)。As2O3与DNR、VP16、H或NVT联合应用时,对K562、K562/AS2和Pgp表达的白血病细胞(K562/A02)细胞的联合指数均大于1。异搏定与DNR联合应用时,对K562和K562/AS2细胞的联合指数均大于1,但是对K562/A02细胞的联合指数均小于1。结论:K562/AS2细胞对As2O3、DNR、VP16和NVT耐药,其机制与Pgp表达无关。异搏定联合应用DNR可以逆转K562/A02对DNR的耐药性,不能逆转DNR对As2O3耐药细胞的耐药性。As2O3与DN、VP16、H和NVT联合应用时,对K562、K562/AS2和K562/A02细胞的毒性均为拮抗作用。     

炎症因子与胰岛素抵抗和2型糖尿病大血管病变的相关性研究

目的探讨炎症因子C-反应蛋白（CRP）与胰岛素抵抗（IR）和2型糖尿病（T2DM）大血管病变的关系。方法用颗粒增强免疫沉淀法测定T2DM合并大血管病变（70例）、T2DM无大血管病变（60例）及正常对照组（90名）的血清超敏CRP（usCRP）水平变化；用HOMA—IR模型作为估计IR的指标；将CRP与HOMA—IR、空腹胰岛素（FINS）、同型半胱氨酸（Hcy）、空腹血糖（FBG）、体重指数（BMI）、腰臀比（WHR）、甘油三酯（TG）等作相关分析。结果T2DM合并大血管病变组血清usCRP水平明显高于T2DM无大血管病变组及正常对照组（P〈0．01），T2DM无大血管病变组高于正常对照组（P〈0．01）。当调整SBP、FBG、TG、WHR等因素的影响后，协方差结果显示usCRP在T2DM合并大血管病变组仍高于T2DM无大血管病变组及正常对照组（P〈0．05），T2DM无大血管病变组高于正常对照组（P〈0．05）。在T2DM合并大血管病变组，Person相关分析显示，usCRP与FINS、HOMA-IR、TG呈正相关（P值分别〈0．05、〈0．01和〈0．05），与Hcy等无关。逐步线性回归结果显示，TG、HOMA—IR是影响CRP的主要因素。结论CRP可能是T2DM和T2DM大血管病变的危险因子，CRP可能通过胰岛素抵抗参与了T2DM大血管病变的发生和发展。     

环氧化酶-2基因启动子甲基化及表达与胃黏膜病变的关系

目的 探讨环氧化酶2(COX-2)基因启动子区甲基化水平和蛋白表达与胃黏膜病变的关系,并对其相关的影响因素进行研究.方法 以1201例患有不同胃黏膜病变的高危人群为研究对象,采用免疫组织化学方法榆测COX-2表达,用亚硫酸氢钠-变性高效液相色谱(DHPLC)对COX-2启动子甲基化率进行定量分析,采用13C尿素呼气实验(13C-UBT)对幽门螺旋杆菌(H priori)感染状况进行测定.结果 COX-2甲基化率中位数随胃黏膜病变的加重逐渐升高,在浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎(SG/CAG)、肠上皮化生(IM)及不确定性异型增生和异璎增生(Ind DYS/DYS)病变中分别为10.6%、11.8%、13.8%,各病变组之间差异有统计学意义(X2=8.312,P=0.016).分层分析显示,在H pylori感染阴性病例中,COX-2甲基化率仍随病变加重明显升高,在SG/CAG、IM、Ind DYS/DYS病变中其中位数分别为8.8%、10.6%、14.1%(X2=6.629,P=0.036).进一步分析发现,COX-2甲基化率随着COX-2表达强度的增强而降低,由COX-2弱阳性表达的13.3%降至强阳性表达的7.6%(X2=10.400,P=0.015).结论 COX-2启动子甲基化水平与胃黏膜病变程度及H pylori感染状况密切相关,并与COX-2表达强度呈负相关,说明COX-2启动子区异常甲基化可能在胃黏膜病变的演变过程中起重要作用.     

介质灌装技术—无菌加工医疗产品生产灌装线无菌水平的确认技术

本文介绍了ISO 13408-1标准中规定的介质灌装技术,该技术适用于医疗器械、药品、生物制品等采用无菌加工技术生产的医疗产品灌装线的污染控制.介质灌装是一项采用微生物培养介质评价无菌灌装过程无菌保证水平的方法.     

影响院内心脏复苏成功的多因素临床分析

目的 研究心脏猝死患者临床特征及影响其成功复苏的相关因素。方法 对我院76例住院患者心跳骤停心脏复苏术进行回顾分析。结果 76例患者即刻心脏复苏成功率达47例(61．8％)，完全成活率28例(36．8％)，总死亡率63．2％。复苏成功与复苏开始的时间、心跳骤停的方式、心脏的结构和功能状况呈正相关，与电除颤的次数呈负相关，与年龄性别关系不明确。结论 即刻心脏电复律是影响心脏复苏成功的关键因素，持续有效的心脏按压是保证心肺复苏成功的前提条件，基础心脏病是影响转归的主要因素。     

血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60抗体与消化性溃疡的关系

目的：探讨幽门螺杆菌(Hp)感染患者血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60(Hsp 60)抗体与消化性溃疡的关系。方法：检测胃溃疡、十二指肠球部溃疡、慢性浅表性胃炎患者Hp感染及血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体表达情况。结果：(1)血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体阳性表达仅见于Hp阳性患者。Hp阳性胃溃疡、十二指肠球部溃疡患者血清抗幽门螺杆菌Hsp抗体阳性率明显高于慢性浅表性胃炎患者(均P＜0．05)。(2)26例血清抗幽门螺杆菌Hsp抗体阳性的消化性溃疡患者在Hp根除及洛赛克疗程结束后4周，其中7例抗体转为阴性。结论：血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体可能与Hp感染所致消化性溃疡的发生有关；血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体不能作为近期判断Hp根除与否的标准。