肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用

目的:观察大肠杆菌内表达的pTYB2-T42重组质粒经纯化后获得的肿瘤抑素相关肽T42,在体外对人脐静脉内皮细胞及肿瘤细胞的抑制作用。方法:实验于2006-06/11在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关T42肽并用几丁质亲和层析纯化。采用四甲基偶氮唑盐比色法研究10～200mg/L肿瘤抑素相关肽T42、T19、T21、T19 T21半量联合和顺铂对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞生长的影响,采用苏木精-伊红染色检测40mg/LT42肽作用24h后对细胞形态的影响,划痕修复实验研究40mg/LT42肽和40mg/L的T19肽 T21肽半量联合分别作用24,48h后对细胞迁移的影响。结果:①四甲基偶氮唑盐试验表明10～200mg/LT42肽对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞有明显抑制作用且呈剂量依赖性,IC50分别为45mg/L和51mg/L。②40mg/LT42肽作用24h后可见人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃癌细胞单个凋亡细胞与周围细胞分离,细胞皱缩呈圆形或卵圆,深染,染色质边集。③40mg/L的T42肽单独作用24h或者48h均可明显抑制人脐静脉内皮细胞、人SGC-7901胃癌细胞的迁移(P<0.05),与40mg/L的T19肽 T21肽半量联合组比较对两种细胞的迁移能力没有显著影响(P>0.05)。结论:T42肽能抑制人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞的生长及迁移,其抗肿瘤细胞作用强于T21肽,抑制内皮细胞增殖作用强于T19肽,抑制细胞增殖活性与T19肽 T21肽半量联合用药基本相同。     

严重烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器的能量代谢紊乱

目的:观察延迟复苏大鼠远隔脏器的能量代谢情况。方法:实验于2001-05/2004-08在长海医院烧伤中心实验室完成。取24只SD大鼠随机分为假烫组、烧伤组、早期复苏组、延迟复苏组4组,每组6只。①除假烫组外,其他3组大鼠用恒温水烫仪100℃水烫12s,制成体表面积30%Ⅲ度烧伤模型(病理证实),假烫组于37℃水中假烫12s。②伤后假烫组和烧伤组不液体复苏,早期复苏组在伤后30,90min分别用30mL/kg乳酸林格氏液腹腔注射液体复苏;延迟复苏组大鼠在伤后6,7h分别用40mL/kg乳酸林格氏液腹腔注射液体复苏。③所有大鼠伤后9h取材,测定肺、心、肝、肾组织Na -K -ATP酶活性,Ca2 -Mg2 -ATP酶活性,髓过氧化物酶活性,一氧化氮代谢产物量。结果:24只大鼠进入结果分析。①烧伤后9h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织的Na -K -ATP酶活性分别为(0.16±0.03),(2.82±0.41),(1.96±0.29),(3.94±0.40)μkat/g,明显低于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.05或0.01)。②烧伤后9h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织的Ca2 -Mg2 -ATP酶活性分别为(0.40±0.08),(3.71±0.70),(2.44±0.56),(2.39±0.57)μkat/g,也明显低于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.05或0.01)。③烧伤后9h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织的髓过氧化物酶活性分别为(9.91±1.13),(0.80±0.09),(0.75±0.08),(0.76±0.09)μkat/g,明显高于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.05或0.01)。④烧伤后9h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织中一氧化氮代谢产物量明显少于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.01)。结论:烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器存在能量代谢紊乱,中性粒细胞积聚和一氧化氮产生减少可能是其重要机制。     

骨髓间充质干细胞在医学领域中的研究与应用

目的:骨髓间充质干细胞主要存在于全身结缔组织和器官间质中,自我更新和增殖能力强,在适宜的微环境里具有多向分化潜能。文章就骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在医学领域应用的最新进展做一综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED2000-01/2006-12期间的相关文章,检索词为“mesenchymal stem cell”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库2000-01/2006-12期间的相关文章,检索词为“骨髓间充质干细胞”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与骨髓间充质干细胞的发展现状及其临床应用相关。排除标准:重复研究或较陈旧的文献。资料提炼:共收集到160篇相关文献,68文献符合纳入标准,排除的92篇文献为内容陈旧或重复。选取符合纳入标准的30篇文献进行分析,分别涉及骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定、在医学领域中的应用、当前存在的问题及展望。资料综合:骨髓间充质干细胞是一类具有分裂增殖和多向分化潜能的干细胞,在适宜的诱导条件下可定向分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、腱细胞、肌肉细胞和神经细胞等,且已在退行性及缺损性疾病、心血管疾病、肝移植、肺纤维化等疾病治疗方面取得良好效果。目前骨髓间充质干细胞在体内的细胞生物学和分子生物学作用机制仍不清楚,如何限定体内外诱导条件使其向所需细胞或组织定向分化以及移植时机、是否具有致瘤性等问题尚需深入研究。结论:骨髓间充质干细胞具有易获得、易培养、低免疫原性、易于外源基因的转入和表达等特性,已成为具有细胞治疗和基因治疗临床疾病潜在实用价值的有效载体。     

哮喘动物模型免疫炎症反应发生验证的要点

目的:了解哮喘免疫炎症反应发生和验证要点,为确保实验的成功打下基础。方法:就哮喘模型制备的动物选择,模型制备的时间,模型制备的方法以及如何评定动物哮喘模型成功作经验性的总结及对国内外对哮喘模型比较经典的认同的方法加以阐述。结果:①选用豚鼠制备哮喘模型,可以很好的观察哮喘发作症状,接受致敏物质后反应程度与其他动物相比较强,能产生I型变态反应。②哮喘模型的制备时间应避开冬天,春夏时节最为合适,制备的哮喘模型炎症反应明显。③1%卵蛋白雾化吸入激发哮喘比较科学。④通过哮喘症状,动物肺功能仪测定肺功能,苏木精伊红病理染色,酶联免疫吸附测定血清IgE水平4种方法做哮喘免疫炎症反应的定性分析。结论:根据不同的研究目的选用相应的动物、恰当的致敏时间,制定稳妥的方法和良好检验手段是确保实验成功的关键。     

患者对知情同意权的认知、态度及知情同意权实施现状的调查

目的:了解住院患者对知情同意权的认知、态度及患者知情同意权的实施现状、实施中患者的心理感受。方法:于2006-03/07在石河子大学医学院第一附属医院采用问卷调查的形式对临床内科、外科六大科室新入院患者进行知情同意权的认知、态度调查(简称问卷1)以及知情同意后的实施现状调查(简称问卷2),并将两份问卷的相关内容进行比较。结果:问卷1收回有效问卷250份,问卷2收回有效问卷225份,故实际有效问卷225份,有效率90%。①问卷1调查结果显示,只有22.2%的患者明确认识到自己享有知情同意权,82.7%的患者希望了解自己的疾病情况,如果病情严重,有65.8%患者认为可直接告知自己,而且大部分患者希望由医务人员口头告知,希望非常详细了解疾病信息者有41.3%。②问卷2调查结果显示,在本人参与签署知情同意表格的114人中,仅有34.2%的患者记得表格的相关内容,16.7%的患者在签署之前仔细阅读了表格内容;有84.4%的患者获得了疾病信息,主要通过医务人员口头方式告知,能够较详细地了解疾病信息者占16.8%。③两份问卷相关内容的比较结果显示,在是否知道病情与首先由谁来知道的问题上,患者的态度与实际实施状况是一致的,没有统计学差异(P>0.05),而在家属是否知情、患者如何得知病情、以什么方式知道、知道哪些疾病信息等问题上患者的态度与实际实施状况不一致,差异有显著性(P<0.05)。结论:从患者对知情的期望水平来讲,并不是所有的患者都期望或有能力了解非常详细的疾病信息,应根据患者及家属的需求来提供相应的疾病信息;从知情同意的实施现状来看,其实施现状并不理想,与患者的期望还有一定的差距,仍需医院及医务人员继续努力。