诱发型一氧化氮合酶在人类鼻黏膜上皮细胞中的表达

目的　探讨人类鼻黏膜上皮细胞应答炎性刺激因子白细胞介素 1 β(interleukin 1 β ,IL 1 β)和肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor α ,TNF α) ,合成诱发型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase ,iNOS)的能力及其机制 ,以及类固醇药物对上皮细胞的影响。方法　将人类鼻黏膜上皮细胞(包括鼻息肉上皮细胞 ,下鼻甲上皮细胞 )进行无血清原代细胞培养 ,分别加入各种不同浓度的炎性刺激因子 (IL 1 β和TNF α)以及地塞米松 ,采用原位杂交的方法检测不同条件下iNOSmRNA的水平。结果　①不论用IL 1 β或是TNF α刺激 ,iNOSmRNA水平均随浓度的增加 ,时间的延长而增加 ,尤以鼻息肉上皮细胞明显。但当浓度到一定水平后 ,iNOSmRNA水平不再继续升高 ;②用IL 1 β +TNF α共同刺激 ,iNOSmRNA水平要高于单纯用其中的一种 (P <0 .0 1 ) ,同样鼻息肉上皮细胞iNOSmRNA水平要高于下鼻甲上皮细胞 ;③加入地塞米松后 ,被炎性因子诱发的iNOSmRNA升高的水平下降。当地塞米松浓度为 4 0ng/ml以上时 ,iNOSmRNA水平不再继续下降。 结论　①IL 1 β和TNF α上调人类鼻黏膜上皮细胞合成的iNOSmRNA水平 ,鼻息肉上皮细胞更为活跃。它的机制可能是通过核因子 κB途径 ;②地塞米松降低这种上调作用 ,它的机制可能是通过阻断核     

听觉器官线粒体DNA缺失在老年聋发病中的意义

目的 探讨听觉器官中线粒体DNA缺失在老年聋发病中的意义。方法:饲养不同年龄组的大鼠,测试ABR阈值,PCR检测其耳蜗、蜗核、大脑、颞肌和外周血中是否存在mtDNA~(4834)缺失,对存在的缺失进行定量分析;PCR产物进行克隆、测序。结果:老年组大鼠的ABR平均阈值为92.22±10.60dBSPL(n=20),中年组为42.75±5.73dBSPL(n=24),青年组为30.50±1.54dBSPL(n:24),老年组大鼠的ABR阈值明显高于中年组和青年组,其差别具有非常显著性的意义(方差分析,P<0.01);(2)所有老年大鼠的听觉器官和颞肌中均存在mtD-NA~(4834)缺失,其缺失发生率高于中年组,青年组mtDNA~(4834)缺失发生率最低;(3)定量分析显示不同年龄大鼠听觉器官中mtDNA~(4834)缺失占总mtDNA的百分比不同,老年组mtDNA~(4834)缺失占总mtDNA的百分比高于中年组。结论:老年大鼠的ABR阈值明显升高,其包括耳蜗、蜗核在内的多种组织中普遍存在的mtDNA~(4834)缺失,提示mtDNA缺失在老化和老年聋的发生中具有重要意义。     

胎儿心律失常的临床意义及预后的研究

目的 总结胎儿心律失常原因，进一步探讨其临床意义及对胎儿预后的影响。方法 采用回顾性分析方法，对26例胎儿心律失常孕妇的情况、胎儿心律失常的临床表现、诊断方法及长期随诊结果进行总结。结果 胎儿心律失常的发生率为0．2％。26例胎儿心律失常中，3例为胎儿心动过速(11．5％)，4例为胎儿心动过缓(15．4％)，19例为不规则胎儿心律(73．1％)；胎儿心律失常平均诊断孕周为35托周(15～41^ 1周)。26例中22例为产前胎心听诊时发现胎儿心律失常；1例为妊娠15周超声检查时发现胎儿心律失常；3例胎心监测发现胎儿心律失常。17例产前进行了胎儿超声心动检查，心脏结构未见异常，其中6例胎儿超声心动检查提示胎儿房性早搏，占35．3％，余未见异常。产后新生儿均存活，随诊24例(92．3％)，16例新生儿进行了超声心动检查，其中2例诊断为先天性心脏病，均为房间膈缺损。先天性心脏病新生儿在心律失常胎儿中发生率为7．7％。结论 大多数心律失常的胎儿预后是好的，心脏畸形的发生率很低。对于持续性心率慢的胎儿，需注意心脏结构异常的存在；对于心律失常胎儿的处理采用期待疗法，根据产科指征决定终止妊娠的方式。     

汉族女性峰值骨密度和维生素D受体基因多态性及环境因素的相关性研究

目的　研究汉族女性峰值骨密度 (peakbonemineraldensity ,PBMD)与某些环境及遗传因素的关系。方法　选择健康的志愿者 1 5 9人 ,①通过饮食回顾法计算每日钙及蛋白入量 ;②通过 7d运动评估法计算运动强度 ;③使用DEXA骨密度仪 (HologicQDR 4 5 0 0 )测量志愿者腰椎和髋部骨密度 (BMD) ;④应用PCR -限制性片段长度多态性对维生素D受体 (VDR)基因进行多态性分析。结果　①腰椎BMD结果参照日本人标准 ,低骨量或骨质疏松共有 35人 (2 2 % ) ,正常骨量者为 1 2 4人 (78% )。两组间体重及体重指数 (BMI)间有显著差异 ;②腰椎及髋部股骨颈BMD与体重呈正相关 ,髋部其余位点BMD值和BMI呈正相关 ;③VDR基因BsmI酶切多态性组间BMD无显著性差异。结论　本研究显示 :体重及或BMI是汉族女性PBMD重要保护因素之一。汉族女性PBMD和当前营养状态、运动强度、VDRBsmI酶切位点基因多态性未见有相关性     

产后出血的高危因素分析

目的　分析产后出血发生的相关危险因素 ,探讨预防和减少产后出血的措施。方法　对我院1 990年 1月～ 2 0 0 2年 1 2月间住院分娩的产妇出现产后出血的产妇 31 9例 ,对照 6 38例。通过多元Logistic回归分析评价各危险因素的相对危险性。结果　产后出血的发病率为 2 0 9%。相对独立的多个危险因素作用大小的顺位为 :胎盘粘连或植入、前置胎盘、多胎妊娠及胎儿体重≥ 4 0 0 0g、重度妊高征、流产次数≥ 2次、胎盘早剥 ;在阴道分娩的产妇中 ,作用相对独立的危险因素的顺位为胎盘粘连或植入、胎儿体重≥ 4 0 0 0g、妊高征、第三产程 >1 0min、流产次数≥ 2次。结论　避免产前非意愿妊娠以减少前置胎盘、胎盘粘连或植入 ;减少巨大儿、多胎的发生 ,有助于预防和减少产后出血     

层粘连蛋白、基质金属蛋白酶-9在卵巢粘液性肿瘤中的表达及其意义

目的 :探讨层粘连蛋白 (LN)、基质金属蛋白酶 9(MMP 9)在卵巢粘液性肿瘤中的表达以及与临床病理因素和预后的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测 43例卵巢粘液性肿瘤LN、MMP 9的表达情况。结果 :LN、MMP 9的表达 ,在卵巢粘液性肿瘤从良性、交界性到恶性发展中 ,LN的表达级别和MMP 9的表达阳性率逐渐增高 ;LN的表达程度与卵巢粘液性囊腺癌的组织学分级有关 (P =0 0 0 0 ) ;MMP 9的表达与卵巢粘液性囊腺癌的组织学分级 (P =0 0 48)、FIGO分期 (P =0 0 47)、术后复发和死亡 (P =0 0 30 )有关。在卵巢粘液性囊腺癌中 ,LN的表达程度在MMP 9阳性组与MMP 9阴性组之间差异有显著性 (P =0 0 0 8) ,并呈正相关。结论 :LN、MMP 9在卵巢粘液性肿瘤的浸润转移中起重要作用 ,是卵巢粘液性肿瘤的恶性指标之一 ,可望作为交界性粘液性囊腺瘤及粘液性囊腺癌的诊断和分级的客观指标 ;MMP 9可协助临床估计预后。     

西拉普利对体外培养系膜细胞和糖尿病大鼠肾皮质胰岛素样生长因子-1表达的影响

目的　探讨血管紧张素转换酶抑制剂西拉普利对体外培养肾小球系膜细胞和糖尿病大鼠肾皮质胰岛素样生长因子 1(IGF 1)表达的影响。方法　于低糖 (5 6mM )和高糖 (30mM)环境中培养人胎肾小球系膜细胞 ,分别加入西拉普利 (10 μM) ,观察其对IGF 1mRNA表达 (RT PCR法 )及纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原分泌 (酶免法和放免法 )的影响。将糖尿病SD大鼠随机分为糖尿病对照组和西拉普利 (1 0mg·kg 1 ·d 1 灌胃 )组 ,分别于第 4和第 8周末检测其肾皮质IGF 1mRNA表达、基质蛋白沉积和尿白蛋白 /肌酐比值等指标。结果　高糖环境下系膜细胞IGF 1mR NA表达增高 ,上清液中基质蛋白含量也显著升高。加入西拉普利后IGF 1mRNA表达量明显降低 ,且基质蛋白含量也显著下降。糖尿病对照组大鼠肾皮质IGF 1mRNA表达明显高于正常对照组 ,西拉普利组IGF 1mRNA表达、尿白蛋白 /肌酐比值和基质蛋白沉积则显著低于糖尿病对照组。结论　西拉普利可抑制高糖环境下IGF 1在系膜细胞和肾皮质的过度表达 ,减少糖尿病大鼠基质蛋白在肾皮质的沉积 ,降低尿白蛋白排泄率 ,提示早期应用血管紧张转换酶抑制剂抑制IGF 1过度表达有益于对糖尿病肾病的防治     

c-myc、bcl-2基因表达和蝌蚪提取液抗早幼粒细胞白血病作用的研究

目的 研究蝌蚪提取液(T871)抗早幼粒细胞白血病(APL)的作用及其过程中c-myc、bcl-2癌基因表达的变化。方法 利用细胞生长曲线、形态学观察、流式细胞仪、TUNEL法及原位mRNA杂交和完整细胞原位斑点印迹技术，观察T871抗人APL细胞系(HL-60)细胞的作用及其过程中c-myc、bcl-2癌基因表达的变化。结果 T871能抑制HL-60细胞增殖，并出现细胞凋亡的形态学特征，流式细胞仪及TUNEL法检测结果显示凋亡细胞百分数比对照组显增加，并伴有癌基因c-myc、bel-2mRNA表达的下调。结论 T871可抑制HL-60细胞的增殖同时诱导其凋亡，且c-myc、bcl-2癌基因可能参与了此过程。     

异丙酚对神经元缺氧损伤的保护及其作用机制

目的　研究异丙酚对离体大鼠海马神经元缺氧损伤的保护作用及其机制。方法　以原代培养的大鼠海马神经元作为研究对象 ,建立缺氧、H2 O2 和谷氨酸损伤模型 ,用MTT法测定神经元存活率。采用激光扫描共聚焦显微镜动态监测缺氧前后 ,单个海马神经元内Ca2 + 浓度和线粒体膜电位 (△Ψm)的变化。用电子自旋共振技术测定异丙酚对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用。结果　 6～ 4 8mg·L-1浓度的异丙酚可明显降低神经元缺氧损伤时的细胞死亡率 (P <0 0 1) ,作用程度均呈剂量相关 (r =0 89,P <0 0 5 ) ;2 4～ 4 8mg·L-1浓度的异丙酚可明显降低H2 O2 损伤时的细胞死亡率 (P <0 0 1) ;12～ 4 8mg·L-1浓度的异丙酚可明显降低谷氨酸损伤时的细胞死亡率 (P <0 0 1)。 3～ 4 8mg·L-1异丙酚对缺氧诱发的细胞内钙离子超载有抑制作用(P <0 0 5 ) ;12、4 8mg·L-1异丙酚能减缓缺氧引起的△Ψm降低 (P <0 0 1)。 12、4 8mg·L-1异丙酚对羟基自由基的清除率分别为 17 1%和 2 1 1% ,但对超氧阴离子自由基无清除作用。结论　异丙酚对离体培养的大鼠海马神经元缺氧性损伤具有保护作用 ,其作用机制部分与异丙酚抑制缺氧引起的 [Ca2 + ]i 异常升高、抑制线粒体膜电位的下降和清除羟基自由基有关     

血管紧张素Ⅱ和氯沙坦对大鼠小动脉平滑肌细胞的基质金属蛋白酶2和9表达的影响

目的　为研究血管紧张素Ⅱ导致血管重构的机制是否与其影响平滑肌细胞的基质金属蛋白酶 2和 9的表达及活性有关。方法　应用RT PCR、Westernblot、明胶酶谱分析等方法观察不同浓度的血管紧张素Ⅱ对体外培养的大鼠肠系膜小动脉平滑肌细胞的金属蛋白酶 2和 9的表达及活性的影响。结果　高浓度的血管紧张素Ⅱ作用VSMC 48h时 ,可以诱导金属蛋白酶 2和 9的表达及活性增加。不同浓度影响程度不同 ,1× 10 - 8mol·L- 1和 1× 10 - 7mol·L- 1的血管紧张素Ⅱ影响最强。 1× 10 - 6 mol·L- 1氯沙坦可以部分阻断血管紧张素Ⅱ对金属蛋白酶 2和 9的诱导作用。结论　血管紧张素Ⅱ可以诱导小动脉VSMC的金属蛋白酶 2和 9的表达及活性增加 ;AT1受体参与介导此过程