海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性试验研究

为了考察海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性特征,我们利用MTT比色法和小鼠尾静脉注射法,分别考察了该微胶囊的细胞毒性和急性全身毒性。结果表明：微胶囊浓度≤1.0mg/mL时,材料对L929细胞生长无明显抑制作用;微胶囊浸提液即使在高浸提比（10.0mg/mL）下,浸提产物也无细胞毒性作用。急性全身毒性试验结果显示：微胶囊浸提液不引起急性全身毒性反应,表明微胶囊浸提液无有毒的沥滤物和降解产物产生。说明海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊无明显毒性。     

CD3ζ链基因在脐带血T细胞及其CD4+和CD8+T细胞亚群中的表达特点

目的 了解脐带血T细胞及其CD4 和CD8 T细胞亚群的信号传导分子CD3ζ基因的表达特点.方法 采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测60例脐带血单个核细胞和12例纯化脐带血CD4 及CD8 T细胞的CD3ζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3ζ基因相对mRNA表达量,60例健康成人作为对照.并根据荧光定量PCR熔解曲线特点和序列分析了解CD3ζ基因突变情况.结果 全部脐带血和健康成人外周血单个核细胞均表达CD3ζ基因,不同个体CD3ζ基因表达量有所差异,脐带血T细胞CD3ζ基因相对mRNA表达量为6.7%±5.56%,CD4 和CD8 T细胞的CD3ζ基因相对mRNA表达量分别为6.74%±2.0%和6.88%±1.76%,三者CD3ζ基因表达量均明显高于健康成人(P=0.000,P=0.034,P=0.000).序列分析结果显示尚未发现国外文献所报道的ζ链剪接异构体.结论 本研究率先报道了脐带血T细胞及其CD4 和CD8 T细胞亚群的CD3ζ基因mRNA的表达水平,为进一步了解脐带血T细胞免疫学特点提供新的基础资料.     

X(γ)刀输出吸收剂量的测量与验证

目的：目前，国内X（γ）刀的国家检定规程正在起草之中，本文的目的是为X（γ）刀剂量测量提供合理的设备与吸收剂量计算方法。材料与方法：利用德国PTW-UNIDOS剂量仅与有效体积为0．015cc的针尖电离室及自制的小体积半导体探测器相匹配，在160mm直径的有机玻璃球形模体内测量X（γ）刀的输出吸收剂量，并验证其治疗计划的实际输出剂量，得到较满意的结果。结论：为了保证剂量的准确度，X（γ）刀治疗计划系统的实际输出剂量应定期在现场测量与验证，所用探测器的直径应小于射野直径的1／2，小灵敏体积的半导体探测器适宜X（γ）刀小野(如：Ф4mm)的测量。     

基于椭圆方程的三维心脏超声图像的位移场估计

三维超声心动图技术能使医生直观地看到心脏整体和各部分的运动，在临床得到重视。在三维超声心动图技术中，如何定量的描述心脏中某个组织的运动状况极具临床意义。本研究提出了一种基于椭圆偏微分方程的二尖瓣三维运动估计方法。该方法直接在三维超声图像的位移场上进行了运动估计，避免了传统运动估计方法，如光流法，需要标定的缺点。本研究首先建立一个二次误差指标函数，然后利用变分法导出了三维空间下的一组椭圆型偏微分方程。这类方程有着比较成熟的数值解法，利用了有限差分法，对多个三维超声数据立方体进行了计算，结果证明这类方法是有效的。     

Comparison of the unlabeled and labeled pre-mRNA splicing assays in vitro

Pre-mRNA splicing is a fundamental process required for the expression of most metazoan genes. It is carried out by the spliceosome that catalyzes the removal of non-coding intron sequences to ligate exons into mature mRNA prior to transport and translation. The purpose of our study is to explore whether the in vitro unlabeled pre-mRNA splicing assay could be performed as an alternative method of splicing reaction other than the radiolabeled one. Two different splicing methods in vitro , P labeled and unlabeled pre-mRNA as the substrates in the reaction, were investigated. The radiolabeled products were visualized by autoradiography while the unlabeled products were observed by Ethidium Bromide (EB) staining. As a result, although there are more unspecific bands in the EB staining assay than 32P labeled one, the RNA products of in vitro splicing could be observed clearly. This suggests that the unlabeled pre-mRNA splicing assay can be an optional substitution for the isotope-labeled assay.     

大鼠重组IgE Fc区CH2-3的原核表达及活性研究

目的 研究大鼠IgE的Fc区CH2-3的生物学活性。方法 构建大鼠IgE的Fc区CH2-3的原核表达质粒pBAD／gⅢA／Ch2-3，并转化入TOP10中，阿拉伯糖诱导表达、周质腔抽提、Ni-NTA金属鳌合柱纯化获得大鼠IgE的Fc区CH2-3，细胞及动物水平检测蛋白质生物学活性。结果 原核系统表达出大鼠IgE的Fc区CH2-3，它能够阻断OVA激发的RBL-2H3的脱颗粒反应，阻断被动皮肤实验。结论 大鼠IgE的Fc区CH2-3能够封闭IgE高亲和力受体，阻断过敏反应。     

SARS病毒S1蛋白重组C端片段免疫效果的实验研究

为获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白C端 ,研究其刺激机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制 ,将编码SARS病毒S1蛋白C端 311个氨基酸残基的基因克隆 ,并在原核表达系统中表达 ,纯化获得了的重组蛋白。利用SARS患者恢复期的血清 ,对纯化的重组S1蛋白进行血清学分析。结果表明 ,本研究中克隆表达的重组蛋白序列与公布的SARS病毒S1蛋白C端的序列相同 ,其编码的重组蛋白相对分子质量约为 5 90 0 0Mr。SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应 ,在5 9 0 0 0Mr处形成特异性的反应条带 ,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应。在本研究中获得的重组蛋白可以为研究SARS病毒识别宿主细胞受体的过程及其机制提供条件。     

彩色多普勒超声对肠套叠的诊断价值与治疗体会

肠套叠是外科常见急腹症之一，临床以小儿为多见，若不能及时诊治，可并发肠坏死和中毒性休克，甚至危及生命。我科自1998年至2007年12月，采用彩色多普勒超声对124例（共132人次）进行诊治，收到满意疗效，现将其诊断价值和治疗体会报告如下。     

体外培养大鼠脊髓运动神经元的存活率及形态观察

观察体外培养的大鼠脊髓运动神经元(SMN)的存活率、形态学特征及生长规律。对今后进一步研究脊髓损伤、运动神经元病有一定的指导意义。1材料与方法1·1实验动物:胚胎16 d的SD大鼠。1·2主要试剂:15%有血清L-15培养基、无血清L-15培养基、poly-L-lysine、层黏连蛋白(lam in in)、m etrizam ide、阿糖胞苷、DAB等(S igm a公司),小牛血清白蛋白、小牛血清(华美生物工程公司),胆碱乙酰转移酶多克隆抗体(ChAT)(武汉博士德公司)。1·3实验仪器:离心机、超净台、CO2恒温培养箱、24孔培养板、倒置显微镜(OLYMPUS)、图像分析系统(OLYMPU…     

TLR2和TLR4在原发性肝癌中的表达

目的：本研究通过检测原发性肝癌Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达，分析其与临床病理生理因素的关系，探讨TLR2，TLR4在原发性肝癌疾病过程中的可能作用。方法：采用免疫组化法和实时荧光定量PCR分别在蛋白水平及mRNA水平检测原发性肝癌组织和配对癌旁组织TLR2、TLR4的表达。结果：原发性肝癌组织在蛋白水平和mRNA水平TLR2和TLR4的表达均明显低于癌旁组织（P<0.01）。但免疫组化结果显示不论是肝癌组织还是癌旁组织，TLR2和TLR4的表达均明显高于正常肝组织（P<0.01，P<0.05），有门静脉分支癌栓的患者癌组织TLR4的表达强度低于无门静脉分支癌栓的患者（P<0.05）。结论：肝癌组织TLR2和TLR4的表达与癌旁组织相比受到相对抑制，但高于正常肝组织，TLR2和TLR4信号途径可能参与了原发性肝癌的病理过程。