成肌细胞在基因治疗和组织工程中的应用综述

目的探讨骨骼肌成肌细胞的生物学特性及其在基因治疗、组织工程方面的应用前景。方法回顾成肌细胞的有关研究成果,广泛查阅近期有关成肌细胞在细胞移植及其与材料复合方面的文献,综述有关内容。结果目前成肌细胞体外培养已是一个成熟的方法,其体内与体外的生物学特性已研究得较清楚。由于它能融合到宿主的肌纤维内,将目的基因介导到宿主体内,能稳定表达对应的基因产物,因此在基因治疗方面有良好的应用前景。现已在遗传性肌营养不良症及一些遗传性血液病方面有广泛研究。它与胶原等生物材料有良好的生物相容性,体外能在胶原的诱导下良好地分化,也有将其用于血管、心肌及骨骼肌组织工程方面的研究。结论成肌细胞以其特有的生物学特性将会广泛用于基因治疗及组织工程中。     

康宁克通或干扰素局部注射对瘢痕PDGF BB基因表达影响

目的明确康宁克通和干扰素α２ｂ对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制是否通过ＰＤＧＦ途径。方法对６例增生性瘢痕同一个体分区域同时局部注射康宁克通或干扰素α２ｂ后３天及７天的ＰＤＧＦＢＢｍＲＮＡ原位表达进行了观察。结果①康宁克通或干扰素α２ｂ在局部注射后７天增生性瘢痕的ＰＤＧＦＢＢｍＲＮＡ表达强度比未注射区均明显减少（Ｐ＜０．０１）,但局部注射后３天表达强度与未注射区相比均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。②增生性瘢痕的ＰＤＧＦＢＢｍＲＮＡ原位表达强度高于正常皮肤。结论激素及干扰素α２ｂ治疗瘢痕的机制之一是通过抑制ＰＤＧＦ基因表达,从而减少成纤维细胞的有丝分裂,使瘢痕的成纤细胞增殖受到抑制。     

背驮式原位肝移植术四例报告

目的 为了提高终末期肝病的存活率。方法 于１９９６年５月、８月、１９９７的上月和１９９８年２月先后成功地施行了４例背驮式原位肝移植术。结果 除例１忆 炎后肝硬变,受体术后２１４天突变死于乙肝复发并急生肝坏死和急性胰腺炎外。例２、例３和例４肝豆状核变性受体术后恢复顺利,效果良好,已分别健康生存５７５天、３９０天和１６２天。结论 肝移植是目前治疗大部分终末期肝移植的最有效手段。     

表达白细胞介素10的系膜细胞基因转移载体的建立

目的为特异性地将病毒性白细胞介素１０（ｖＩＬ１０）基因转移到肾脏提供一种手段。方法应用逆转录病毒载体介导的基因转移技术将外源性基因ｖＩＬ１０转移到大鼠肾脏系膜细胞,应用ＲＴＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ方法检测其表达,并通过对混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）的影响对其活性进行分析。结果ｖＩＬ１０在转染的系膜细胞表达２００００ｐｇ·（１０６细胞）－１／２４ｈ,应用３ＨＴｄＲ掺入法检测ｖＩＬ１０对ＭＬＲ的影响,实验组明显低于对照组（Ｐ＜００５）。结论外源性基因在系膜细胞有效地转录和表达,并对ＭＬＲ有抑制作用。     

小儿IgA肾病与肾小球基底膜变薄

目的为了深入研究ＩｇＡ肾病的临床与病理改变的关系。方法根据肾小球基底膜（ＧＢＭ）变薄的范围,将４８例小儿原发性ＩｇＡ肾病分为三组,对其临床、病理及其超微结构进行了系统观察,对ＧＢＭ厚度进行了测量。结果小儿ＩｇＡ肾病有显著的超微结构特点。弥漫性ＧＢＭ变薄组（ＤＴＢＭ）占１４６％,ＧＢＭ厚度（１２９２１±２９２１）ｎｍ。局灶节段变薄组（ＦＴＢＭ）占３３３％,ＧＢＭ厚度（１７９１０±４９８０）ｎｍ。非薄ＧＢＭ组（ＮＴＧＢＭ）占５２１％,ＧＢＭ厚度（３５６６１±９６７３）ｎｍ,分别与前两组相比,均有显著性差异（Ｐ均＜００１,ｔ＝６７３）。结论ＩｇＡ肾病可有不同程度的ＧＢＭ变薄,其厚度在２３０ｎｍ以下,范围在５０％以上,可定义为ＤＴＢＭ型;范围在２０％～５０％之间,可定义为ＦＴＢＭ型。血尿可能与ＧＢＭ变薄有关,但不影响预后;蛋白尿与ＧＢＭ变薄无关,而与ＧＢＭ病损破坏及节段足突融合有关,可能为影响预后的重要因素。     

转基因方法建立多药耐药细胞系

目的建立多药耐药细胞系。方法将带有ｍｄｒ１ｃＤＮＡ全序列的逆转录病毒载体ｐＨａＭＤＲ通过脂质体直接导入到敏感的人膀胱癌细胞系ＢＩＵ８７细胞中。结果经６０～１００ｎｇ／ｍｌ秋水仙素筛选２１天后,克隆出高强度ＭＤＲ表型的耐药细胞系,基因组ＤＮＡＰＣＲ扩增表明ｍｄｒ１ｃＤＮＡ已掺入到ＢＩＵ８７细胞基因组中。结论应用转基因方法可建立多药耐药细胞系,该细胞系具有耐药强度高,耐药性稳定等特点。     

白柠檬果皮油的挥发性成分

∶以溶剂萃取法从白柠檬果皮提取精油,并用硅胶柱将精油分成碳氢化合物和含氧化合物两大部分． 利用气相色谱和质谱联用系统测定了白柠檬果皮油的香气成分,并依据各成分的保留指数,鉴定出７５种挥发性成分． 其中有２３种碳氢化合物、１２种醇类物质、１７种醛类物质、１１种酯类物质、２种酚类物质、２种醚类物质和８种酮类物质．     

大鼠同种异体左肺原位移植模型的建立

改进袖套式血管吻合技术,建立大鼠同种异体左肺原位移植模型。方法将动物分Ａ、Ｂ两组。Ａ组（６只）以ＳＤ大鼠为供、受体,于移植肺获再灌注４小时,阻断右侧肺门,于阻断前及阻断３０分钟后采动脉血作血气分析,选择性检测移植肺气体交换功能。Ｂ组（６只）以ＳＤ大鼠为受体、Ｗｉｓ－ｔａｒ大鼠为供体,于术后半个月对受体进行胸片、肺动脉造影及病理检查。结果肺门阻断前后动脉血氧分压（ＰａＯ２）、二氧化碳分压（ＰａＣＯ２）差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。半月后移植肺见片状浸润阴影,无血、气胸,血管及支气管吻合处通畅,光镜下移植肺呈２～３级排斥反应改变。结论此模型对于研究供肺保存及肺移植排斥反应简便易行、经济实用,有较好的应用前景。     

胆道梗阻后肝脏自由基损伤及粉防己碱保护作用的实验研究

目的　观察胆道梗阻后肝脏的自由基损伤和粉防己碱（ Ｔｅｔ） 的保护作用。方法　复制大鼠胆道梗阻模型,每日给予 Ｔｅｔ ３０ ｍｇ／ｋｇ 体重灌胃,动态观测肝组织丙二醛（ Ｍ Ｄ Ａ） 和超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 含量及血清 Ｔ Ｂｉｌ、 Ａ Ｌ Ｔ、 Ａ Ｌ Ｐ、 Ｇ Ｇ Ｔ 含量。结果　胆道梗阻后,血清 Ｔ Ｂｉｌ、 Ａ Ｌ Ｔ、 Ａ Ｌ Ｐ、 Ｇ Ｇ Ｔ 水平逐渐升高,肝组织 Ｍ Ｄ Ａ 含量逐渐升高, Ｓ Ｏ Ｄ 逐渐减少,各梗阻组与对照组比较, Ｐ＜ ０ ．０５ 。各 Ｔｅｔ 治疗组与同时相梗阻组比较,血清 Ｔ Ｂｉｌ、 Ａ Ｌ Ｔ、 Ａ Ｌ Ｐ、 Ｇ Ｇ Ｔ 水平下降（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;肝组织 Ｍ Ｄ Ａ 含量减少（ Ｐ＜０ ．０１） , Ｓ Ｏ Ｄ 含量升高（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。肝组织 Ｍ Ｄ Ａ 含量与血清 Ａ Ｌ Ｔ、 Ａ Ｌ Ｐ 含量变化呈明显正相关,ｒ 值分别为０ ．９４９ 和０ ．８４３（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。结论　自由基损伤可能是胆道梗阻导致肝损害的重要机制之一, Ｔｅｔ对胆道梗阻所致肝损害有明显保护作用。     

全反式维甲酸诱导人膀胱癌细胞T24凋亡的研究

目的　探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ） 诱导人膀胱癌细胞Ｔ２４ 凋亡的可能性。方法　应用细胞和分子生物学技术检测不同浓度ＡＴＲＡ 对Ｔ２４ 细胞生长和凋亡的影响。结果　３ ×１０－５ ～３ ×１０－ ７ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ可显著抑制Ｔ２４ 细胞增殖。用３×１０－５ ｍｏｌ／Ｌ和３×１０－ ６ ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ 作用细胞６ 天,可出现典型凋亡特征;３ ×１０－５ 、３×１０－ ６ ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ 组及对照组的细胞凋亡率分别为２０ ．１６ ％ 、１５ ．３１％和１ ．４９ ％ ;ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡特征性的ＤＮＡ 梯形带。结论　ＡＴＲＡ对人膀胱癌细胞Ｔ２４ 有剂量生长抑制作用,且可成功地诱导人膀胱癌细胞Ｔ２４ 发生凋亡。