自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血性疾病中细胞因子的作用

目的:评估自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢动脉缺血性疾病中几种细胞因子的作用。方法:实验于2006-09/12在河北医科大学唐山临床学院中心实验室完成。实验材料:日本大耳白兔40只,清洁级,5月龄,体质量2.5～3.0kg,由华北煤炭医学院动物中心提供(合格证为SCXK-2005-0002),采用完全随机设计方法将日本大耳白兔分为4组:对照组、缺血组、磷酸盐缓冲液组、骨髓单个核细胞治疗组,10只/组。实验方法:对照组不作任何干预措施,其他3组建立日本大耳白兔右下肢缺血模型。取右下肢缺血模型制备2周后的兔,分离获取骨髓单个核细胞。缺血组制备右下肢缺血模型后不作其他干预措施。磷酸盐缓冲液组模型制备2周后,用1mL注射器将0.01mol/L磷酸盐缓冲液分15点注射于右下肢股骨中点股内收肌群内。骨髓单个核细胞治疗组模型制备2周后,用1mL注射器将1×109L-1骨髓单个核细胞悬液分15点注射于右下肢股内收肌群内。实验评估:造模后3d切取内收肌组织标本,测量其组织匀浆中血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、白细胞介素1β的含量;4周后行数字减影血管造影术,术后取右下肢内收肌标本,采用CD34免疫组织化学法检测毛细血管密度,观察下肢血管再生情况。结果:40只日本大耳白兔均进入结果分析。①移植后4周腹主动脉造影检测:骨髓单个核细胞治疗组结扎股动脉处的远端毛细血管生成较明显,血管成网状。缺血组及磷酸盐缓冲液组结扎处远端毛细血管生成不明显。②CD34免疫组织化学方法检测毛细血管密度:对照组平均为16个/×400高倍镜,缺血组和磷酸盐缓冲液组平均为5个/×400高倍镜,治疗组毛平均为20.5个/×400高倍镜。骨髓单个核细胞治疗组肌肉标本毛细血管密度明显高于缺血组和磷酸盐缓冲液组(P<0.05)。③造模后3d检测细胞因子含量:缺血组、磷酸盐缓冲液组、骨髓单个核细胞治疗组的碱性成纤维细胞生长因子含量明显高于对照组[(1.83±0.90),(3.22±2.10),(3.20±1.56),(3.75±1.07)ng/g,P<0.05]。骨髓单个核细胞治疗组白细胞介素1β含量明显高于对照组、缺血组、磷酸盐缓冲液组[(10.87±6.42),(10.74±6.32),(11.80±4.50),(16.73±4.21)ng/g,P<0.05],各组血管内皮生长因子水平差异不明显(P>0.05)。结论:自体骨髓单个核细胞移植治疗缺血性疾病过程中,白细胞介素1β对毛细血管的生成起主要作用。     

三七总皂苷对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其线粒体机制

目的:观察三七总皂苷(血栓通注射液的药物成分)对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,分析其可能的线粒体机制。方法:实验于2006-01/09在广州医学院病理生理学实验室完成。实验分组:取108只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、三七总皂苷组,每组36只。实验干预:①假手术组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾暴露40min后取下。②缺血再灌注模型组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾动脉夹闭缺血45min后再灌注1h。③三七总皂苷组:实验前1h腹腔注射血栓通注射液70mg/kg,其余方法同缺血再灌注模型组。实验评估:①再灌注后1h取肾组织匀浆检测肾组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。②测血浆肌酐、尿素氮、血清降钙素基因相关肽含量。③电镜观察肾组织线粒体超微结构的改变。④检测线粒体细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性,Ca2 含量。结果:108只大鼠均进入结果分析。①三七总皂苷组肾组织超氧化物歧化酶活性高于缺血再灌注模型组;丙二醛含量低于缺血再灌注模型组。②三七总皂苷组血浆肌酐、尿素氮含量低于缺血再灌注模型组;降钙素基因相关肽水平高于缺血再灌注模型组。③电镜观察三七总皂苷组线粒体结构有明显的改善,嵴数目减少不多,且排列较整齐,没有线粒体崩解的情况。④三七总皂苷组肾组织线粒体中细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性高于缺血再灌注模型组;Ca2 含量低于缺血再灌注模型组。结论:三七总皂苷对肾缺血再灌注损伤有明显保护作用,其保护作用机制与直接清除自由基,提高琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶活性、升高血清降钙素基因相关肽水平,降低钙超载,从而减轻线粒体损伤有关。     

雄黄对哮喘豚鼠嗜酸细胞作用的量效和时效性

目的:观察抑喘中药雄黄对哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞的作用,并分析量效及时效性。方法:实验于2005-03/2006-07在广州医学院中心实验室进行。①采用卵白蛋白制备哮喘豚鼠模型并激发哮喘,提取肺泡灌洗液并分离其中的嗜酸细胞。②将嗜酸细胞悬浮生长于含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,嗜酸细胞初始浓度均为2×109L-1。一组雄黄以1.5625mg/L终浓度分别加入细胞培养液中,培养3,6,12,24,48h。以不加雄黄为对照。另一组将雄黄终浓度调整为0.05,0.1,0.19,0.39,0.78,1.56,3.19mg/L,培养6h。以不加雄黄为对照。③Wright's染色、透射电子显微镜观察嗜酸细胞的形态学变化。流式细胞仪检测观察嗜酸细胞凋亡率。免疫组织化学染色观察嗜酸细胞bcl-2基因表达。结果:①嗜酸细胞与雄黄作用6h后,Wright's染色、透射电子显微镜观察到嗜酸细胞核固缩,染色体边集现象,核膜表面凹凸不平,部分嗜酸细胞出现了细胞核碎裂,有少量的凋亡小体形成。②1.5625mg/L雄黄在培养基中分别培养3,6,12,24,48h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着雄黄作用时间的延长而先升高,于24h达最高,凋亡率为26.21%,而后下降,各不同时间组嗜酸细胞凋亡率与对照组相比,差异均有显著性。将嗜酸细胞与不同终浓度雄黄在培养基中分别培养6h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着雄黄浓度的增加而升高,各不同浓度组嗜酸细胞凋亡率与不加雄黄的对照组相比,差异亦均有显著性。③经雄黄处理的嗜酸细胞bcl-2蛋白表达较对照组低。结论:雄黄促进哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡,随着雄黄作用时间的延长和浓度增加这种作用更明显。bcl-2基因参与了嗜酸细胞凋亡的过程。     

Interleukin-11 inhibits adipogenesis and stimulates myelopoiesis in human long-term marrow cultures

Interleukin-11 (IL-11) is a bone marrow (BM) stromal-derived growth factor that has been shown to stimulate murine myeloid and lymphoid cells both in vitro and in vivo and to inhibit adipogenesis in a murine fibroblast cell line. We have studied the effects of IL-11 on highly purified human BM stem and progenitor cells and on human long-term marrow cultures (LTMC). Adipocyte differentiation is an integral component of murine and human LTMC. IL-11 stimulates myeloid growth as a single cytokine when added to highly enriched CD34+, HLA-DR+ bone marrow cells. IL-11 stimulated no growth in the more primitive CD34+, HLA-DR- population even in the presence of additional cytokines. IL-11 addition to human LTMC resulted in the expansion of myeloid and mixed, but not erythroid, progenitor populations. IL-11 dramatically increased the adherent cell populations, including both stromal cells and macrophages. Treated cultures also showed marked inhibition of fat accumulation in the adherent cells due in part to a block in the differentiation of preadipocytes to adipocytes, as shown by RNA analysis using adipocyte-specific markers. These data show that IL-11 stimulates a more differentiated, although multipotential, progenitor cell in human BM and that LTMC provide a useful model for studying the effects of this cytokine in the context of the hematopoietic microenvironment.     

转化生长因子TGF-β研究进展

1978年,DeLarco与Todaro在小鼠肉瘤病毒转化的细胞株条件培养基中鉴定出SGF(sarcoma growth factor),具有转化细胞特性,故又被称为TGF(transformating growthfactor),包括两个成分:α和β,而实际上起细胞转化作用的是前者.两者在分子组成、受体结构和生物学效应上有很大差异,分属不同蛋白家族.     

对罗夏测验中自我知觉记分的效度检验

目的:通过与罗夏评定量表RRS的对比研究,验证罗夏墨迹测验中自我知觉记分的效度。方法:①对象:某大学教育学院2004级心理学专业,学前教育专业,教育学专业的63名本科生。其中男生15名,女生48名;平均年龄21.2岁。受试者对测试知情同意。②测试方法:个别测试罗夏墨迹测验,根据罗夏综合系统的解释统计出H、H%、ECI等9个与自我概念有关的指标,并让熟悉的人根据RRS的内容对63名学生的自我知觉分别做出评定,分自我中心、自信、自我评价客观性3个分量表记分。再计算出罗夏墨迹测验的9项自我知觉记分与RRS的3个评定量表间的相关。结果:63名均进入结果分析。罗夏测验中关于自我知觉的测量指标纯H、H%、解剖学内容Ay Xy、性内容Sx与自我概念的评定间出现了有意义的相关;指标自我中心指数ECI、形状距离反应FD、阴影距离反应sumV、病理内容MOR与自我概念的评定间则没有出现相关,均值差异检验结果亦不显著。结论:罗夏墨迹技术中的指标纯H、H%、An Xy、Sx适合测量正常人的自我概念,在临床诊断中有重要价值,指标ECI、FD、sumV、MOR则需要进一步研究。     

虎杖“生药袋包颗粒”和免煎颗粒及其饮片汤剂的对比研究

目的：虎杖生药袋包颗粒代替饮片汤的研究。方法：采用正义试验法优虎杖生药袋包颗粒制备工艺条件,并用紫外分光光度法测定生药袋包颗粒,免煎颗粒及饮片煎液中的主要成分１,８－二羟基蒽醌含量,对煎出率也进行了比较。     

Appropriate medication use in individuals aged 80 or more years

Over the last few years, there has been a rapid and steadily expanding demographic explosion in the elderly population in France. When the most dynamic segment of this growth is considered, i.e. patients aged 80 years or more (who, moreover, usually have several diseases), under- or over-prescribing and/or inappropriate prescribing are identified. Three short- and medium-term recommendations are proposed: to quickly get expert consensus on the theme of prescribing for the aged patient; to integrate systematic drug re-evaluation into annual consultations for people aged 80 years or more; and to better coordinate actions and communication between institutions, health professionals and the pharmaceutical industry.     

美托洛尔光学异构体在犬体内的药动学-药效学结合模型

用麻醉犬研究美托洛尔(Met)光学异构体药动学—药效学结合模型。结果表明,ig(+)-Met或(-)-Met后,其药动学符合二室模型,药动学参数V_d/F,CLs/F和AUC在两种Met之间有显著性差异。(+)-Met和(-)-Met的效应和血药浓度关系呈逆时针滞后环。引入效应室理论后,药效和效应室浓度之间的关系符合Sigmoid-E_max模型。应用CAPP软件进行模型拟合,血药浓度的预测值和药效的预测值皆与其实测值较为接近。(+)-Met抑制V_max,dp/dt_max及HR效应的Ce₅₀分别是(-)-Met的3.7,6.8,6.3倍,证实(-)-Met对犬心脏的抑制作用强于(+)-Met。