丹参中抑制血小板聚集的活性成分

从中药丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)的根中获得5种成分,经鉴定3种为已知物即丹参新酮、铁锈醇及Ro-090680,另2种为新化合物,命名为△¹丹参新酮与△¹-丹参酮Ⅱ_A并观察了它们抑制血小板的聚集活性。     

铂类络合物引起的DNA O6-AGT的耗竭及染色体损伤

本文测定了KB,CHL,HL-60和L1210细胞DNA鸟嘌呤O⁶-烷基转移酶(O⁶-AGT)活性。结果表明,KB细咆有较高的O⁶-AGT活性,系Mer⁺细胞。而CHL,HL-60和L1210细胞的O⁶-AGT活性低,属于Mer^-细胞。在此基础上我们观察了顺铂(DDP)、宁辛铂(樟脑胺氯乙酸铂,CCP)和碳铂(JM-8)对KB(Mer⁺)细胞O⁶-AGT的影响及Mer⁺和Mer^-细胞的杀伤及微核的诱发作用。结果表明,三种络合物在等毒性浓度下对O⁶-AGT耗竭程序是CCP>DDP>JM-8,但这种耗竭与杀细胞作用无明显相关性而与微核诱发作用相关。此结果提示铂类络合物对DNA鸟嘌呤O⁶的损伤可能是其致痛致突变的原因之一。     

猝死事件特征的法医学鉴定

0引言猝死(sudden death)是指1~24 h内突然意外死亡. 死者具有隐匿的潜在性疾病或机能障碍,貌似健康无明显临床症状. 因其突发性、意外性及常伴有争吵、激动、饮酒等诱因,极易引起相关当事人对死因的质疑、误解、误判. 通过委托法医学鉴定,可查明死因,化解纷争. 我们对经法医学鉴定的猝死事件的发生特征回顾性分析如下.     

原发性高血压患者醛固酮合酶基因-344C／T多态性与左室结构及功能的关系

目的:分析醛固酮合酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与左室结构和功能的关系。方法:选择2004-10/2005-12于湖北省新华医院高血压专科就诊的68例原发性高血压患者,均符合1999年世界卫生组织/国际高血压联盟高血压诊断标准,男39例,女29例,年龄30￣60岁,平均(43±8)岁,所有患者均对检测项目知情同意。①应用PCR-RELP技术对68例原发性高血压患者的CYP11B2基因-344C/T多态性进行分析。②通过M-型及多普勒超声心动图测定左心室舒张末期内径、左室收缩末期内径、舒张末期室间隔厚度、舒张末期左室后壁厚度、二尖瓣血流舒张早期最大流速以及二尖瓣血流心房收缩期最大流速。③根据左室质量指数判定患者是否存在左室肥厚,左室肥厚的标准:左室质量指数>134g/m2(男性)>110g/m2(女性)。④以性别、年龄、体质量指数、体表面积、血压状况、血脂水平、血浆醛固酮浓度以及醛固酮合酶基因型为自变量,分别以左室舒张末期内径、左室质量为应变量进行分析。⑤以性别、年龄、体质量指数、体表面积、血压状况、血脂水平、血浆醛固酮浓度以及醛固酮合酶基因型为自变量,以左室肥厚发生与否为应变量,进行Logistic回归分析。结果:纳入患者68例全部进入结果分析。①在68例原发性高血压患者中,36例为TT基因型,28例为CT基因型,CC基因型仅为4例。为便于进行统计学分析,将其与CT基因型合并为1组,即根据基因型的不同分为TT基因型组和CT CC基因型组。②CT CC基因型高血压患者的左室舒张期内径、左室质量、左室质量指数分别为(50.2±3.2)mm,(220.8±34.4)g,(123.4±21.5)g/m2,高于TT基因型高血压患者[(48.1±3.2)mm,(197.4±35.5)g,(107.2±15.9)g/m2,t=2.73,2.74,3.54,P<0.01],CT CC基因型的二尖瓣血流舒张早期最大流速/二尖瓣血流心房收缩期最大流速值低于TT基因型高血压患者(0.85±0.20,0.98±0.20,t=2.75,P<0.01)。③在68例高血压患者中,共有23例发生左室肥厚,其中8例为TT基因型、15例为CT CC基因型。④左室肥厚的发生率在2组之间存在显著性差异(χ2=4.60,P=0.03)。CYP11B2基因型与左室舒张末期内径(β=0.290,P=0.007)及左室质量(β=0.294,P=0.006)呈显著性相关。⑤CT CC基因型是未经治疗的原发性高血压患者发生左室肥厚的危险因素(OR值=5.11,P=0.02)。结论:CYP11B2基因-344C/T多态性能影响原发性高血压患者的左室结构及功能,CT CC基因型是未经治疗的原发性高血压患者发生左室肥厚的危险因素。     

嗅鞘细胞移植对脊髓损伤区RhoA表达的影响

目的:轴突生长抑制分子须与其共同复合受体结合后才能激活下游抑制信号RhoA,从而导致细胞骨架塌陷,抑制神经再生。基础及临床研究均证实嗅鞘细胞能够促进脊髓功能的恢复,观察嗅鞘细胞移植前后脊髓损伤区RhoA的动态变化,探讨嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的可能机制。方法:实验于2005-09/2006-05在西安交大医学院环境与基因重点实验室完成。①实验动物:成年SD大鼠40只,随机数字表法分为正常组、模型组、嗅鞘细胞组、DF12对照组,10只/组。另取30只健康成年雄性SD大鼠作为嗅鞘细胞的来源。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:大鼠麻醉后处死,迅速取出头部两侧嗅球,除去软膜,剪取嗅球外面的嗅神经层和小球层,剪碎后离心,胰蛋白酶消化获取嗅鞘细胞悬液。除正常组外,其余各组均建立全横切脊髓损伤模型。嗅鞘细胞组将原代培养12 d的嗅鞘细胞悬液调整为1×10~(11)L~(-1),在距损伤缘上下各1 mm处分4点应用微量注射器注射,深度1.0 mm,每处各注射1μL。DF12对照组同法每点注射等量DF12培养液,模型组、正常组不进行任何处理。③实验评估:各组分别于移植后1,2,4,6,8周采用免疫组化和Western blot免疫印迹技术动态检测脊髓损伤区RhoA表达的变化。同时在移植后8周行嗜银染色检测组织形态学变化。结果:①RhoA表达的变化:正常组RhoA表达的吸光度值明显低于其余3组(P<0.05)。嗅鞘细胞组于移植后1,2,4,6,8周脊髓损伤区RhoA的表达均明显低于模型组和DF12对照组(P<0.01),而模型组和DF12对照组差异无显著性意义(P> 0.01)。②组织形态学变化:嗅鞘细胞移植8周后除正常组外,其余各组均可见明显的神经纤维再生,但模型组与DF12对照组大部分纤维排列紊乱,再生纤维方向性较差;嗅鞘细胞组可见明显的新生轴突,且神经纤维跨越损伤部位修复脊髓损伤,无论在数量还是质量上均优于模型组及DF12对照组。结论:嗅鞘细胞移植可能通过降低脊髓损伤区RhoA蛋白的表达,从而促进损伤脊髓的修复。     

嗅鞘细胞移植对脊髓损伤大鼠诱发电位的影响

目的:观察嗅鞘细胞移植对脊髓损伤大鼠感觉及运动诱发电位的影响,尝试用嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤后受损的传导通路。方法:实验于2004-09/2006-07在西安交通大学口腔医学实验中心完成。①选取成年健康SD大鼠40只,取16只大鼠用于嗅鞘细胞的培养与纯化,剩余24只随机数字表法分为4组:假手术组、模型对照组、嗅鞘细胞移植组、DF12培养液组,6只/组。②模型对照组、嗅鞘细胞移植组、DF12培养液组采用脊髓横切法制作脊髓损伤模型,以T10为中心的后正中切口入路,切除T10全椎板及T9,T11的部分椎板,显露脊髓,以特制探针横预置3-0丝线于待损伤脊髓腹侧硬膜外,以剃须刀片于预置线头侧0.5mm(T10水平)将脊髓横断。假手术组仅切开T10全椎板及T9,T11的部分椎板,对脊髓未作横断处理。③造模后,嗅鞘细胞移植组以距脊髓断端1mm的平面与正中线交点为进针点,每一进针点按1.75mm,1.25mm,1.00mm,0.50mm4个不同深度分别注射嗅鞘细胞培养液0.5μL,注射速度0.1μL/min,每注射位点留针5min。DF12培养液组同法注射0.5μL无血清的D/F12培养液。假手术组、模型对照组未作处理。④术后8周,各组大鼠麻醉后使用DantecKeypoint型四导诱发电位肌电图仪测定感觉及运动诱发电位的潜伏期及波幅变化。结果:24只大鼠全部进入结果分析。①嗅鞘细胞移植术后大体观察:术后6周,嗅鞘细胞移植组双后肢拖步爬行、双侧膝踝关节处溃疡和压疮等失神经支配征象逐渐好转,股四头肌肌力明显恢复,拖步爬行现象改善;而模型对照组、DF12培养液组大鼠失神经支配征象无改善,假手术组未见异常。②术后8周感觉诱发电位检测结果:模型对照组、DF12培养液组均未引出感觉诱发电位波形。与假手术组比较,嗅鞘细胞移植组感觉诱发电位潜伏期明显延长[(2.640±0.294),(14.575±2.117)ms,P<0.01],波幅显著降低[(3.797±0.140),(0.403±0.078)μV,P<0.01]。③模型对照组、DF12培养液组均未引出运动诱发电位波形。与假手术组比较,嗅鞘细胞移植组运动诱发电位潜伏期明显延长[(5.825±0.350),(10.750±1.184)ms,P<0.01],波幅显著降低[(5.200±0.432),(0.10±0.001)μV,P<0.01]。结论:嗅鞘细胞移植治疗可以调节损伤脊髓的内在微环境,加强体感诱发电位和运动诱发电位的恢复表达,改善神经功能。     

非普通肌球蛋白的功能

目的:综合分析非普通肌球蛋白的结构和功能。资料来源:应用计算机检索Pubmed1990-01/2005-02有关非普通肌球蛋白结构和功能的文献,检索词“Unconventional Myosins,Function,Review”,并限定文章语言种类为English。资料选择:对检索到的有关非普通肌球蛋白结构和功能方面的相关信息进行整理,选取针对性强的文章。同一领域的文献则选择权威杂志的文章。资料提炼:共检索到42篇相关文献,其中20篇文章符合要求。排除22篇,其中19篇系重复同一研究,3篇为Meta分析。资料综合:非普通肌球蛋白是具有与肌肉收缩过程中的肌球蛋白相同的保守马达区域系列,尾部不能形成纤维的肌球蛋白类。根据头部区域序列对比,肌球蛋白家族成员分成不同的类,到目前为止共分为18类(Ⅰ～ⅩⅧ)。目前已经明确非普通肌球蛋白在许多细胞过程中起不同的作用,包括粒子的输运、细胞形状的控制、细胞迁移、肌动蛋白细胞骨架组织形成、(细胞)内吞、胞外分泌和信号传导等。结论:非普通肌球蛋白的结构和功能已基本肯定,有些新的肌球蛋白细胞功能已经研究得很清楚,明确了非普通肌球蛋白在许多细胞过程中起不同的作用。但如何确定准确的分子马达和每个个体肌球蛋白的细胞功能仍是一个挑战,要达到这个目标,将要解决若干问题:①它们的机械化学特性是什么。②它们直接相互作用的伙伴是什么。③它们的特性是怎样调节的。     

急性肺损伤兔肺泡灌洗液及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6浓度变化与小剂量高渗盐水的干预

目的:观察创伤性休克兔经小剂量高渗盐水治疗后肺部炎症反应及病理学损伤的变化情况,进一步研究高渗盐水对创伤应激状态下急性肺损伤的作用及其机制。方法:实验于2005-08/2006-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。①实验分组:新西兰白兔30只随机分为3组:假手术组、生理盐水处理组、高渗盐水治疗组,每组10只。②实验方法:假手术组:局部麻醉下行插管术及肝素化,静脉输注平衡盐80mL。生理盐水处理组:用骨钳致兔一侧股骨中下1/3粉碎性骨折,经股动脉放血至储血瓶内,使平均动脉压降至(40±5)mmHg,45min后输注生理盐水4mL/kg,再回输储血及2倍于失血量的平衡盐液进行复苏。高渗盐水治疗组:除以75g/L的氯化钠溶液代替生理盐水外,其余处理同生理盐水处理组。在休克前、休克末、复苏后2h、4h分别采集静脉血1mL备用。复苏后4h空气栓塞处死动物,进行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液。③评估指标:双抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液以及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的浓度;凝胶电泳迁移率改变分析法检测肺泡巨噬细胞核蛋白提取物中核因子κB的活性;显微镜观察肺组织的病理改变。结果:30只实验动物均进入结果分析。①血清细胞因子浓度的变化:与假手术组比较,生理盐水处理组肿瘤坏死因子α浓度在休克发生后迅速升高(P<0.05),复苏后又进一步上升(P<0.01),白细胞介素1β及白细胞介素6浓度在复苏后4h才有明显增加(P<0.01)。高渗盐水治疗组与生理盐水处理组比较,复苏后2～4h肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。②支气管肺泡灌洗液细胞因子浓度的变化:生理盐水处理组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均显著高于假手术组(P均<0.01),高渗盐水治疗组各细胞因子的浓度虽然也高于假手术组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),但与生理盐水处理组比较均有明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。③肺泡巨噬细胞核因子κB的活性变化:生理盐水处理组核因子κB的活性远高于假手术组(P<0.01),而高渗盐水治疗组核因子κB的活性虽然也高于假手术组(P<0.01),但与生理盐水处理组比较有显著降低(P<0.01)。④肺组织病理学改变:高渗盐水治疗组肺水肿及炎性细胞浸润明显减轻;Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮细胞内仅有少量空泡,上皮基本完整,基底膜增厚不明显。结论:小剂量高渗盐水治疗可抑制创伤性休克时核因子κB的活化,减少促炎细胞因子的合成与分泌,减轻肺部的炎症反应,从而发挥对急性肺损伤的保护作用。     

聚丙烯材料假发移植物的组织相容性及可移植假发的外观效果

目的:以聚丙烯为基础材料制作假发移植物,通过动物实验观察其组织相容性及可移植假发的外观仿真效果。方法:实验于2005-08/2006-08在南方医科大学动物实验中心完成。运用聚丙烯材料设计并加工成侧面呈锯齿状锚刺,顶端固定假发的移植物。移植物主干和锚刺均使用医用聚丙烯单丝线(购自上海浦东金环医疗用品有限公司)制作;发束由单根或多根真人毛发或其他动物毛发组成,根部插在主干端头的埋入孔内,加压融合。取10只新西兰白兔(南方医科大学动物实验中心提供),每只白兔头皮采用毛囊单位移植技术,植入20根假发移植物,10只白兔头皮共移植200根。将10只白兔按随机数字表法分为两组,即大体观察组和组织学观察组,每组5只。大体观察组主要观察1年内移植物脱落情况并计数;组织学观察组分别于移植后第1周、第2周及其后1年内每个月在无菌条件下,每只兔分次采集包含有1根移植物的头皮组织条,进行组织学观察。结果:10只白兔全部进入结果分析,无脱失。①移植物的组织形态学观察结果:移植后1周移植物周围组织炎症反应轻微;移植后2周移植物周围有大量胶原纤维形成,炎症细胞局部稍有增多,移植物的主干和锚刺间已有胶原纤维长入;移植1个月后,成熟的纤维组织形成包膜于移植物及锚刺周围,无明显炎症反应。移植2个月后至1年,移植物周围组织无明显不良反应。②移植物脱落情况:5只白兔头皮共移植100根移植物。移植后第1周共脱落4根,第2周脱落2根,第3周￣第12个月无脱落,总结1年内脱落率为6%,并集中于最初2周。结论:以聚丙烯为基础材料的假发移植物可以较稳固地锚定于头皮,具有良好的组织相容性,可获得较佳仿真效果,是运用毛发修复外科技术治疗秃发的一种新的探索。但移植术后早期要注意保护创面,防止牵拉移植物。     

中长跑运动锻炼对机体心肺功能的干预效应

目的:通过对体育学院中长跑运动员和普通大学生进行试验对比,揭示长期耐力性训练对于机体心肺功能所产生的影响。方法:实验于2005-04/05在广西师范大学体育学院生理实验室完成。选择32名男性受试者,在正式试验前进行专项体格检查,均为身体健康者。其中试验组为高等体育院校中长跑运动员(n=16),年龄(20±1)岁,身高(171±3)cm,体质量(65.3±3.7)kg,训练年限(2±1)年,运动员级别2、3级。对照组为普通大学生(n=16),年龄(20±1)岁,身高(171±3)cm,体质量(64.8±5.4)kg,采用列杜诺夫联合机能试验、哈佛台阶试验、最大吸氧量和无氧阈等生理指标,观察16名高等体育院校中长跑运动员和16名普通大学生在安静时、负荷后即刻和恢复期心肺功能变化的情况。结果:纳入32名受试者,均进入实验结果分析。①心功能和哈佛指数的变化:心率以对照组在进行负荷后即刻的值与安静时相比,其变化幅度较试验组大,差异有显著性意义[负荷后即刻:(157±10),(128±6)次/min;安静时:(70±9),(61±4)次/min;P<0.05]。试验组安静时收缩压和舒张压的值都较对照组低,但差异无显著性意义[收缩压:(108±9),(115±10)mmHg(1mmHg=0.133kPa);舒张压:(64±7),(76±9)mmHg]。在定量负荷后的恢复期内,其血压值都较对照低,差异有显著性意义[收缩压:(113±8),(131±12)mmHg;舒张压:(68±6),(83±10)mmHg;P<0.01]。试验组哈佛指数都较对照组相应时相内的值高,差异有显著性意义[安静时:(93±2)%,(68±4)%,P<0.01;负荷后即刻:(77±3)%,(52±3)%,P<0.05;恢复期:(86±3)%,(63±5)%;P<0.05]。②肺活量的变化:安静时试验组的肺活量较大,与对照组相比,差异具有显著性意义[(4664.25±801.47),(3913.77±710.34)mL;P<0.05]。③最大吸氧量和无氧功率的变化:试验组在进行负荷后即刻的最大吸氧量和无氧功率值与对照组相比,差异具有显著性意义[最大吸氧量:(3.04±0.35),(2.25±0.13)L/min;无氧功率:(570.17±100.22),(498.02±112.49)W;P<0.05]。结论:在高等院校进行中长跑运动训练能有效地降低心率和血压的升高幅度,提高哈佛指数和肺通气量的值。