恶性疟原虫环子孢子蛋白在无细胞表达系统的表达及纯化研究

目的:应用麦胚无细胞表达系统(Wheat Germ Cell-Free System),表达及纯化恶性疟原虫环子孢子蛋白(Circumsporozo-ite protein,CSP),以便用于免疫学评价。方法:根据从PlasmoDB检索获得的恶性疟原虫CSP基因序列,设计一对特异引物,以从ATCC获得的恶性疟原虫3D7基因组质粒(P.f.3D7 genomic DNA)为模板,经PCR反应扩增目的片段。PCR产物经NcoI与Sma I双酶切后,与经过同样酶切的pIVEX 1.3WG载体连接,随后转化大肠杆菌DH5а,经筛选获得pIVEX WG1.3-CSP重组质粒。将该重组质粒加入到麦胚表达试剂盒并按照说明书进行表达,表达产物经亲和层析柱纯化,最终获得CSP蛋白。结果:PCR反应成功扩增CSP基因序列,并成功构建pIVEX WG1.3-CSP重组质粒;经WB试验证明,麦胚无细胞表达系统可成功表达并纯化CSP蛋白。结论:麦胚无细胞表达系统可高效表达恶性疟原虫CSP,为CSP用于后续的诊断试剂和疫苗评价方面的研究打下了坚实的基础。     

用LC-MS法测定人血浆中顺式阿曲库铵的浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱方法（LC-MS）测定人血浆中顺式阿曲库铵的浓度,并应用于临床治疗药物监测。方法 采用盐酸普罗帕酮同位素内标,样品经2%甲酸水和含内标的乙腈溶液沉淀蛋白处理。HPLC色谱柱为Agilent SB-C₁₈,柱温35 ℃,流速0.3 ml/min,流动相为0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为ESI正离子模式,MRM扫描,监测阿曲库铵m/z 464.6~358.4,盐酸普罗帕酮（内标）m/z 342.2~116.2。结果 人血浆中顺式阿曲库铵在该条件下分离良好,在2~500 ng/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.996 5）,定量下限为2 ng/ml。方法日内精密度RSD<16.0%;日间精密度RSD<6.0%。平均回收率为97.63%~111.93%;血浆样品室温放置4 h,-80 ℃放置14 d,处理后室温放置24 h,稳定性良好。结论 本方法简便、准确、快速、稳定,适用于顺式阿曲库铵的血药浓度测定。     

赛庚啶对离体大鼠心肌再灌注损伤的保护作用

离体大鼠心脏经低灌(0.17 ml·min~(-1))60min后,用正常K-H液复灌20min,可导致严重的心肌损伤,赛庚啶(2.5和5 μmol·L~(-1))对上述心肌损伤有明显的保护作用,表现为明显改善心脏复灌时的心功能,抑制心律失常的发生和降低心脏停搏的发生率,减少心肌细胞内CK和LDH的漏出,提高心肌组织SOD和GSH-Px活性,抑制MDA的升高。     

骨髓增生异常综合征治疗新药开发

骨髓增生异常综合征(MDS)是克隆性造血干细胞疾病,临床表现呈现多样性和异质性,以血细胞减少为特征,少数有进展为急性白血病的危险。近十年出现了多种新的治疗方案,本文综述近年上市的以及目前处于临床研究阶段的治疗MDS的新药开发进展。     

腕管镜及改良小切口松解法治疗糖尿病腕管综合征的疗效分析

目的 探讨腕管镜腕管松解术和改良小切口腕管松解术治疗糖尿病腕管综合征的临床疗效和安全性差异.方法 回顾性分析腕管综合征合并糖尿病患者86例,其中43例患者行双孔道腕管镜腕管松解术(A组),43例患者行改良小切口腕管松解术(B组),随访10 ～ 24个月,统计两组患者的手术时间、住院时间、恢复工作时间、术后并发症和临床疗效.结果 A组和B组患者的优良率分别为93.02％和90.70％,两组的优良率比较差异无统计学意义(P＞0.05);A组患者的住院时间[(5.5±2.7)vs(6.8±2.9)d]及术后恢复工作时间[(19.3±3.1)vs(21.5±3.3)d]少于B组,差异有统计学意义(P＜0.05),而两组患者的手术时间、术后并发症发生率比较均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腕管镜腕管松解法和改良小切口腕管松解法均是治疗糖尿病腕管综合征的有效且安全的手术方法,腕管镜腕管减压术患者住院时间短、术后恢复快,对于机体修补能力较差的糖尿病患者更为适合.     

南极海茸多糖果冻的润肠通便功能研究

目的 制备南极海茸多糖果冻,研究其对便秘小鼠的润肠通便作用.方法 以南极海茸多糖为原料,制备1款酸甜可口的果冻.采用1.苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生.高效液相色谱法(HPLC)测定果冻中南极海茸多糖的含量.探索了南极海茸多糖果冻对便秘小鼠润肠通便作用:将昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、果冻...     

疏肝活血化痰法对乳腺增生患者生存质量的改变

目的:研究疏肝活血化痰法对乳腺增生患者生存质量的改变。方法:将160例乳腺增生患者随机分为两组:研究组用疏肝活血化痰法,对照组选用乳癖消片和加味逍遥胶囊治疗;采用世界卫生组织生存质量评定量表(WHOQOL-100)中文版量表进行调查评估两组患者治疗前后的生存质量。结果:研究组在生理领域、心理领域、独立性领域中的11个方面及总的生存质量与健康状况评分均有明显改善,其中5个方面改善效果明显优于对照组。结论:疏肝活血化痰法能明显改善乳腺增生患者生理及精神状态,明显提高患者生存质量。     

大黄地上部分化学成分与药理作用研究进展

大黄为传统大宗中药材,临床应用广泛,国内外需求量极大,但其传统药用部位为根及根茎,而占大黄总生物资源二分之一以上的地上部分作为非药用部位被丢弃,浪费资源的同时造成一定的环境压力。研究表明,大黄地上部分富含蛋白质、粗纤维、果胶、氨基酸等营养成分,以及蒽醌类、黄酮类、二苯乙烯类等化合物,具有泻下、抗炎、止血、抗氧化、降血糖、降血脂等药理活性。在查阅国内外文献的基础上,本文对大黄地上部分的化学成分和药理作用进行综述,并对其开发前景进行展望,为其深入研究和综合开发利用提供参考。     

白眉蝮蛇蛇毒糖基化蛋白的质谱分析

[目的]蛋白质组学方法分析和初步鉴定旅顺产白眉蝮蛇（Gloydius blomhoffi Brevicaudus）蛇毒中的糖蛋白。[方法]SDS-PAGE用于白眉蝮蛇粗毒蛋白质组份分离,糖蛋白凝胶荧光染料Pro-Q-Emerald染糖基化蛋白,采用胰蛋白酶酶解蛋白质,用反相C18-HPLC分离肽段混合物,用纳升电喷雾电离串联质谱（nESI-MS/MS）系统进行的质谱数据采集,蛋白质鉴定用Biowroks软件搜索NCBInr数据库完成。[结果]旅顺产白眉蝮蛇蛇毒L-氨基酸氧化酶、金属蛋白酶、谷氨酰环化酶、salmobin、纤溶酶原激活物、contortrixobin、磷脂酶A2,神经增长因子和较小分子量的L-氨基酸氧化酶被初步鉴定为糖蛋白,其匹配的肽段数分别为8、4、7、2、3、3、4、2和5个。L-氨基酸氧化酶的纯化与表征结果验证了其糖基化,并以多种糖基化形式存在。[结论]采用蛋白质组学手段从旅顺产白眉蝮蛇蛇毒中鉴定出了8种糖蛋白,该方法简便、快速、准确。     

依达拉奉与奥扎格雷钠联合治疗急性脑梗死疗效观察

目的 评价依达拉奉与奥扎格雷钠联合治疗急性脑梗死的临床疗效.方法 将62例急性脑梗死患者随机分为2组,治疗组30例,对照组32例,进行疗效对比分析,同时观察两组治疗前后神经功能缺损程度改变.结果 治疗组有效率(86.67%)、显效率(56.67%),明显优于对照组有效率(62.50%)、显效率(40.63%).结论 依达拉奉与奥扎格雷钠联合治疗急性脑梗死疗效明显优于单独应用奥扎格雷钠,依达拉奉是治疗急性脑梗死安全有效的药物.