移动差值控制图评估临床实验室肌钙蛋白不确定度

目的运用控制图评估肌钙蛋白I(cTnI)测量不确定度。方法采用日本东曹AIA-1800全自动荧光磁微粒酶免分析仪测定cTnI控制品,1次/天,共30d;用Anderson-Darling法检验数据的正态分布性和独立性;建立单值-移动差值及指数加权移动平均值控制图及评估不确定度。结果 Anderson-Darling检验cTnI质控数据为正态分布性且具有独立性,结果测量不确定为(0.218±0.016)μg/L,(k=2)。结论移动极差控制图法可用来评估cTnI结果不确定度,本研究为临床实验室评价不确定度提供了新的思路。     

妊娠及非妊娠妇女宫颈感染人乳头瘤病毒的基因亚型检测及分析

目的:探讨妊娠及非妊娠妇女宫颈感染人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)的基因分型情况。方法:收集2012年2月—2013年5月在复旦大学附属金山医院妇产科门诊就诊的684例育龄期女性(非妊娠妇女)和857例妊娠妇女的宫颈上皮细胞标本,采用基因扩增及基因芯片技术对宫颈上皮细胞进行HPV基因亚型检测。结果:非妊娠妇女检出HPV感染195例(感染率28.5%),主要的感染类型为HPV43、16、58等。妊娠妇女检出HPV感染102例(感染率11.9%),主要的感染类型为HPV43、16、58等。妊娠妇女中30岁、30~40岁、40岁的HPV感染率分别为10.9%、15.1%、30%,非妊娠妇女中30岁、30~40岁、40岁的患者HPV感染率分别为25.3%、25.2%、32.2%。结论:妊娠妇女HPV感染率低于非妊娠妇女,两组HPV感染型别基本相同,HPV43、16、58型感染是该院妇产科门诊患者的主要感染型别,非妊娠妇女随年龄增长感染率明显升高。     

耐碳青霉烯类药物的细菌种类分布及耐药特性分析

目的探讨三甲中医医院耐碳青霉烯类药物的细菌的种类分布及耐药性情况。方法回顾性分析从临床分类筛选出的74株耐碳青霉烯类药物的抗菌药物的细菌,着重分析其分布种类及耐药特点。结果脑病病区耐碳青霉烯类药物的细菌检出率最高,耐药细菌种类以铜绿假单胞菌为主。30株铜绿假单胞菌对10种抗菌药物的耐药率较低的为妥布霉素(20.0%)、阿米卡星(13.3%);26株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌均为泛耐药株,耐药率较低的为米诺环素(69.2%)、头孢哌酮/舒巴坦(55.6%);18株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌均为泛耐药株,耐药率较低的为米诺环素(44.4%)、四环素(55.6%)。结论耐碳青霉烯铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗菌药物较为敏感,但临床使用时要注意观察耐药性的变化;耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌治疗建议临床上采用头孢哌酮/舒巴坦与米诺环素联合用药;对碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌体外对四环素类药物有效,然而其体内效果如何还有待进一步证实。耐碳青霉烯类药物的细菌的发生率越来越高,各医院应结合药敏结果,合理用药,以减轻菌株耐药性的发生速度。     

大鼠RBL-2H3细胞瞬时感受器电位M7通道参与细胞存活及凋亡

背景：瞬时感受器电位M7是肥大细胞上重要的钙离子通道,但其在肥大细胞存活及凋亡过程中的作用仍未明确。目的：观察瞬时感受器电位M7通道对大鼠RBL-2H3细胞存活及凋亡的影响。方法：取对数生长期RBL-2H3细胞,①分别以50,100,200μmol/L瞬时感受器电位通道阻断剂2-APB进行干预,并以0.1%DMSO干预的细胞及正常培养的细胞作对照。②以瞬时感受器电位M7-siRNA反转录病毒载体转染RBL-2H3细胞,并设立空载体组和正常对照组。结果与结论：经过100,200μmol/L的2-APB作用72h后,RBL-2H3细胞数减少,吸光度值降低（P〈0.05）,细胞凋亡增多,早期凋亡率和总凋亡率增加（P〈0.05）;RBL-2H3细胞转染si-瞬时感受器电位M772h后,吸光度值降低（P〈0.05）,细胞凋亡增多,早期凋亡率和总凋亡率增加（P〈0.05）。说明瞬时感受器电位M7通道参与了RBL-2H3细胞存活和凋亡过程。     

自拟中药方浴足治疗老年闭塞性下肢动脉硬化症

【目的】探讨中药浴足治疗闭塞性下肢动脉硬化症的临床疗效。【方法】120例患者随机分为治疗组和对照组,对照组给予丁咯地尔10mg,每日一次静滴,治疗组在此基础上加用自拟中药方煎煮浴足,每日一次,于治疗前后,第1、2周末对足疼痛发作频次、持续时间、疼痛程度和踝肱指数（ABI）进行测评。【结果】加用中药浴足组在减少足静息痛发作频次、缩短每次发作持续时间、减轻疼痛程度、改善ABI及降低复发方面,均明显优于单用丁咯地尔组。【结论】中药浴足加丁咯地尔治疗闭塞性下肢动脉硬化症有较好疗效。     

2012年中国CHINET血培养临床分离菌的分布及耐药性

目的了解2012年中国CHINET血培养分离菌的构成及耐药性。方法对中国CHINET 细菌耐药监测网2012年1月至12月所有血培养分离菌,按统一方案用K‐B纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验。结果2012年自血标本中共获分离菌8490株,其中革兰阳性球菌占56．0％,革兰阴性杆菌占44．0％。居前10位的分离菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌（CNS ）（35．5％）、大肠埃希菌（16．4％）、克雷伯菌属（9．8％）（其中91．1％为肺炎克雷伯菌）、肠球菌属（7．2％）、金黄色葡萄球菌（金葡菌）（7．2％）、不动杆菌属（5．9％）（其中93．8％为鲍曼不动杆菌）、草绿色链球菌（4．3％）、铜绿假单胞菌（3．2％）、肠杆菌属（2．4％）和洋葱伯克霍尔德菌（1．5％） ,占所有分离菌株的93．5％。甲氧西林耐药金葡菌（M RSA ）、甲氧西林耐药 CNS （MRCNS）分别占金葡菌和CNS的50．8％和61．7％。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和氨苄西林的耐药率分别为29．0％和10． 9％,屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。草绿色链球菌对青霉素的耐药率为3．8％。儿童分离株中青霉素耐药肺炎链球菌株为31．2％,与成人分离株大致相仿（34．1％）。葡萄球菌属、肺炎链球菌、其他链球菌属和粪肠球菌中均未发现万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,屎肠球菌对万古霉素的耐药率为3．5％。大肠埃希菌、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属和枸橼酸菌属等肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药率均在10．0％以下,唯克雷伯菌属对碳青霉烯类耐药率为11．2％～19．8％。不发酵糖革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药率较高,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率近30．0％,对不动杆菌属耐药率达70．0％以上。结论2012年中国CHINET监测资料显示,血培养分离菌仍以革兰阳性菌为主,但检出比例有所下降,革兰阴性菌有所上升。血培养分离株对常用抗菌药物耐药性仍严重,尤其革兰阴性菌对碳青霉烯类耐药率呈上升趋势。因此应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施抑制耐药菌传播。     

血清标本放置时间对细胞因子检测结果的影响

目的：探讨风湿病患者血清细胞因子检测的重要性,了解静脉血血清标本不同的放置时间对风湿性自身免疫疾病相关的细胞因子检测结果的影响。方法采集26例风湿病患者静脉血血清,分别于室温下放置0、1、4h后,通过液相悬浮芯片技术对其进行一系列细胞因子测定,并进行统计学分析。结果风湿病患者血清中白细胞介素（IL ）-10、IL-13、干扰素诱导蛋白10（IP-10）和干扰素 g （IFN-g ）等细胞因子水平与患者年龄相关（ P＜0．05）;血清中IL-10、IL-12p70、正常T细胞激活上调性表达因子（RANTES）、IP-10和巨噬细胞炎症蛋白1β（MIP-1β）等细胞因子水平与患者疾病类型相关（P＜0．05）;血清室温放置4 h内各标本中细胞因子水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论液相悬浮芯片技术可高效分析风湿病患者血清细胞因子谱,有助于疾病诊断和评估。风湿病患者血清细胞因子检测时限可延长至室温下4h,可以满足临床和基础研究的检测要求。     

核酸检测技术在献血人员血液筛查中的应用

目的：采取核酸检测（NAT ）技术进行血液筛查,减少由献血者感染“窗口期”及隐匿感染献血引起的疾病传播。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）对54358份献血者标本进行乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、人类免疫缺陷病毒抗体（抗-HIV）、丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）检测,同时用转录介导扩增技术（TMA）进行 HBV-DNA 、HCV-RNA 检测,人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）RNA 核酸检测。结果 NAT 检测阳性 ELISA 检测阴性标本共51份。51份标本有鉴别试验结果的33份,其中32份 HBV-DNA 阳性,1份 HIV-1 RNA 阳性,HIV-1 RNA 阳性的献血者经南京市疾病预防控制中心免疫印迹法确认为 HIV-1疑似阳性（gp160和 p24±）。半年后再次回访该献血者,抽取血样送南京市疾控中心经免疫印迹法确认为 HIV-1阳性（gp160、gp120、p66、p51、gp41、p31、p24、p17＋）。结论 NAT 技术可以减少由献血者感染“窗口期”及隐匿感染献血引起的疾病传播,从而减少输血风险。     

4项血常规参数对病毒性肝炎患者的临床意义

目的：探讨平均红细胞体积（MCV）、红细胞分布宽度（RDW）、血小板分布宽度（PDW）以及平均血小板体积（MPV）4项血常规参数对病毒性肝炎患者的临床意义。方法选取冀中能源峰峰集团公司总医院2010年12月至2012年12月病毒性肝炎患者376例为研究对象,依照患者的病情,将其分为急性肝炎组、慢性肝炎组、肝硬化组、重症肝炎组,同期选择32名健康人员作为对照组。利用全自动血细胞计数仪针对所有人员进行血常规参数的详细检测。并且在同一时间利用全自动生化分析仪对血清总胆红素（TBiL）以及清蛋白（ALB）进行检测。此外,利用全自动血凝仪对患者的血浆凝血酶原时间（PT ）进行测定。结果慢性肝炎组、肝硬化组以及重症肝炎组患者RDW 水平均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）。慢性肝炎组及肝硬化组 MCV 水平均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）。而慢性肝炎组、肝硬化组以及重症肝炎组与对照组 PDW 与 MPV 水平间比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。病毒性肝炎患者 RDW 与 PT 以及 TBiL 呈现正相关关系,但与 ALB 呈现负相关关系（P＜0．05）;且患者 MCV 与其 PT 水平呈现正相关关系,而与 ALB 呈现负相关关系。结论对 MCV 及 RDW 进行检测,能够有效反应病毒性肝炎患者肝脏病变程度,具有重大的临床意义。     

乙型肝炎病毒表面抗原特异性结合肽的筛选与鉴定

目的：筛选并鉴定与乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg ）特异性结合的多肽。方法将酵母表达的HBsAg包被在微孔板上,加入噬菌体进行随机肽库筛选,经过4轮筛选后,随机挑取15个克隆进行DNA测序,并通过夹心ELISA方法鉴定其亲和力,采用剂量依赖结合实验和竞争抑制实验检测其与 HBsAg结合的特异性。结果经过4轮筛选,得到一优势克隆No ．3,展示肽段为SSYAPYVWQPIA ,与 HBsAg有较强的亲和力,剂量依赖结合实验和竞争抑制实验证明克隆No ．3与HBsAg的结合是特异性的。结论利用噬菌体展示肽库技术可以获得HBsAg特异性结合肽,此多肽可以作为靶向分子用于乙型肝炎的基因治疗,为乙型肝炎的靶向基因治疗奠定实验基础。