GST/HIF-1α(融合蛋白表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

目的 构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和Not I酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEx-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并转化E.coli DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 酶切及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST/HIF-1α全长及各个截短突变体融合蛋白的表达.结论 成功构建了HIF-1α原核表达载体及其截短突变体,并证实了融合蛋白的表达,为进一步纯化HIF-1α蛋白和研究HIF-1α的生物学功能奠定了基础.     

中药口崩片体外崩解时限测定方法的研究

目的:对中药口崩片体外崩解时间测定方法进行研究,筛选重现性、分辨率、体内外相关性好的评价方法。方法:采用自制和常用方法测定实验样品(空白和中药口崩片)的体外崩解时间,与口腔内崩解时间比较,评价不同方法测定结果的重现性、分辨率、体内外相关性等。结果:不同方法测定同一类型口崩片具有不同崩解时间。量筒静态法、崩解仪改良法均有缺陷,测定结果与口腔内崩解时间偏离较大;自制崩解装置能较真实地测试口崩片的崩解性能,测定的崩解时间接近口腔内崩解时间,终点判断明确,重现性、分辨率均优于其他方法,体内外相关性良好。结论:自制崩解装置适合测定口崩片(包括中药口崩片)的体外崩解时间,可作为质量控制参考方法。     

Long-term P300 in hemispherectomized patients

Background In the years around 1990, in Beijing 13antan Hospital Affiliated to Capital Medical University many children with infantile hemiplegia and intractable epilepsy were treated with further modified anatomical hemispherectomy. We report the follow up of the first six cases. To make good use of these precious clinical data and make clear their neuropsychological state, we performed neuropsychological and neurophysiological measurements in these patients, who were at a median of 17.8 years after hemispherectomy. Methods Oddball task was given to the patients and to a normal control group to collect the peak latency （PL） and peak amplitude （PA） of event-related potentials （ERPs）-P300. The P300 data of the two groups were analyzed and the P300 patterns of the six patients are presented. The baseline characteristics and long-term follow-up of the six hemispherectomized patients, especially the long-term seizure control and cognitive function after surgery, are described. Results Five patients had no seizures and one was almost seizure-free during the years after surgery. Clear P300 was obtained from every electrode in the patients. Differences of P300 between patients and normal control group had no statistical significance. And the maximum PA was at the site of electrode Pz or Cz which was consistent with that of the control group and with previous findings. Conclusions Further modified anatomical hemispherectomy has preferable long-term antiepileptic effects. The P300 results of the patients mean that the basic cognitive function of the patients has no difference from the control group. This reflects the plasticity of the hemisphere to some extent and increases the affirmation of the long-term curative effects of further modified anatomical hemispherectomy from both neuropsychological and neurophysiological aspects.     

非洛地平治疗老年高血压合并颈动脉粥样硬化斑块的临床研究

目的探讨非洛地平对老年高血压患者颈动脉粥样硬化斑块的治疗作用。方法选择老年高血压患者合并颈动脉粥样硬化斑块82例,随机分为非洛地平组(治疗组42例)和盐酸贝那普利组(对照组40例)。用高分辨超声技术检测2组对象的颈动脉内膜中层厚度(IMT)。对2组分别在治疗3个月、9个月及15个月后复查血压和颈动脉IMT。结果2组间血压降低无显著性差异(P>0.05)。但非洛地平组在逆转颈动脉IMT方面优于盐酸贝那普利组(P<0.05)。结论非洛地平除具有良好的降压作用,还具有抗动脉粥样硬化、逆转斑块的作用。     

急性重症下肢深静脉血栓形成的外科治疗

目的 探讨急性重症下肢深静脉血栓形成(DVT)的外科治疗方法 与效果.方法 回顾性分析了2002年1月至2008年12月首都医科大学宣武医院血管外科治疗18例急性重症DVT患者,均有肿胀和肢体疼痛;16例伴有皮肤颜色青紫(1例小腿皮肤坏疽),2例伴有皮肤苍白;10例出现下肢足背动脉搏动减弱,8例足背动脉搏动正常;血管彩色多普勒超声显示:下肢深、浅静脉均有血栓形成.1例因患肢坏疽行膝上截肢手术.17例采用手术切开取栓,仅3例单纯采用手术切开取栓术,5例加用大隐静脉耻骨上转流术,6例加用人工血管耻骨上转流术,3例采用髂静脉松解成形术.结果 手术死亡1例(5.6%).下肢肿胀消失7例(41.2%),明显减轻10例(58.8%).除截肢的1例外其余患者皮肤颜色均基本恢复正常,动脉搏动也恢复正常.16例患者被随访,随访率为94.1%;随访时间为3～82个月,平均为34个月.患肢肿胀完全消失5例,占31.3%;肿胀明显减轻者8例,占50%;肿胀复发3例,占18.7%.复发的3例中,1例于术后9个月死于晚期恶性肿瘤,2例分别于35个月和48个月后因移植血管桥内膜增生导致闭塞而复发.结论 外科手术取栓是治疗急性重症DVT的有效方法 ;当髂静脉受压,耻骨上转流是一种可选择的有效方法 .     

pGAPZαA/HD5酵母表达载体的构建

目的 利用分子生物学技术和方法将pGAPZαA质粒改建为带有人防御素5(HD5)基因的新型表达载体pGAPZαA/HD5,为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验基础.方法 PCR技术,以设计的引物P1/P2从克隆载体pMD18-T/HD5中扩增人防御素5基因片段,并将扩增出来的目的 基因和pGAPZαA质粒用EcoRI和XbaI双酶切后连接构成重组质粒,然后转化至E.coli Top10感受态细胞,筛选阳性克隆.最后对PCR及酶切鉴定含有目的 基因的克隆进行测序和电泳.结果 获得HD5基因片断大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的 基因的正确序列;电泳结果证明已将此片段克隆到pGAPZαA内.结论 成功构建了HD5基因的新型表达载体pGAPZαA/HD5.     

断流术和分流术对巨脾型晚期血吸虫病门脉高压性胃病的影响

目的 探讨断流术和分流术对巨脾型晚期血吸虫病门脉高压性胃病的影响.方法 采用对比的方法分析该院10年间48例巨脾型晚期血吸虫病患者随机分为断流术和分流术组,手术前后行胃镜检查,对比胃黏膜镜下变化.结果 分流组门脉高压性胃病程度好转(P＜0.05),而断流组加重(P＜0.05).结论 在临床上要对巨脾型晚期血吸虫病患者在术前行胃镜检查了解患者门脉高压性胃病的程度和食管胃底静脉曲张的程度,慎重的选择手术方式.     

老年肠梗阻患者276例的综合治疗与细化护理

目的：探讨老年肠梗阻有关临床特点、综合治疗的有关问题及护理方法。方法：对2000年2008年70岁以上老年肠梗阻276例进行回顾性分析和总结。结果：134例患者行手术治疗,115例治愈。另142例采用非手术治疗,84例治愈。结论：（1）提高对老年肠梗阻临床特点的认识,正确地选择手术时机和合理的手术方式,能获良好预后。（2）加强患者各器官功能支持和营养代谢支持是减少死亡率的重要环节。（3）重视老年特点,给予适当的护理,促进康复。     

乌体林斯治疗小儿反复呼吸道感染临床观察

目的探讨乌体林斯对反复呼吸道感染（RRI）患儿体液免疫的调节作用。方法观察乌体林斯治疗的RRI患儿的外周血血清IgG、IgA、IgM、C3、C4的含量变化和临床疗效。结果治疗前,两组IgG、IgA、IgM、C3、C4含量基本一致（P〉0.05）;治疗后,与治疗前及对照组比较,乌体林斯组IgG、IgA、IgM、C3、C4均有不同程度的升高（均P〈0.05）。乌体林斯组显效率、总有效率均明显优于对照组（P〈0.01）。结论乌体林斯能促进RRI患儿免疫球蛋白和补体的分泌而改善患儿的体液免疫功能,临床疗效确切,安全性高,是治疗小儿RRI较理想的药物。     

头皮冠状切口的颧骨颧弓骨折切开复位术临床应用及满意度分析

目的探讨头皮半冠状切口切开复位,小钛板坚强内固定早期治疗颧骨颧弓骨折的方法和疗效评估。方法22例颧骨颧弓骨折患者,采用头皮半冠状切口完成骨折复位及钛板坚强内固定,术前术后采用10分法进行满意度分析。结果所有患者创口均I期愈合,无术后并发症发生,面部外形及功能恢复满意,总满意度为91％。结论头皮半冠状切口结合钛板坚强内固定治疗颧骨颧弓骨折,具有切口隐蔽、安全、固定可靠及患者满意的治疗效果。