硝基还原酶/CB1954自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞杀伤效应的实验研究

目的:体外观察大肠杆菌硝基还原酶/[5-(1-氮丙啶)-2,4-二硝基苯甲酰胺](以下简称NTR/CB1954)自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞的杀伤效应,探索一种新的宫颈癌基因治疗方法.方法: 利用PCR技术从Escherichia coli K12的基因组中扩增出编码NTR的基因nfsB,酶切后,连接到真核表达载体pcDNA3上,获得重组载体pcDNA3-nfsB,lipofectamineTM2000脂质体转染法将pcDNA3-nfsB转染Hela细胞,筛选稳定表达细胞株,应用RT-PCR以及SDS-PAGE检测NTR在Hela细胞中的表达,MTT法检测NTR/CB1954对Hela细胞活力的影响,流式细胞术检测亚二倍体细胞率改变,PI/Hoechest33258双染荧光显微镜下观察Hela细胞凋亡率.结果: 成功构建了真核表达载体pcDNA3-nfsB,获得稳定表达NTR的Hela细胞株,在mRNA水平以及蛋白水平检测到NTR在Hela细胞中的表达,NTR/CB1954自杀基因系统明显影响Hela细胞的活力,增加了Hela细胞的凋亡率.结论: NTR/CB1954自杀基因系统对Hela细胞在体外通过凋亡产生明显的杀伤效应.     

自发恶性转化的大鼠骨髓间充质干细胞基因表达谱的芯片分析

目的:解析骨髓间充质干细胞(MSCs)作为组织工程种子细胞的自发恶性转化的分子遗传学基础,探讨其临床可用性和安全性.方法:密度梯度离心法和贴壁筛选法联合应用,分离大鼠MSCs,流式细胞仪分析细胞同源性,体外培养6个月后获得自发恶性转化的MSCs.Trizol总RNA抽提法获取足量的RNA,用于MSCs基因表达谱的分析.实时定量RT-PCR法对在自发恶性转化的MSCs中呈差异表达的基因进行扩增和检测,以验证基因芯片分析结果.结果:流式细胞仪检测表明了所分离MSCs的高度同源性.MSCs发生自发恶性转化后,有44条差异表达基因,其中21条基因表达上调,23条基因表达下调.经实时定量RT-PCR检测差异表达基因结果与基因芯片结果一致.结论: Wnt、SHH、Notch、TGFβ/BMPs等信号转导通路上的若干基因在MSCs自发恶性转化中起到重要作用.     

全息光栅法视网膜调制传递函数测定装置的实验研究

目的验证在光学实验平台上利用全息光栅法及“0”级空间滤过法搭建的调制传递函数（modulation transfer function,MTF）测量装置的可行性,从而为今后该种仪器的顺利开发、生产做好相关理论和实验的基础工作。方法利用全息光栅法及“0”级空间滤过法在光具座上搭建视网膜调制传递函数测定实验装置．并进行一般人群测量,根据所测量结果与25例正常人（50眼）的调制传递函数进行比较分析。结果用本实验装置所测量的MTF曲线结果为：MTF的峰值位于中空间频率区6cpd,在低频区和高频区MTF呈下降趋势,曲线表现一倒置的“U”字形,符合人眼MTF的特点。结论本实验装置经过初步试用表明,利用全息光栅法及“O”级空间滤过法制作的视网膜调制传递函数测定装置所测人眼的MtF曲线特征,与正常人眼MTF值的符合性好,为今后开发基于全息光栅法及“O”级空间滤过法的人眼调制传递函数测量产品提供了可靠的实验依据。     

玻璃体切割联合硅油填充治疗球内异物的随访观察

目的 评价玻璃体切割联合硅油填充术对严重球内异物伤眼的治疗效果.方法 回顾性研究18例严重球内异物伤眼的临床资料.所有患眼均行玻璃体切割术取出异物,硅油填充,术后平均随访27.8个月.随访项目包括最佳矫正视力、PVR发生情况、青光眼、角膜变性、白内障、低眼压及眼球萎缩等.结果 术后3、6、12及24个月功能成功(VA≥0.02)率分别为88.9%、100%、100%及100%,与术前27.8%相比明显升高(P<0.05);脱盲(VA≥0.05)率分别为44.4%、72.2%、77.8%及77.8%与术前0相比明显升高(P<0.05);脱离低视力(VA≥0.3)率分别为11.1%、27.7%、33.3%及33.3%与术前0相比明显升高,除术后3个月外,均有统计学意义(P<0.05).术后12个月时,硅油眼PVR的发生率为28.6%,明显低于无硅油眼的90.9%(P<0.05).术后24个月时,硅油填充≥12个月眼的PVR的发生率为42.9%.明显低于硅油填充<12个月眼的90.9%(P<0.05).61.1%眼发生暂时性眼压升高,16.7%眼发生角膜变性,11.1%眼发生低眼压,未发生白内障和眼球萎缩.结论 玻璃体切割联合硅油填充术是治疗严重球内异物伤眼的有效手段,在无严重硅油填充并发症的情况下,适当延长硅油填充时间可以明显降低PVR发生的风险.     

上海市腹泻病综合监测的创新探索、构建及应用

为满足肠道传染病防控需要,2012年起上海市创新探索腹泻病综合监测模式,监测科学布点、系统采样、多病原集合、联通医院信息系统,实现了"一个监测、多个病种;一份样本,多种病原"的监测模式,对全年龄段人群进行持续的主动监测,监测内容包括人口学、临床医学、流行病学、病原检测、药敏监测等病例信息.监测取得了如下初步成效:掌握真...     

心肌缺血预适应对初次急性心肌梗死患者临床及近期预后的影响

目的评价急性心肌梗死(AMI)发病前48h内的心绞痛发作对初次AMI临床及近期预后的影响。方法138例均为初次AMI患者,按发病前48h内有无心绞痛发作,分为缺血预适应(IP)组(n=54)和非缺血预适应(NIP)组(n=84),对比两组心肌酶峰值、恶性心律失常、心源性休克及院内死亡率。结果IP组临床及近期预后较好,表现为心肌梗死范围较小(P<0.05),心肌酶峰值较低(P<0.05),近期住院期间严重心律失常、心源性休克、明显心力衰竭、心源性病死率均低于NIP组(P<0.05)。结论初次AMI前48h内心绞痛的发作对心肌有一定的保护作用,其机理可能与心肌缺血预适应有关。     

散发性结直肠癌PTEN基因突变与微卫星改变间的关系

背景与目的：研究散发性结直肠癌(Sporadic colorectal cancer,SCRC) 组织中抑癌基因PTEN突变高发区外显子5、7和8的突变与人类结肠癌基因不稳定性间的关系,以进一步研究结肠癌的分子遗传学发病机制。材料与方法：采用聚合酶链反应（PCR）、PCR结合单链构象多态性（PCR-SSCP）技术对68例散发性结直肠癌患者的癌组织及其癌旁组织的PTEN基因第5、7 和第8外显子突变情况和结直肠癌高度敏感的微卫星检测位点Bat25、Bat40及D18S21的改变情况进行检测分析。结果：微卫星改变阳性个体组中PTEN基因突变发生率为28.57%(4/ 14),与微卫星改变阴性个体组中PTEN基因突变发生率相比较,差异有统计学意义（χ2=8.06,P <0.01）。 结论：PTEN基因的突变在微卫星不稳定性结肠癌的发生发展中产生一定的作用。     

纤溶酶原激活物抑制因子1基因启动子区4G／5G多态性与妊娠糖尿病的相关性研究

目的研究妊娠妇女纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）基因启动子区4G／SG多态性的分布并探讨其在广西南宁地区汉族妇女妊娠糖尿病（GDM）发病中的作用。方法研究对象为60例GDM患者（GDM组）和60例正常孕妇（对照组）,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR—RFLP）法测定其PAI-1基因启动子区4G／5G基因,并用发色底物法测定血浆PAI-1活性。结果GDM组怀孕前体质量指数（BMI）和血浆PAI-1活性均显著高于对照组23．1±1．9VS21．6±1．6（P〈0．01）;（788．4±66．1）AU／LVS（713．4±35．4）AU／L（P〈0．01）。PAI-1基因4G／4G、4G／5G、5G／5G3种基因型和4G、5G2种等位基因在两组中的分布差异均有统计学意义（P〈0．05）,GDM组4G／4G基因型频率和4G等位基因频率高于对照组。4G／4G基因型孕妇的怀孕前BMI和血浆PAI-1活性显著高于4G／5G和5G／56基因型者（P〈0．01）;体质量过大孕妇PAI-1活性显著高于体质量正常者（P〈0．01）。多元逐步线性回归分析提示血浆PAI-1活性与基因分型高度相关（r=0．582,P〈0．001）。结论PAI-1基因启动子区4G／4G基因型频率在GDM孕妇显著增高,该基因型可能为广西南宁地区汉族人群GDM的易感基因。GDM妇女血浆PAI1活性增高可能与PAI-1基因启动子区4G等位基因频率增高有关。孕妇怀孕前BMI增高可能与PAI-1基因启动子区4G／4G基因型频率增高有关,并可能与GDM发生有关。     

64层螺旋CT在小儿气道病变诊断中的应用

多层螺旋CT能够直观地重建气管支气管树,发现其形态学的改变及与邻近结构的立体关系,从而为病变的全面诊断提供依据[1-2].2007年4月至2008年4月我们通过对73例呼吸急促或紫绀患儿行64层螺旋CT检查,探讨64层螺旋CT对小儿气道及气道周围病变的诊断价值.     

住院脑卒中患者疾病相关知识认知状况的调查及分析

目的了解不同文化程度住院脑卒中患者对疾病的认知水平,为开展健康教育和干预治疗提供依据。方法选择6家医院脑卒中患者320例,设计问卷调查。结果不同文化程度的患者,对脑卒中危险因素、引起脑卒中的相关疾病及治疗的认知比较有统计学意义。结论脑卒中患者对脑卒中相关知识认知较差,尤以低、中等学历患者为甚,因此需普及疾病相关知识。