小儿急性淋巴细胞白血病微量残留病检测的临床研究

目的　探讨小儿急性淋巴细胞白血病 (ALL)微量残留病 (MRD)检测的临床意义 ,进一步了解ALL复发与缓解的生物学特点。方法　分析近 10年来有MRD检测资料的 77例初治ALL ,对其中 4 4例进行动态追踪检测MRD。主要采用聚合酶链反应 (PCR)方法 ,以免疫球蛋白重链和T细胞受体δ基因重排作为肿瘤标志。结果　初治标本PCR检测MRD阳性者和阴性者的复发率差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。化疗 3个月时PCR检测转阴的病例复发率明显低于未转阴的病例 (P <0 0 5 ) ,且与临床分型无明显相关性。结论　MRD的动态检测可以作为小儿ALL判断预后的独立因素。PCR法动态监测MRD ,有助于完善白血病分型、判断预后和指导治疗。     

Radiofrequency ablation for selective reduction in complex monochorionic multiple pregnancies: A case series

Objective

To determine the safety and efficacy of radiofrequency ablation (RFA) for selective fetal reduction in complex monochorionic multiple pregnancies.

应用套式PCR早期快速诊断麻疹的研究

目的 建立从临床标本中快速检测麻疹病毒(MV)基因片段的方法,以便早期快速地对临床症状不典型的麻疹作出诊断。方法 收集116例疑似麻疹患儿的咽拭子标本,74例尿液标本及110例血清标本,其中73名疑似麻疹患儿同时收集了咽拭子标本与尿液标本,104名疑似麻疹患儿同时收集了咽拭子标本与血清标本。采用套式PCR扩增咽拭子和尿液标本中的MVN基因相关片段,用MV标准株进行空斑形成试验测定其敏感性,通过与常见呼吸道病毒PCR交叉扩增试验测定方法的特异性。用ELISA检测患儿血清中的MV特异性IgM抗体。结果 套式PCR可检测到0.53空斑形成单位(pfu)的病毒。所设计的引物与其他病毒株均无交叉反应。临床疑似麻疹患儿咽拭子和尿液标本中MV检测阳性率分别为60.3％(70/116)和64.9％(48/74);在同时采集到咽拭子和尿液标本的73例患儿中,检测结果一致的有71例(97.3％)。用2种ELISA试剂盒测定麻疹特异性IgM阳性率分别为59.1％(65/110)和55.5％(61/110),检测结果一致的106例(96.4％)。在同时采集到咽拭子和血液标本的104例患儿中麻疹基因检测与抗体检测结果一致的84例(80.8％)。结论 本研究建立的套式PCR检测MVN基因的方法有较好的敏感性和特异性,与血清中MV特异性IgM检测方法相比,基因检测可在临床症状出现后就检测到,并可以单份标本就进行检测,更适合作麻疹早期诊断的实验室检查依据。     

新生儿缺氧缺血性脑病血小板参数的变化及意义

为探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血小板参数的变化及临床意义。对1t2例HIE患儿进行临床分度,于急性期进行血小板参数测定,并于恢复期复查,了解其动态变化情况。并以60例正常足月新生儿作为对照。(l)HIE患儿急性期血小板总数(PLT)较正常儿明显降低(P<0.01),平均血小板体积(MPV)和血小板体积分布宽度(PDW)较正常儿明显增高(P<0.01)。恢复期PLT、MPV、PDW与正常组之间无明显差异(P>0.05)。(2)HIE患儿PLT随HIE病情加重而降低(P<0.01)。而MPV、PDW则随病情加重而增大(P<0.01,P>0.05)。结果提示,动态观察HIE患儿血小板参数,可作为判断HIE病情严重程度的指标。     

女性肾上腺性征异常症

目的 探讨女性假两性畸形的诊断和治疗的时机及方法。方法 回顾性分析近23年来收治的31例患儿的诊疗资料。1～6岁19例，7～14岁12例。性染色体均为46，XX。腕骨骨龄大于实际年龄的18例。出生后均见阴蒂肥大，27例为尿生殖窦单一开口，4例分别见到尿道和阴道口，半数已长出阴毛、声粗、痤疮，最小者2岁，3例14岁患儿身高不足150cm。行B超检查及尿生殖窦造影的病例均有正常女性生殖道。失盐型3例，在新生儿期出现危象而确诊。结果 剖腹探查的9例有正常卵巢及内生殖道。26例作了阴蒂缩短成形或肥大阴蒂切除，小阴唇成形。除1例外，其余30例均在确诊后接受内科药物治疗。结论 典型的女性肾上腺性征异常诊断虽不难，但就诊年龄多较晚，药物治疗滞后，对患儿的生理和心理有严重的负面影响。典型患儿不必作剖腹探查。失盐型患儿多在新生儿期出现危象，应尽早诊疗。     

重型β珠蛋白生成障碍性贫血肝脏病理与相关因素的多重回归分析

目的 研究重型β珠蛋白生成障碍性贫血(简称β地贫)患儿肝脏纤维化和含铁血黄素细胞比例与肝脏MRI信号强度、经MRI测量的股骨头红骨髓面积、血清铁蛋白、AST和ALT、血清胆红素、累积输血量、血清纤维化指标、去铁胺使用情况的关系,找到一个可有效替代肝穿刺结果 ,无创、动态评价重型β地贫患儿铁负荷的新方法 .方法 收集1999年1月-2005年10月在中山大学附属第二医院儿科长期输血追踪观察的65例重型β地贫患儿临床资料,肝脏纤维化和肝脏含铁血黄素细胞比例依中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订制定的标准转换成等级资料,采用多重回归的方法 研究其肝脏纤维化程度和含铁血黄素细胞比例分级与肝脏/肌肉信号比(SIL/M)、经MRI测量的股骨头红骨髓面积、AST、ALT、累积输血量、肝大程度、血清纤维化指标等因素的多重回归关系.结果 肝脏纤维化程度=0.158×红骨髓面积+9.726×10-6×铁蛋白-0.186,准确率70.0%,诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为100%、54.5%、85.7%和100%.肝脏含铁血黄素细胞分级与上述各因素未得出多重回归方程.结论 肝纤维化和其他因素的多重线性回归方程对准确、动态、无创评估铁负荷有一定临床价值.     

童急性白血病合并中枢神经系统真菌感染5例并文献复习

目的 通过5例儿童急性白血病合并中枢神经系统(CNS)真菌感染的临床总结及相关文献复习,提高对本病的认识.方法 回顾性分析北京儿童医院收治的5例急性白血病合并CNS真菌感染患儿的临床特点及诊治经过并文献复习.结果 (1)4例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿均接受强化疗,1例为急性非淋巴细胞白血病(AML-M2)半相合造血干细胞移植术后,发生CNS真菌感染前均有肺部真菌感染病史,其中2例合并肝、脾、肾真菌感染,1例合并下肢皮肤真菌感染(2)实验室检查3例有病原学依据,1例烟曲霉菌,2例念珠菌,2例无病原学依据.(3)影像学5例患儿均作头颅CT MRI,表现脓肿、梗塞、颅内出血.(4)治疗及预后1例患儿伊曲康唑+脂溶性两性霉素B治疗,2例患儿伏立康唑治疗,2例患儿伏立康唑和两性霉素B联合抗真菌治疗,抗真菌治疗均有效,4例存活,1例死于严重移植物抗宿主病(GVHD).结论 儿童急性白血病合并CNS真菌感染为侵袭性真菌感染的表现形式之一,多半有其他脏器感染,临床表现不典型,可有脑膜炎或脑脓肿症状和体征,诊断困难,CT、MRI影像学检查重要,伏立康唑、两性霉素B抗真菌治疗有效.     

惯性载荷对截肢患者残肢/接受腔界面应力的影响研究

接受腔/残肢界面压力分布特征是假肢优化设计的基础,传统的有限元模型只限于静态分析,不符合实际情况。本文以小腿截肢患者为研究对象,建立了三维非线性有限元模型,给出了一个步态周期内残肢界面压力的变化规律,并对惯性载荷的影响进行了定量比较。结果表明:界面压力主要分布在髌韧带、胫骨内外侧和窝区,一个平地正常速度行走的步态周期内,站立相压力变化呈双峰蝶形,惯性载荷引起的平均压力幅值变化为8.4%;而在摆动相压力幅值变化高达20.1%,并且变化规律相反。行走过程中惯性载荷的影响不能忽略。     

CVB3腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果

目的 构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1,观察Ad/MDC-VP1与NA疫苗联合应用的免疫效果.方法 构建、包装重组腺病毒Ad/MDC-VP1并检测目的 蛋白的表达.BALB/c小鼠随机分为Ad/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VPl+Ad/MDC-VP1和PBS 4组,肌肉注射免疫小鼠.用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1 IgG和中和抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率.结果 成功构建并包装了重组腺病毒Ad/MDC-VP1,检测到目的 蛋白的表达.peDNA3/MDC-VP1+Ad/MDC-VP1组血清CVB3 VP1 IsG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤活性和对小鼠的保护率明显高于其他各组(P<0.05),血清病毒滴度低于其他各组(P<0.05).结论 Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答.     

SOX10在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎发病中的作用

目的 探讨SOX10、潘氏细胞发育及分泌防御素-5与先天性巨结肠相关性小肠结肠炎的关系.方法 收集50例先天性巨结肠病变肠管,根据术前是否发生小肠结肠炎分为HAFC组(n=14)和HD组(n=36),并以20例正常结肠标本作对照组.采用免疫组织化学方法观察结肠中防御素-5蛋白质表达、潘氏细胞发育情况以及SOX10蛋白质表达情况.采用实时荧光定量PCR技术检测防御素-5 mRNA及Sox 10 mRNA表达情况.结果 防御素-5在正常肠管中不表达,HAEC组和HD组在肠腺隐窝基底处呈不同程度阳性表达.但前者阳性区域平均光密度值明显增高(0.33±0.039比0.10±0.031,P＜0.05),HAEC组防御素-5mRNA亦呈显著增高趋势(2.72±0.80比0.78±0.21,P＜0.05).对结肠组织同层切片进行潘氏细胞特异性产物溶菌酶免疫组化染色发现,对照组肠管中除1例存在弱阳性外其他均无阳性表达.HD组和HAEC组结肠中同样在隐窝基底处存在溶菌酶阳性细胞,可鉴别为化生的潘氏细胞,但HAEC组在发生率(78.6%)和细胞个数(2.97±0.80)明显高于HD组(27.8%,0.43±0.85)(P＜0.05).SOX10免疫产物主要在结肠神经节细胞膜及胞浆中表达,对照组、HAEC组、HD组阳性区域的平均光密度值递减(0.75±0.041,0.61±0.048,0.35±0.025),差异具有统计学意义(P＜0.05),同时RT-PCR检测显示Sox10 mRNA在各组中的表达与蛋白质水平呈平行结果.结论 SOX10可能通过影响潘氏细胞发育及分泌防御素-5在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎的发生发展中起一定作用.

Abstract：

Objective To study the expression of SOX10 and Human α-defensins-5(HD-5 )in Hirschsprung's disease associated enterocolitis(HAEC) and expore the possible relationship between SOX10 and HAEC.Methods Fifty pathological colons of Hirschsprung's disease (HD) were divided into HAEC group (n = 14) and HD group(n = 36) according to the presence of preoperative enterocolitis,Twenty normal colons as control group.The protein and mRNA expression of HD-5 and SOX 10 were measured by immunohistochemical staining and real-time quantitative PCR Results Normal colons did not express HD-5 but positive expression of HD-5 was detected at the base of the crypts of Lieberkuhn in HAEC and HD groups in different degree.The mean optical density of HD-5 immunohistochemical staining (0.33 ± 0.039 vs 0.10 ± 0.031 )and HD-5 mRNA expression (2.72 ± 0.80 vs 0.78 ± 0.21 ) in HAEC group was apparently higher than those in HD group(P＜0.05).The expression of lysozyme,a specific product by Paneth Cell,on sequential sections was negative in control group except one sample.In HAEC group and HD group,positive expression of lysozyme can be seen in the crypts of Lieberkuhn,where the cells can be identified as Metaplastic Paneth cell,but the incidence (78.6% vs 27.8%) and the number of cells 2.97 ± 0.80 vs 0.43 ± 0.85) in HAEC group were obviously higher than those in HD group(2.97 ± 0.80 vs 0.43 ± 0.85) (P＜0.05).SOX10 was mainly located in the plasmalemma and cytoplasm of ganglion cell and its mean optical density in control group (0.75 ±0.041 ),HAEC group (0.61 ± 0.048)and HD group(0.35 ± 0.025) were decrement,the difference between three groups were statistically significant (P＜0.05).Meanwhile,Sox10mRNA detected by real-time quantitative PCR indicated the parallel result.Conclusions SOX10 may be an important factor in the pathogenesis and development of HAEC.