反义核酸技术及应用

反义核酸技术是用人工合成的或生物合成的特定互补的DNA或RNA片段阻断从基因到蛋白的信息流 ,以达到抑制或阻断基因表达的生物新技术。利用核酸分子杂交原理将反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotide,ASON)作为外源性基因表达抑制物结合到靶mRNA序列上阻止其翻译成蛋白[1 ] 。具有杂交特异性和选择性调节基因的表达的特点[2 ] ,这一技术不仅已成为常用的实验室研究方法 ,还广泛的应用于研究病毒、肿瘤、寄生虫和遗传性疾病的预防和治疗 ,具有重要的应用前景。对于人类基因的研究 ,人们采用分子克隆、分子杂交、PCR技术等一系列研究…     

PTEN基因突变与胃癌临床分期相关性的探讨

目的:分析抑癌基因PTEN突变高发区外显子5(exon5)和外显子8(exon8)在胃癌组织中的突变频率,探讨其突变与胃癌临床分期的相关性。方法:应用聚合酶链反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)方法检测胃癌组织和相应癌旁正常组织中PTEN基因的突变,对突变样本的PCR产物进行测序分析。结果:42例胃癌组织中检测到PTEN基因突变3例,突变率为7.14%(3/42);42例胃癌临床病理分期,Ⅰ、Ⅱ期突变率为5.88%(1/17),Ⅲ、Ⅳ期突变率为8.00%(2/25),二者差异无统计学意义(P〉0.05)。42例相应癌旁正常组织未检测到突变。42例胃癌进行组织学分级,低分化腺癌突变率为12.00%(3/25),中、高分化腺癌突变率为0(0/17),二者差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:胃癌组织中存在PTEN基因突变,主要发生在低分化腺癌中,而PTEN基因突变与胃癌病理组织学分级和临床病理分期之间无明显相关性。     

全肝MR灌注成像早期监测肝VX2肿瘤经皮酒精注射疗效的实验研究

目的研究全肝MR灌注成像（MRPI）早期监视兔肝VX2瘤经皮酒精注射（PEI）疗效的价值。方法新西兰大白兔10只，经开腹手术于肝内注射VX2肿瘤细胞悬液0．1ml，分别在种瘤后第2、3周进行MRT。WI、T2WI检查监视肿瘤生长情况。在种瘤后第3周时，于CT引导下，于肿瘤一侧的早期强化最明显处注射无水乙醇1.0ml，治疗1周后应用MRPI观察治疗效果。灌注参数包括：对比剂到达时间（T0）和最大上升斜率（ss），应用t检验比较治疗区与肿瘤未治疗区的灌注参数。结果10只兔肿瘤均种植成功，第3周时肿瘤直径（2．6±0．6）cm。治疗过程中3只兔死亡，PEI治疗1周后的治疗区呈无或低度强化。肿瘤未治区与治疗区的11D分别为（16．0±1．2）、（50，8±5．9）S，ss分别为38．9±2．2、6．0±1．2，差异均有统计学意义（t值分别为15．8、-39．6，P值均〈0．05）。常规T1 WI、T2 WI无法清晰显示治疗区与未治疗区的差异。结论全肝MRPI可以较敏感的早期监测PEI疗效，早期强化的消失可作为PEI治疗有效的标志。     

恐惧应激对大鼠睾丸中Annexin5表达的影响

目的观察大鼠应激条件下睾丸组织中Annexin5表达的变化。方法建立SD大鼠的恐惧应激模型，分别取急性应激、急性对照、慢性应激、慢性对照SD大鼠睾丸，免疫组织化学和Western blotting分析Annexin5免疫定位和蛋白表达。结果急性应激组与对照组相比，免疫组化显示Annexin5都定位在间质细胞、支持细胞和成熟的精子头部，Western blotting分析发现Annexin5的表达降低了10．8％；慢性应激组与对照组相比，免疫组化结果显示Annexin5在精子头部的定位逐渐减少，应激1w和2w组，未见到Annexin5定位于精子头部，到了应激的3w和4w，发现Annexin5重新定位于精子的头部，而在间质细胞和支持细胞上的定位模式没有显著变化。Western blotting分析发现Annexin5的表达降低了17．4％。结论大鼠睾丸Annexin5参与了应激过程，急性应激条件下Annexin5表达降低。随着应激时间的延长，在慢性应激条件下，Annexin5的表达由减少之后而开始有缓慢增加。     

扩散张量成像和三维脑白质束示踪在多发性硬化中的临床应用

目的 探讨多发性硬化（MS）患者的MS斑块、斑块旁脑白质和T2WI上表现为正常的脑白质区（NAWM）的扩散张量成像（DTI）特点，并探讨DTI和三维脑白质束示踪技术对MS的应用价值。方法 对32例MS患者和32名与MS患者年龄性别配对的正常人进行头部DTI检查，生成表观扩散系数图（ADC）和部分各向异性图（FA），分别选取MS斑块、斑块旁脑白质区、NAWM区和对照组正常人相应脑白质区测量ADC值和FA值，并使用示踪技术做出三维脑白质束图像。结果 MS斑块、斑块旁脑白质区、NAWM区和对照组的ADC平均值分别为（1．233±0．119）、（0．973±0．098）、（0．748±0．089）×10^-3mm^2／s和（0．620±0．094）×10^-3mm^2／s，FA平均值分别为0．225±0．052、0．311±0．050、0．421±0．070和0．476±0．069。对MS斑块、斑块旁脑白质、NAWM数据进行随机区组方差分析最小显著差法检验，差异有统计学意义（P〈0．01）。MS斑块、斑块旁脑白质、NAWM分别和对照组配对t检验，差异有统计学意义（P〈0．01）。用三维脑白质束图像可以观察到MS斑块。结论 使用DTI检查生成的ADC图和FA图可以有助于评价MS中各部位脑白质的改变。通过三维脑白质束示踪图像可以立体直观地显示MS斑块区白质束的异常。     

双环法旋转圆锥状腺体蒂乳房缩吊术

目的改进传统的双环法在乳房缩小术、乳房悬吊术术后外形扁平，凸度不足，上极瘪陷，提升不够等缺点。方法采用双环切口。“扇”形分离、切除皮下部分脂肪，“楔”形切除适量的外上象限腺体，螺旋状旋转剩余腺体成圆锥状，将其固定在第2肋软骨膜上，矫正轻中度乳房肥大和下垂。结果术后随访20例患者1～3个月，乳房上极较丰满，形态好，乳头乳晕功能正常，切口瘢痕轻，乳房肥大和下垂的矫正获得了满意的效果。结论双环切口，螺旋状旋转剩余腺体成圆锥状，并固定于第2肋软骨膜上，可较好地塑形并悬吊乳房，其切口相对隐蔽，术后乳房高凸，上极略饱满，乳头微上翘，乳晕形态合适，是矫正轻中度乳房肥大下垂的一种较理想的术式。     

第一、二鳃弓综合征颜面不对称的整形外科矫治

目的探讨第一、二鳃弓综合征面部不对称畸形的整形外科矫治方法。方法根据第一、二鳃弓综合征患者临床及X线所示面部双侧不对称情况,采用健侧下颌骨外板去除、颧骨截骨降低;患侧下颌体、颧骨应用健侧下颌骨外板贴附植骨或高密度多孔聚乙烯(Medpor)假体置入等术式,配合颏部水平截骨颏成形术,以缩小面部双侧宽度的差异,矫治颜面不对称畸形。结果共矫治23例,经6个月至3年的术后随访观察,双侧面部宽度差异明显缩小,正面观面部不对称明显改善。结论第一、二鳃弓综合征面部骨骼发育畸形是三维方向的,双侧面骨宽度的差异,是造成正面观面部不对称的重要因素,根据受术者的具体情况,采用以上术式的组合,扩充患侧或同时缩窄健侧骨骼,进行面部骨性支架重建,可以取得良好的矫治效果。     

富氧水防治急性高原病的效果观察

目的:观察饮用富氧水防治急性高原病的效果。方法:36名受试者自海拔1400m驻地乘汽车2天到达海拔3700m当日随机分两组,实验组(18人)口服5%葡萄糖注射液制成的富氧水,对照组(18人)口服5%葡萄糖注射液,均每次500mL,一日2次,直至进入海拔5200m某哨卡第6天,共服液8天。以军用卫生标准GJB1098-91"急性高原反应的诊断和处理原则"随访记录受试者进入哨卡第2天、4天、6天急性高原反应症状,然后分度与评分。同时检测血氧饱和度(SaO2)和脉率。结果:进驻哨卡第2天和第4天实验组较对照组急性高原反应分值减少,而SaO2增高(P<0.05或P<0.01),进驻哨卡第2天实验组较对照组脉率降低(P<0.05)。结论:饮用富氧水有防治急性高原病的效果。     

腹腔镜手术治疗卵巢囊肿386例

目的总结腹腔镜下卵巢囊肿手术的经验. 方法回顾分析1999年7月～2004年12月我院386例囊腹腔镜卵巢囊肿手术的临床资料. 结果 384例腹腔镜手术成功,2例因既往有手术史或盆腔粘连中转开腹.术中出血平均20.6 ml(10～60 ml).手术时间平均55 min(20～140 min ).术后住院平均3 d(2～5 d).194例随访1～60个月,平均24个月,盆腔检查和B超均正常. 结论腹腔镜下卵巢囊肿手术安全有效,具有创伤小、术后恢复快、住院时间短等特点.     

3种微创手术治疗复杂性输尿管上段结石的疗效比较

目的比较经尿道输尿管镜钬激光碎石(URSL)联合体外冲击波碎石(ESWL)、微创经皮肾镜取石(mini-PCNL)、后腹腔镜输尿管切开取石术(RLU)治疗复杂性输尿管上段结石的疗效。方法153例复杂性输尿管上段结石患者按治疗方法分为三组:URSL联合ESWL(联合组)治疗60例,mini-PCNL治疗65例,RLU治疗28例。结果联合组有5例转开放手术取石,余50例患者平均手术时间(65.45±16.39)min,术后并发症发生率为23.64%(13/55),1个月后结石清除率为90.91%(50/55)。mini-PCNL组无中转,平均手术时间(50.38±12.91)min,术后并发症发生率为9.23%(6/65),1个月后结石清除率为100%。RLU组有2例转开放取石,平均手术时间(81.73±17.89)min,术后并发症发生率为15.38%(4/26),1个月后结石清除率为100%(26/26)。mini-PCNL组的手术时间、术后住院时间均显著短于联合组和RLU组;并发症发生率明显低于联合组;1个月后结石清除率明显高于联合组。结论mini-PCNL治疗复杂性输尿管上段结石具有手术时间短、结石清除率高、术后并发症少、恢复快的优点。