大鼠MMP-13重组腺病毒载体的构建

目的　构建大鼠MMP1 3重组腺病毒载体。方法　将MMP1 3cDNA目的片段插入腺病毒柯氏质粒中 ,再将此质粒与腺病毒DNA末端蛋白复合物共转染 2 93细胞 ,通过同源重组构建MMP1 3 重组腺病毒载体。结果　MMP1 3 重组腺病毒载体经PCR鉴定正确 ,包装纯化后 ,检测病毒滴度为 4× 1 0 9PFU/ml。结论　成功地构建了RatMMP1 3 重组腺病毒载体 ,为下一步行MMP 1 3转基因治疗低顺应性膀胱的研究提供了条件     

成人成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石的体外生物相容性

目的：研究成人骨髓成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石（carolline hydroxyapatite,CHA)在体外培养条件下的生物相容性。方法：抽取健康成人骨髓组织，置于含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养基中培养，传代后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养，分为CHA复合细胞组和单纯细胞组，不同时间用倒置相关显微镜，HE染色光镜及扫描电镜观察，MTT法进行细胞增殖测定，并进行细胞微量蛋白含量和碱性磷酸酶的定量检测，结果：成人骨髓成骨细胞体外培养时复合或不复合CHA均生长良好，表现出典型成骨细胞的形态特征和生物学特性，CHA利于细胞的贴附，生长与增殖，并对细胞的功能无不良影响，结论：CHA是较理想的骨组织工程支架材料，成骨细胞复合CHA用于骨缺损的修复，具有广阔的临床应用前景。     

某高校护理和预防两个专业大学生核黄素营养状况分析

目的了解大学生核黄素营养状况，并探讨其影响因素。方法对护理、预防专业的学生进行核黄素4h负荷尿试验，用荧光光度法测定核黄素含量。结果护理学专业的学生核黄素不足的占78．79％，正常占10．10％，充裕的占11.31％。预防医学专业的学生核黄素不足的占74．42％，正常的占16．28％，充裕的占9．3％。专业之间差异无显著性意义（P〉0．05）。结论大学生的核黄素营养水平普遍较低，其中动物性食品摄人较少、学生对合理膳食的营养知识缺乏是核黄素摄人不足的主要原因。     

认识生物的运动规律,须有正确的认识途径

要认识生物的变化规律，须有正确的认识途径与着眼点。这着眼点就是着眼于活的生物个体。这认识的深入途径就是向三个方向(方面)深入，且三个方面必须有机结合：(1)“横向”的深入，就是从个体一群体一整个生物界，在这个面上观察研究生物的共性(共有规律)与个性。(2)“竖向”的深入，是研究生物随时间的推移而有的变化，即研究从古生物到现今生物的变化。(3)“纵深向”的研究，是向生物个体内部物质的深入研究，这内部物质的变化，是生物在横向与竖向上发生变化的内部原因，由于横、竖向上的变化不能在纵深向上直接看到，所以须三向有机结合，由此才能全面立体地认识生物的变化规律与本质。     

载瘤动脉闭塞术治疗颅内巨大动脉瘤的探讨

目的总结和探讨脑血管造影和载瘤动脉闭塞在治疗颅内巨大动脉瘤上的作用及特点。方法60例颅内巨大动脉瘤患者,根据其脑血管造影的特点采取血管内介入方法[可脱式球囊和(或)弹簧圈]闭塞载瘤动脉近端53例、闭塞载瘤动脉两端后孤立动脉瘤7例;其中23例闭塞前先行颅内-外血管搭桥术。结果出院时Rankin评分分级:单纯血管内介入治疗组37例中轻残3例,合并颅内-外血管搭桥术组23例中死亡1例、重残2例。1-6年的影像学随访动脉瘤无复发。结论血管内介入结合颅内-外血管搭桥术闭塞载瘤动脉是治疗颅内巨大动脉瘤的方法之一。     

左心室巨大室壁瘤不同左心室成形方法的对比研究

目的研究左心室巨大室壁瘤的左心室成形方法,对改进的左心室心内膜环缩技术和传统的线性缝合技术进行近、远期疗效对比。方法自1992年1月至2004年12月,对148例左心室巨大室壁瘤患者进行手术治疗,按照手术中左心室成形方法不同分为两组,传统术式组:89例,采用传统的线性缝合成形技术;改良术式组:59例,采用改良的心内膜环缩成形技术,旷置梗死的心肌组织,再缝合环缩后的切口。采用多次信访、电话随访和门诊复查相结合的方法对两组患者术后的近、远期疗效进行对比观察。结果手术死亡5例(3.4%),其中传统术式组4例,改良术式组1例(P=0.320)。术后主要并发症为低心排血量和心室颤动。随访134例(93.7%),随访时间51.4±27.0月。远期死亡21例,术后早期心功能Ⅲ级以上是影响远期死亡的危险因素(P=0.000)。改良术式组5年和8年生存率明显优于传统术式组(91.6%vs.76.3%,P=0.040;91.6%vs.61.4%,P=0.000)。两组心功能分级(NYHA)和左心室射血分数(LVEF)术后早期和随访期间较术前改善和升高(P<0.05),改良术式组改善更明显。两组左心室舒张期末内径(LVEDD)术后早期与术前比较明显减小(P=0.000),但随访30个月时有重新增大的趋势(P=0.046)。传统术式组随访30个月时LVEDD扩大比率明显高于改良术式组(38.8%vs.16.7%,P=0.030)。结论左心室巨大室壁瘤的手术近、远期疗效满意,保持适当的左心室形态和容积是手术的关键。心内膜环缩法进行左心室成形是一种简单有效的手段,其远期结果优于线性缝合法。     

Toxicity, inflammation, and anti-human immunodeficiency virus type 1 activity following exposure to chemical moieties of C31G.

C31G, which has potent activity against the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and an established record of safety in animal studies and human trials, is a microbicidal agent comprised of a buffered equimolar mixture of two amphoteric, surface-active agents: an alkyl amine oxide (C14AO) and an alkyl betaine (C16B). Studies of long-term in vitro exposure to C31G and its constituents have suggested that the components of C31G may contribute differentially to its toxicity and efficacy. In the present studies, in vitro assays of cytotoxicity and anti-HIV-1 activity demonstrated that C16B was slightly less cytotoxic compared to either C31G or C14AO, whereas the anti-HIV-1 activities of C31G and its individual constituents were similar. In the murine model of cervicovaginal microbicide toxicity, in vivo exposure to C14AO resulted in severe cervical inflammation followed by a delayed disruption of the columnar epithelium. In contrast, exposure to C16B caused severe cervical epithelial disruption and a secondary, less intense inflammatory response. These results demonstrate that (i) there are both mechanistic and temporal differences in toxicity associated with the components of C31G not necessarily predicted by in vitro assessments of cytotoxicity and (ii) contributions of each component to the anti-HIV-1 activity of C31G appear to be equal. In addition, these findings indicate that direct and indirect mechanisms of in vivo toxicity can be observed as separate but interrelated events. These results provide further insight into the activity of C31G, as well as mechanisms potentially associated with microbicide toxicity.     

RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。     

Onyx液态栓塞剂栓塞颅内动静脉畸形的技术要点解析

自2003年Onyx液态栓塞剂进入中国以来，得到了神经介入医师的广泛关注。尤其在颅内动静脉畸形和硬脑膜动静脉瘘的治疗中发挥了越来越大的作用。但是，各地治疗的病例数差别较大，经验和疗效也有不同；更有一些医师出于对并发症的担忧而拒绝使用；使得Onyx在临床实践应用中仍有很多的争议。笔者作为中国取得Onyx栓塞技术许可证的第一人，近年来致力于在国内外推广Onyx的栓塞技术，现将其技术要点讲述如下。