中药五加皮提取成分抗肿瘤活性作用机理研究

目的 研究五加皮提取成分（Acanthopanax gracilistylus extract,Age）对肿瘤细胞的作用机理。方法 采用[3^H]-TdR掺入法测定肿瘤细胞增殖反应;用流式细胞技术分析Age对肿瘤细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测Age对肿瘤细胞Rb（retinoblastoma）、Cdk（cyclin-dependent kinases）等酶类的影响。结果 体外细胞活力试验证明,Age仅抑制肿瘤细胞增殖,并不导致细胞死亡。在Age的作用下,肿瘤细胞增殖停止在细胞周期的G0／G1期,而未见直接的细胞毒效应。Age可诱导Rb、Cdk2和Cdk4表达降低,使细胞停止增殖。结论 Age对肿瘤细胞的作用机制是通过调节控制细胞周期的酶类而发挥作用的。     

上海市普陀区儿童喘息及哮喘流行病学调查

目的了解上海市普陀区儿童喘息和哮喘的患病状况,以及控制和治疗情况。方法整群随机抽样法抽取在普陀区10所社区卫生服务中心健康体检的婴幼儿和12所幼儿园的学龄前期儿童、3所小学及8所中学的学龄期和青春期儿童;对这些儿童和(或)其父母进行问卷调查。结果共调查11 771名儿童,其中男5 832名,女5 939名。在全体被调查者中,917名(占7.79%)有喘息或哮喘史,男性占9.34%、女性6.26%;喘息或哮喘现患率为4.21%,男性4.94%,女性3.40%,性别差异有统计学意义(P均<0.01)。无论是喘息或哮喘史,还是喘息或哮喘的现患率,均高于2000年上海市调查结果(4.52%,3.34%),差异有统计学意义(χ2=122.5、13.76,P均<0.01)。在>7岁有喘息或哮喘史的儿童中,第一次喘息发作年龄≤3岁者占55.94%。在喘息或哮喘现患儿童中,长期规范吸入糖皮质激素治疗者仅占13.51%。结论上海市普陀区,目前有喘息或哮喘史及喘息或哮喘现患率儿童的比例较2000年增加,儿童第一次喘息发作年龄小,哮喘儿童的长期规范治疗差。     

密度梯度离心法结合贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞

目的 研究密度梯度离心法结合贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)及不同首次换液时间对细胞增殖的影响,探索一种简单易行、扩增效率高的方法。方法 3月龄雄性SD大鼠提取原代BMSCs,密度梯度离心法结合贴壁法分离培养,并应用3组不同首次半量换液时间(24h,48h,72h)进行培养传代,测定生长曲线和细胞的存活率;免疫细胞化学染色分析细胞表面抗原CD44和CD166的表达。结果 分离的BMSCs48h后细胞完全贴壁生长,呈形态均一的纺锤形单核细胞状,第3代细胞培养1w后呈长梭型,呈平行排列生长。48h半量换液组细胞增殖活性及生存率最高,其次为24h和72h组;表面标志物CD44和CD166均呈阳性。结论 联合应用密度梯度离心法及贴壁筛选法可成功分离BMSCs,且效率高、纯度高,48h首次半量换液更适合BMSCs的生长繁殖。     

hUCMSCs与VEGF联合移植对MCAO大鼠微血管密度的影响

目的将体外培养的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)与血管内皮生长因子(VEGF)联合植入脑缺血(MCAO)模型大鼠脑内,观察缺血区血管新生和神经功能缺损修复情况。方法选择75只SD大鼠分为MCAO组、hUCMSCs组、VEGF组和hUCMSCs+VEGF组,观察在缺血前、缺血后7d、14d、28d4个时间点改良神经功能评分(mNSS)变化及7d、14d、28d3个时间点免疫组织化学法检测脑缺血区域微血管密度(MVD)。结果在缺血后7d、14d、28d3个时间点mNSS评分:shamhUCMSCsorVEGF>hUCMSCs+VEGF(P<0.05),hUCMSCs组、VEGF组、hUCMSCs+VEGF组的新生血管密度均高于MCAO组(P<0.05),其中hUCMSCs+VEGF组微血管密度最高(P<0.01)。结论 hUCMSCs联合VEGF移植入MCAO模型大鼠脑内,可促进其缺血区血管新生和神经功能的恢复。     

国产胰岛素放射免疫检测系统的现状与分析

目的调查研究目前国内胰岛素(INS)放射免疫检测系统的现状。方法首先收集门诊及住院患者血清标本140份,选用E170电化学发光免疫分析仪和四种国产INS放射免疫诊断试剂盒(国产a、b、c、d)对上述血清进行检测,根据E170检测的血清INS水平特点,把检测数据分为四组;其次,人工配制低、高浓度INS混合血清2份,分别用国产放免诊断试剂盒重复检测20次并计算批内变异系数(CV%);另外又收集E170检测血清INS≤10μIU/mL血清68份,用国产a试剂盒检测,然后对二者结果进行回归分析,所得回归方程用来校正国产a水平1组INS数据,再将校正后数据与E170数据做配对t检验以及相关性分析。结果 (1)对四种国产放射免疫诊断试剂盒INS检测结果进行方差分析,四个水平组的F值分别是46.7、13.8、9.6、9.2,P值均小于0.001。(2)四种国产试剂低和高浓度混合血清批内CV%均控制在10%以内。(3)与E170检测结果(5.4±2.5)μIU/mL相比,校正后国产a试剂检测水平1组血清INS含量为(5.6±1.6)μIU/mL,二者相比无统计学差异(t=0.49,P0.05),校正前后相关系数r均为0.49。结论国产胰岛素放射免疫检测系统间缺乏可比性和溯源性,需要建立一个完善的INS参考系统来提高检测系统的溯源性,以保证检测结果的准确度。     

贵州布依族、侗族和苗族人群同型半胱氨酸代谢酶相关MS及MSR基因多态性分析

目的 了解贵州世居布依族、侗族、苗族人群甲硫氨酸合成酶基因MS A2756G、甲硫氨酸合成酶还原酶基因MSR A66G位点多态性分布特点,为进一步研究其与疾病的相关性提供依据.方法 应用TaqMan-MGB探针基因分型方法分析贵州布依族、苗族和侗族个体MS A2756G、MSR A66G位点多态性,并与不同人群进行比较.结果 布依族、侗族、苗族MS A2756G突变型G等位基因频率分别为12.0%、8.9%、15.4%,在苗族中偏高,3个民族之间差异无统计学意义,与中国北京汉族、河南汉族、宁夏回族,及欧洲人群分布相似,差异无统计学意义,而与日本人、印度人、非洲人、尼日利亚人之间差异有统计学意义(P<0.05);MSR A66G位点布依族、侗族、苗族突变型G等位基因频率分别为32.3%、30.4%、21.2%,在苗族中偏低,与布依族、侗族之间差异有统计学意义,3个民族MSR A66G等位基因频率分布与中国北京汉族、广东汉族,以及日本人、非洲人、尼日利亚人差异无统计学意义,而与印度人、欧洲人之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 贵州世居3个少数民族中MS A2756G和MSR A66G多态性分布不同,苗族与布依族、侗族之间差异明显,MS A2756G和MSR A66G在不同种族、地域的人群中也存在明显差异.     

大鼠羊水双向电泳样品不同处理方法的比较

目的 比较羊水样品2-d电泳的不同处理方法,以建立相对简单、重复性好、检出效率高的2-d电泳方法.方法 提取孕17天正常大鼠羊水,分别采用三氯乙酸-丙酮沉淀法(方案1)、三氯乙酸-丙酮沉淀法联合白蛋白和IgG去除试剂盒(方案2)gt超滤膜浓缩法联合白蛋白和IgG去除试剂盒(方案3)三种方法处理羊水,之后进行双向电泳分离、胶体染色、软件分析和质谱检测.结果 方案1、2和3分别检测到的蛋白点为253±28、749±32和782±27个,方案1与方案2和方案3比较差异均具有统计学意义(P<0.05);方案2与方案3比较,差异具有统计学意义(P<0.05).方案1、2和3检测的相对分子质量>50000蛋白点分别为57±14,45±13和41±14个,差异无统计学意义;方案1、2和3检测的相对分子质量<50 000蛋白点分别为196±29,702±35,735±29个,方案1与方案2和方案3比较差异均具有统计学意义(P<0.05);方案2与方案3比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 采用超滤膜和去除高丰度蛋白预处理羊水标本可去除高丰度蛋白,提高低丰度蛋白含量,是研究羊水蛋白组的有效方法.     

基于AVR的防褥疮气垫控制器设计

目的针对防褥疮气垫工作模式单一、故障报警措施缺乏、操作界面呆板等不足,本文提出基于 AVR单片机的防褥疮气垫微控制器设计方案.方法该微控制器以 Atmega16为核心,外设电路包括压力传感器、气压检测电路、液晶显示电路、气泵驱动电路等,可根据体重、周期、工作时间参数设置不同,控制气泵使气垫产生幅度、周期、时间可调的波动式翻滚达到防治褥疮的作用.连接气泵对气垫充气测试,设置不同的工作参数,观察并比较测试结果.结果测试结果表明控制器运行稳定,可使气垫产生规律的波动式翻滚,符合防治褥疮的要求.结论基于该微控制器的防褥疮气垫操作界面友好,工作模式多样,并且工作安全可靠,成本低廉.     

低硒大鼠心肌线粒体硫氧还蛋白2的动态表达和心肌的损伤情况

 目的：检测低硒大鼠心肌线粒体中硫氧还蛋白2（thioredoxin 2,Trx2）的蛋白表达水平,观察在体心功能及心肌细胞凋亡情况,分析Trx2与心功能及心肌细胞凋亡指数之间的相关性,探讨Trx2在心肌损伤中的作用。方法：构建低硒大鼠模型,以常硒组为对照,分别于喂养20周、30周和40周时颈动脉插管测其心功能;提取心肌线粒体,Western blotting法检测线粒体中Trx2的表达水平;免疫组织化学技术（SP法）对Fas相关死亡结构域蛋白（FADD）进行原位染色,衡量心肌细胞凋亡情况。结果：（1）各时点对照组大鼠心肌线粒体Trx2的表达无明显差异,低硒组与相应时点的对照组相比Trx2表达均降低,且随低硒喂养时间延长降低更为明显,差异显著（P<0.05）;（2）与对照组相比,低硒组大鼠心脏收缩及舒张功能均降低,以收缩功能指标--左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和左心室内压最大上升速率（maximum rate of left ventricular pressure rise,+dp/dt_max）降低更为明显（P<0.05）;免疫组化染色显示,随着喂养时间的延长,低硒组大鼠心肌细胞凋亡加重;（3）相关性分析显示,Trx2与LVSP和+dp/dt_max呈正相关,与心肌细胞凋亡指数呈负相关（P<0.01）。结论：低硒可通过影响大鼠心肌线粒体中Trx2蛋白的表达,参与心脏功能减退和心肌细胞凋亡;线粒体Trx2对心肌细胞具有保护作用。