苦楝化学成份的研究

从苦楝(Melia azedarach L.)果中分得苦楝新醇(Ⅰ),苦楝醇(Ⅱ)、苦楝酮(Ⅲ)、苦楝二醇(Ⅳ)、香草醛(Ⅴ)和香草酸(Ⅵ)。根据波谱(IR,MS,¹HNMR,¹³CNMR)分析和理化常数测定,确定了它们的结构。其中苦楝新醇(Ⅰ)为新化合物,对菜青小虫有一定的拒食活性。     

多波长系数法的研究与应用

在多组分光度分析的方法中,最小二乘法、Kalman滤波、因子分析等虽已能成功的消除组分间的相互干扰,不经分离直接定量,但均需有微机配套进行矩阵运算。而双波长、三波长法,虽然简单,但对于吸收光谱重叠严重的混合组分,则难以选出满足要求的波长;     

壳聚糖的纳米化及其生物学效应

目的:综合分析壳聚糖纳米微粒的制备方法、研究进展及其生物学效应资料来源:应用计算机检索PUBMED 1998-01/2006-12有关壳聚糖纳米化方面的文献,检索词“Chitosan;nanoparticles”,同时计算机检索超星数字图书库2000-01/2006-12期间的相关文献,检索词为“壳聚糖”。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。选择针对性强的文章。同一领域的选择近期或权威杂志的文章。资料提炼:共收集到259篇相关文献,其中34篇符合纳入标准,排除25篇。符合纳入标准的34篇文献中,26篇涉及壳聚糖纳米粒的制备,8篇涉及纳米化后产生的生物学效应。资料综合:壳聚糖作为一类带正电的多糖,其性质不活泼,不与体液和体内组织产生免疫反应,并具有很好的生物相容性和生物可降解性。目前壳聚糖纳米化主要采用离子交联法、沉淀法、共价交联法、乳化溶剂扩散挥发法、自组装法等方法。纳米化后具有增加药物的吸收作用、增加药物的靶向性和降低药物副作用、增强药物的缓释作用及提高药物稳定性的生物学效应。结论:壳聚糖纳米粒的研究已成为当前生物医学领域的热点。纳米化后的壳聚糖在缓控释给药系统中具有广阔的应用前途,但其溶解性能有待于进一步提高。     

N-乙酰半胱氨酸对脑死亡状态巴马小型猪肾脏结构、功能与核转录因子κB表达的影响

目的：观察核转录因子κB活性抑制剂N-乙酰半胱氨酸对脑死亡状态下巴马小型猪肾脏结构、功能与核转录因子κB mRNA其蛋白表达的影响，以期提高脑死亡供肾的肾移植效果。方法：实验于2003—08／2004—12在河南省实验动物中心及河南省病理学重点实验室完成。①实验分组及方法：将15只巴马小型猪按随机数字表法分为3组（n=5），即脑死亡组、N-乙酰半胱氨酸组及对照组。脑死亡组和N-乙酰半胱氨酸组均应用改进的缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型，脑死亡组不行药物干预；N-乙酰半胱氨酸组分别于初次确认脑死亡后1h，12h给予N-乙酰半胱氨酸。对照组动物麻醉后仅行开颅与开关腹手术。②实验评估：分别于首次判定脑死亡后3，6，12，18和24h检测动物血清中尿素氮、肌酐、白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平。于脑死亡后3，6，12及24h开腹取相同部位肾组织，苏木精-伊红染色后观察肾组织结构变化，应用免疫组化染色观察核转录因子κB蛋白的表达水平，应用反转录-聚合酶链反应法检测核转录因子κB mRNA动态变化。结果：15只猪均进入结果分析。①自首次判定脑死亡后12h开始，脑死亡组和N-乙酰半胱氨酸组尿素氮和肌酐水平逐渐升高（P〈0．05），相同时间点比较N-乙酰半胱氨酸组显著低于脑死亡组（P〈0．05）。②自首次判定脑死亡3h开始，脑死亡组及N-乙酰半胱氨酸组白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α逐渐升高（P〈0．05），相同时间点比较N-乙酰半胱氨酸组显著低于脑死亡组（P〈0．05）。③自脑死亡后3h开始，脑死亡组及N-乙酰半胱氨酸组肾组织NF-κB mRNA其蛋白表达水平逐渐升高（P〈0．05），相同时间点比较N-乙酰半胱氨酸组显著低于脑死亡组（P〈0．05）。④N-乙酰半胱氨酸组和脑死亡组动物脑死亡后12h可见肾脏结构变化，N-乙酰半胱氨酸组变化程度明显轻于脑死亡组。结论：N-乙酰半胱氨酸可能通过抑制核转录因子κB mRNA其蛋白的表达，减少炎症介质的释放，从而保护脑死亡状态下肾脏的功能及结构，提高脑死亡供肾肾移植效果。     

胶体磷酸铬^32P关节腔内注射改善佐剂型关节炎大鼠的相关指标

目的:观察胶体磷酸铬32P关节腔内注射治疗大鼠佐剂型关节炎的效果。方法:实验于2006-07/09在南京市第一医院动物实验室完成。选择6～8周龄清洁级SD雌性大鼠30只,按随机数字表法分为3组,正常对照组、模型组、胶体磷酸铬32P治疗组,每组10只。大鼠左足跖皮内注射完全弗氏佐剂0.1mL免疫法制备佐剂型关节炎模型。胶体磷酸铬32P治疗组于造模后10d左踝关节腔内注射37GBq/L胶体磷酸铬32P0.02mL,即0.74MBq,正常对照组和模型组分别给予等量生理盐水左踝关节腔内注射。①每2周观察1次大鼠左踝关节左右径宽度。②关节炎指数评定采用关节炎评分法(0～4分),分数越高,症状越重。③于用药后2,4,6周采用99Tcm-MDP显像感兴趣区分析法计算大鼠左踝关节区和右胫腓骨的放射性计数比。④于用药后4,6周测定血清肿瘤坏死因子和白细胞介素1β水平。⑤于用药后4,6周观察大鼠滑膜组织和软骨组织病理学改变。结果:纳入大鼠30只,均进入结果分析。①用药后2周模型组大鼠左踝关节左右径宽度大于正常对照组[分别为(7.82±0.36),(5.89±0.35)mm],差异有显著性意义(t=12.16,P<0.001),胶体磷酸铬32P治疗组大鼠左踝关节左右径宽度大于模型组,差异无显著性意义(P>0.05)。用药后6周胶体磷酸铬32P治疗组大鼠左踝关节左右径宽度小于模型组[分别为(6.87±0.27),(7.25±0.26)mm],差异有显著性意义(t=2.87,P<0.05)。②用药后2周和4周胶体磷酸铬32P治疗组大鼠关节炎指数高于模型组,用药后6周胶体磷酸铬32P治疗组大鼠关节炎指数低于模型组,两组间差异均无显著性意义(P>0.05)。③用药后2周模型组大鼠感兴趣区放射性计数比高于正常对照组(分别为2.05±0.20,1.46±0.15),差异有显著性意义(t=7.46,P<0.001)。用药后6周胶体磷酸铬32P治疗组大鼠感兴趣区放射性计数比低于模型组(分别为1.52±0.18,1.78±0.24),差异有显著性意义(t=2.45,P<0.05)。④用药后4,6周模型组大鼠血清肿瘤坏死因子和白细胞介素1β水平高于正常对照组,差异有显著性意义[用药后4周分别为(2.039±0.344),(1.115±0.192)μg/L;(0.305±0.034),(0.192±0.041)μg/L,t=7.42,6.71,P<0.001。用药后6周分别为(1.694±0.305),(1.126±0.256)μg/L;(0.259±0.027),(0.191±0.019)μg/L,t=4.03,5.83,P<0.01,0.001]。用药后4,6周胶体磷酸铬32P治疗组在血清肿瘤坏死因子和白细胞介素1β水平与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。⑤用药后4周胶体磷酸铬32P治疗组和模型组滑膜组织增生和炎症细胞浸润均较明显;用药后6周胶体磷酸铬32P治疗组与正常对照组比较仍有滑膜组织增生和炎症细胞浸润,与模型组比较滑膜组织增生程度明显减轻,而炎症细胞浸润程度稍轻。用药后6周胶体磷酸铬32P治疗组大鼠左踝关节的软骨组织未见有异常改变。结论:胶体磷酸铬32P关节腔注射可减轻完全弗氏佐剂免疫大鼠受注射关节的滑膜增生程度,改善关节肿胀症状,疗效肯定。     

中药癌痛克对人肝癌细胞HepG2增殖、凋亡及Rb基因表达的影响

目的:通过观察不同浓度癌痛克对肝癌细胞株HepG2增殖及凋亡的作用,以及在相应状态下细胞内Rb基因表达量的改变,探讨中药癌痛克抗肝癌的可能作用机制。方法:实验于2005-09/2006-03在广州医学院中心实验室完成。取对数生长期的HepG2细胞,使细胞静止于G0/G1期。随机分为癌痛克2,10,50mg/L组和对照组,癌痛克2,10,50mg/L组分别加入对应浓度癌痛克(购自河南省肿瘤研究所,由金蝎、土元、九香虫、大黄、人参、灵芝、黄芪等纯中药组成的粉状制剂,功能:消癌肿、消癌痛、消积水、升白排毒),对照组不加药物,每组设4个复孔。MTT法检测各组细胞24,48,72h增殖率,细胞增殖率=[(A570癌痛克组-A570对照组)/A570对照组]×100%;以流式细胞术检测各组细胞24,48,72h凋亡率;RT-PCR方法检测各组细胞24,48,72h细胞内Rb基因mRNA表达量。结果:①2～50mg/L癌痛克具有明显的增殖抑制作用,癌痛克2,10,50mg/L组在24,48,72h与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05);3组各时点两两之间比较差异有显著性意义(P<0.05);同组各时点之间比较差异有显著性意义(P<0.05)。②2～50mg/L癌痛克组可诱导HepG2细胞凋亡,相同作用时间癌痛克2,10,50mg/L组与对照组比较差异有显著性意义(P<0.001);同一时点各组比较差异有显著性意义(P<0.05);同组不同作用时间点比较差异有显著性意义(P<0.001)。③2～50mg/L癌痛克可上调Rb基因的表达,各浓度组在各时点与对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.05);24,48,72h癌痛克2,10,50mg/L组之间比较差异无显著性意义(P>0.05);3组各时点比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:中药癌痛克可通过抑制HepG2细胞增殖或诱导其凋亡,而发挥抗肝癌作用;且其诱导细胞凋亡的机制之一可能为通过增加Rb基因的表达而实现。     

中药天年饮对衰老大鼠脾淋巴细胞增殖转化能力的影响

目的:观察中药天年饮对衰老大鼠抗氧化能力、脾淋巴细胞增殖转化能力及免疫器官指数的影响。方法:实验于2006-04/07在承德医学院基础医学研究所完成。选择清洁级4月龄雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为4组:正常对照组、衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组,每组10只。正常对照组大鼠常规饲养,自由摄食、饮水。衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射制备亚急性衰老的大鼠模型。衰老模型组大鼠造模成功后不再做任何处理;天年饮用药组大鼠造模成功后每天用天年饮(由炙何首乌、怀牛膝、肉从蓉、淫羊藿、丹参、茯苓等6味中药组成,经熬制后含生药1.5g/mL,购自承德医学院附属肛肠医院)灌胃(8.1g/kg),共30d;阴性对照组大鼠在造模成功后每天用同等剂量的生理盐水灌胃,时间同天年饮用药组大鼠。造模后30d采用噻唑蓝法检测脾淋巴细胞的增殖转化能力,同时分别检测大鼠血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量以及大鼠的胸腺指数和脾脏指数。结果:纳入动物40只,均进入结果分析。①衰老模型组大鼠血清超氧化物歧化酶活性低于正常对照组、丙二醛含量高于正常对照组,差异有显著性意义[分别为(1.77±0.16),(2.48±0.22)mkat/L,t=2.613,P<0.05;(447.70±31.20),(267.54±40.82)nmol/L,t=11.088,P<0.01];天年饮用药组大鼠血清超氧化物歧化酶活性高于衰老模型组、丙二醛含量低于衰老模型组,差异有显著性意义[分别为(2.33±0.26),(1.77±0.16)mkat/L,t=-2.258,P<0.05;(276.32±23.30),(447.70±31.20)nmol/L,t=13.917,P<0.01]。②衰老模型组大鼠胸腺指数、脾脏指数和脾淋巴细胞的增殖转化能力(A)低于正常对照组,差异有显著性意义(分别为0.0775±0.0309,0.1239±0.0436,t=2.745,P<0.05;0.347±0.099,0.466±0.108,t=2.568,P<0.05;0.388±0.054,0.470±0.063,t=3.125,P<0.01);天年饮用药组大鼠胸腺指数、脾脏指数和脾淋巴细胞的增殖转化能力(A)高于衰老模型组,差异有显著性意义(分别为0.1130±0.0456,0.0775±0.0309,t=2.238,P<0.05;0.451±0.111,0.347±0.099,t=2.211,P<0.05;0.447±0.061,0.388±0.054,t=2.2902,P<0.05)。结论:中药天年饮可提高机体的抗氧化能力及免疫功能,具有延缓衰老的作用。