CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN）能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组（慢性哮喘组）、B组（CpG-ODN干预组）和C组（GpC-ODN对照组）分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组（生理盐水对照组）用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时（d1, d14）和激发阶段（每2周1次）分别给予60μg／mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC）作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液（bronehoalveolar lavage fluid,BALF）作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 （interleukin-4,IL-4）、白介素-13（interleukin-13,IL-13）和γ-干扰素的mRNA（interferon-γ,IFN-γ）表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[（89±10）×10^4／mL]、血清IgE值[（279±53）ng／mL）、IgG1（A值2．151±0．628）、IgG2α（A值0．772±0．245）、BALF中EPS（6．3±1．3）]×10^5／mL）及百分比[（18．1±3．0）％]较D组明显增高（P〈0．01）;且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[（分别为（5．72±3．89）×10^-2、（9．45±5．91）×10^-2和（3．23±1．69）×10^-2）]也明显高于D组（P〈0．05）。用CpG-ODN干预后（B组）,除IgG2α（A值1．186±0．414）和IFNγmRNA表达量[（18．91±9．85）×10^-2]增高外（P〈0．05）,其余指标均低于A组（P〈0．05）。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性（P〉0．05）。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。     

人血小板衍生生长因子BB原核表达及生物学活性鉴定

目的 表达人血小板衍生生长因子(PDGF)BB蛋白并进行生物学活性鉴定.方法 基因扩增方法获得人PDGF-B基因;原核表达PDGF-BB蛋白,并纯化、复性;免疫印迹分析重组蛋白的免疫原性;应用培养的大鼠成骨细胞对其生物学活性进行鉴定.结果 扩增出327bp目的基因,与预期结果吻合,DNA序列分析正确.SDS-PAGE和免疫印记检测表明获得新生蛋白的分子量及免疫原性均与预期符合.体外细胞学鉴定表明,获得的rhPDGF-BB可明显促进大鼠成骨细胞的增殖和DNA复制,表明重组的PDGF-BB具有较好的生物学活性.结论 PDGF-B成熟肽基因克隆成功并成功地在大肠杆菌中实现了高表达.复性后细胞学MTT和FCM鉴定表明获得的rhPDGF-BB具有较好的生物学活性,为生产活性PDGF-BB蛋白及其在促进骨组织和创伤修复方面的进一步功能研究奠定了基础.     

基质金属蛋白酶-3基因多态性与胃癌新辅助化疗疗效的关系

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-3基因多态性与胃癌新辅助化疗疗效的关系及其作用机制。方法 MMP-3基因型检测采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析。结果携带5A/5A基因型的10例胃癌患者均化疗无效,而在有效患者中只有1例携带该基因型,其分布在无效组(9.3%)和有效组(1.4%)中差异有统计学意义(P=0.03)。其OR值有统计学意义(OR=8.24,95%CI=1.03～177,P=0.022)。另外,5A/5A+5A/6A基因型频率在无效组和有效组中分布差异无统计学意义(χ2=2.13,P=0.14)。结论胃癌患者各MMP-3基因型的新辅助化疗的有效率不同,5A/5A基因型的胃癌患者新辅助化疗有效率明显低于5A/6A组和6A/6A组,MMP-3单核苷酸多态性可能对胃癌新辅助化疗患者的筛选有潜在的应用前景。     

注射用奥沙利铂对比奥沙利铂脂质体Beagle犬的解剖病理学评价

目的:比较注射用奥沙利铂和奥沙利铂脂质体对Beagle犬毒性作用的解剖病理学改变,为抗癌药物脂质体制剂的临床前安全性评价提供重要的形态学参考数据。方法:Beagle犬分为阴性对照组、空载体脂质体组、注射用奥沙利铂组、奥沙利铂脂质体低、高剂量组。静脉滴注每2周给药1次,共4次,恢复期1个月。解剖动物进行组织病理学检查。结果:与脂质体、注射用奥沙利铂和奥沙利铂脂质体相关的组织病理学变化分别为多组织器官的泡沫细胞聚集;睾丸生精细胞数量减少,附睾精子减少症和胸腺、脾脏萎缩;肝脏小肉芽肿,胸腺、脾脏萎缩。结论:通过以上同一抗癌药物不同剂型对Beagle犬的解剖病理学评价比较,为抗癌药物脂质体剂型临床前安全性评价提供了重要的形态学参考数据。     

PELA-BSA微球体外释药的灰色数学模型与结果预测

目的：运用灰色数学理论预测长效缓释蛋白微球的体外释药过程。方法：以复乳法制备PELA蛋白微球作为实验对象，根据灰色数学模型，借助计算机编程，预测PELA蛋白微球的体外释药过程。结果：预测值与实测值平均绝对误差E在2.3-4.6之间，平均相对误差在9.2％-14％范围内。结论：灰色数学理论可用于预测长效缓释释药体系体外释药过程。     

丁公藤注射液促进骨质疏松性大鼠骨折愈合的作用机制研究

目的 研究丁公藤注射液(injection erycibe，IE)对骨质疏松性大鼠骨折愈合的促进作用及其作用机制。方法 通过卵巢切除术和骨折术建立骨质疏松性骨折大鼠模型，50只健康SD大鼠(♀)随机分为假手术组、模型组和1，2，4mL·kg^-1 IE组，检测大鼠股骨骨密度、生物力学指标和血清钙、碱性磷酸酶含量，HE染色观察大鼠骨骼病理组织学变化。对分离的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)进行药物干预，分为对照组、5，10，20mg·L^-1 IE组、诱导组(成骨诱导培养基诱导分化)、NC siRNA组、NCK1 siRNA组、IE+NC siRNA组和IE+NCK1 siRNA组，采用MTT检测MSCs增殖，RT-qPCR检测成骨分化相关基因ALP、Runx2和Osterix mRNA水平，Western blotting检测NCK1和p-AKT蛋白表达水平，茜素红染色观察MSCs钙结节数量。结果 与模型组比较，2，4mL·kg^-1 IE组大鼠股骨骨密度、生物力学指标、血清生化指标均明显升高(P<0.05)，且呈剂量依赖性，4mL·kg^-1 IE组效果最佳。与对照组比较，10，20mg·L^-1IE组MSCs增殖和成骨分化相关基因表达量明显升高(P<0.05或P<0.01)，NCK1和p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05)，MSCs内钙结节量明显增加，且呈剂量依赖性，20mg·L^-1 IE组效果最佳。与IE+NC siRNA组比较，IE+NCK1 siRNA组成骨分化相关基因表达量明显降低(P<0.01)，NCK1和p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论 IE通过促进NCK1蛋白表达，激活AKT信号通路，对骨质疏松性大鼠骨折愈合起到一定促进作用。     

SHH/BMP4信号在肛门直肠畸形肠神经系统发育中的作用研究

目的研究不同类型先天性肛门直肠畸形(ARM)胎鼠直肠末端肠神经系统(ENS)发育程度,探讨SHH/BMP4在其发育过程中的作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎,孕20d剖宫取胎,应用免疫组织化学方法检测对照组和高、低位ARM组直肠末端神经元特异性烯醇化酶(NSE)及骨形态发生蛋白4(BMP4)的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组直肠末端SHH/BMP4mRNA的表达差异。结果对照组肠壁肌间及黏膜下神经丛可见NSE和BMP4抗体染色阳性细胞,ARM高位组与ARM低位组、对照组比较,阳性细胞的平均光密度(MOD)值明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);ARM低位组和对照组相比,阳性细胞的MOD值略降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在ARM直肠末端SHH和BMP4基因表达呈正相关(P<0.01,r=0.884),对照组与ARM组相比较,BMP4和SHHmRNA的表达水平明显高于ARM组,差异均有统计学意义(P<0.05),不同ARM组之间比较,高位ARM组的表达水平显著减弱低于低位ARM组,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论①不同类型ARM胎鼠直肠末端ENS发育程度存在差异,不仅与闭锁的位置密切相关,还可能与BMP4基因的表达水平有关。②过量的ATRA可能抑制了SHH/BMP4信号表达,干扰了直肠ENS的正常发育。     

嗅觉味觉功能的临床检测

目的:探讨嗅觉障碍患者嗅觉和味觉功能的改变。方法:284例受试者中,健康人92例,嗅觉功能减退92例,嗅觉功能丧失100例,分别采用T&T、嗅觉事件相关电位(OERPs)及三滴法进行嗅觉和味觉功能检测。结果:T&T结果,嗅觉功能减退和丧失患者跟健康人比较差异有统计学意义(P<0.05)。OERPs结果显示,嗅觉功能障碍患者跟健康人比较N1、P2波潜伏期延长且振幅降低,差异有统计学意义(P<0.05)。三滴法结果显示,嗅觉功能障碍患者跟健康人比较味觉功能有明显减退,差异有统计学意义(P<0.05)。各组之间男女比较差异无统计学意义。结论:嗅觉功能障碍患者同时伴有味觉功能的减退,嗅觉和味觉功能的减退与性别关联不大。嗅觉味觉的联合检查可以全面系统反映受试者的化学感觉功能,为临床诊断和治疗提供科学依据。     

儿童Alport综合征30例肾脏和皮肤Ⅳ胶原分布特点

目的通过分析30例Alport综合征（AS）患儿肾脏和皮肤Ⅳ胶原分布特点,探讨Ⅳ胶原分布与临床表型的关系。方法对30例Alport综合征患儿资料进行总结,并分析。肾组织穿刺和皮肤活检中肾脏和皮肤Ⅳ胶原分布特点,总结不同的Ⅳ型胶原仪链分布方式与临床表型的相关关系：结果30例患儿中29例表现为肾脏和（或）皮肤Ⅳ胶原Ⅸ链分布异常,1例正常。其中24例（占80．0％）为X连锁显性遗传性AS（XDAS）,男20例,女4例;5例（占16．7％）为常染色体隐性遗传性AS（ARAS）。XDAS组患儿1例临床表现为孤立性血尿型（4．2％）,6例为血尿合并蛋白尿型（25．0％）,16例为肾痫综合征型（66．7％）,1例为肾功能不全型（4．1％）;平均尿蛋白定量男1．74g／24h,女0,83g／24h;3例发现高频听力减退均为男性,男性患儿病情明显重于女性。ARAS组患儿5例均表现为血尿合并蛋白尿型;平均尿蛋白定量0．62g／24h;未发现眼耳损害。结论XDAS患儿病情重,病程进展快,不同性别在病情严重程度上行住明显的差异;ARAS患儿病情相对较轻。Alport综合征的Ⅳ型胶原α链分布与临床表型密切相关。肾脏和皮肤Ⅳ胶原免疫荧光检测是目前诊断Alport综合征的有效手段,对判断疾病严重程度和远期预后鄯奄重要意义。     

碘难治性分化型甲状腺癌的最新研究进展

近年来,作为最常见的恶性肿瘤之一,甲状腺癌的发病率曲线明显上升。分化型甲状腺癌经过手术、¹³¹I放疗及促甲状腺激素抑制等治疗后,大多数患者总体预后良好。但仍有少部分患者对放射性碘治疗不敏感且有1个或多个癌基因的突变,则成为病情进展快、死亡率高的碘难治性分化型甲状腺癌。应用上述的传统治疗手段难以取得满意疗效,本文综述了碘难治性分化型甲状腺癌的诊断及治疗进展,为尽早识别及早期进行靶向治疗等争取必要的时间。