Alb-cre/DTR小鼠可诱导性肝损伤模型的建立

[摘要] 目的 建立Alb-cre/DTR双转基因小鼠模型并进行相关表型分析,在此基础上建立可诱导性肝损模型,可用于肝脏疾病的相关研究。方法 将引进的Alb-cre和DTR小鼠扩繁后,通过杂交的方式获得双转基因小鼠。提取小鼠尾部组织DNA,利用PCR方法进行基因型鉴定。在双转基因小鼠上腹腔注射白喉毒素,之后在不同时间点进行称重、采血,检测血清ALT、AST水平。 结果 将Alb-cre和DTR小鼠杂交、筛选后获得了Alb-cre/DTR双转基因小鼠,对该小鼠使用0.625ng/g剂量的白喉毒素,可使小鼠血清中ALT与AST水平显著升高,解剖小鼠后观察到肝脏整体变白,HE染色结果显示肝细胞明显坏死。 结论 Alb-cre和DTR小鼠杂交是繁育Alb-cre/DTR小鼠的较好方法,且PCR方法能够鉴定该小鼠,并能建立特异性肝损小鼠模型。     

不同时期脑梗死磁共振弥散加权成像及液体衰减反转恢复序列的应用价值探讨

目的:探讨弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)序列和液体衰减反转恢复技术(fluid attenuated inversion recovery,FLAIR)在不同时期脑梗死诊断中的应用价值。方法:选取120例不同时期的脑梗死患者作为研究对象,分别行1.5T磁共振DWI和FLAIR序列检查,以双盲法对比分析发现病例的敏感度和病灶面积。结果::DWI、FLAIR发现病例的敏感度:在超急性期内,分别为100%和26.67%(P<0.05);在急性期内,均为100%;在亚急性期内,分别为80%和86.67%(P>0.05);在慢性期内,分别为11.11%和94.44%(P<0.05)。梗塞灶面积显示,在72 h内DWI大于FLAIR(P<0.05),亚急性期间基本相当(P>0.05),慢性期FLAIR大于DWI(P<0.05)。结论:联合应用DWI和FLAIR能准确诊断不同时期脑梗死,并有助对脑梗死进行分期和新旧病灶的鉴别。     

后路360°环形减压椎弓根螺钉内固定治疗胸椎后纵韧带骨化

目的 :探讨后路360°环形减压椎弓根螺钉内固定治疗胸椎后纵韧带骨化临床效果。方法 :2009年12月至2013年11月采用后路360°环形减压椎弓根螺钉内固定治疗胸椎后纵韧带骨化18例,男8例,女10例;年龄32~67岁,平均51岁,术前常规行X线,CT及MR检查,合并黄韧带骨化4例;上胸段5例,中下段胸椎13例;局限型5例,节段型4例,连续型6例,混合型3例;应用后方"揭盖式"椎管减压+硬膜前方后纵韧带切除(或塌陷)的环形减压植骨融合内固定的方法进行治疗。记录手术时间、出血量及并发症等一般情况;采用JOA(11分法)评分评价术前、术后第2天及末次随访的神经系统功能,并计算神经功能改善率;采用Epstein-Schwall的标准评定手术疗效。结果:手术时间3~6 h,平均4.2 h;术中出血量800~4 000 ml,平均1 800 ml。所有患者获得随访,时间6个月~3年,平均1.8年。JOA评分由术前的4.30±2.60提高到术后第2天的7.60±2.40,末次随访的7.80±1.90;末次随访与术后第2天JOA评分差异无统计学意义(t=0.28,P=0.78),与术前差异有统计学意义(t=4.61,P0.001);术后第2天神经功能改善率为74%,末次随访时神经功能改善率为71%。按Epstein-Schwall的标准评定手术疗效:优4例,良10例,改善3例,差1例。4例发生脑脊液漏,肋间神经麻痹或疼痛3例,切口浅表感染1例。3例术后第2天查体神经功能加重,末次随访时2例恢复,1例无变化。所有病例植骨显示融合,未见内固定松动及断裂等。结论:后路360°环形减压椎弓根螺钉内固定可完成不同骨化类型的胸椎后纵韧带骨化的切除,且可取得较为良好的临床效果。     

尿外泌体在肾脏疾病的研究进展

外泌体是细胞主动分泌到微环境中直径为30~100 nm的双层质膜结构的囊泡。随着技术的不断发展,人们发现外泌体可广泛分布于各种体液中,其含有的母细胞来源的蛋白质、核酸等物质不仅能反映来源细胞的生理状态,还可能在生理和疾病状态下的细胞间通讯过程中发挥重要作用。本文主要介绍尿外泌体的生物学特性及其可作为肾脏疾病的新兴生物学标志物、干预治疗目标和靶向治疗载体的潜力,概述目前存在的问题及展望该液体活检的临床应用前景。     

富氢水对γ射线照射Beagle犬淋巴细胞基因表达谱的影响

目的 利用基因芯片技术研究富氢水对γ射线照射后Beagle犬外周血淋巴细胞基因表达的影响.方法 将雄性Beagle犬随机分为对照组、单纯照射组和富氢水组(n=5),采用基因芯片技术对2.0 Gy60Coγ射线照射后6h各组Beagle犬外周血淋巴细胞的差异表达基因进行筛选,利用CGO (gene ontology)和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes andgenomes)数据库对差异表达基因进行生物信息学分析,并应用实时荧光定量PCR技术对基因芯片结果进行验证.结果 单纯照射组筛选出差异表达2倍以上的基因4 730条,富氢水组筛选出差异表达2倍以上的基因4 493条,单纯照射组与富氢水组共同差异表达2倍以上的基因有1 606条;单纯照射组的差异表达基因对应的生物学过程、细胞组分及分子功能分别有10、9、3个功能簇,富氢水组差异表达基因对应的生物学过程、细胞组分及分子功能分别有15、3、4个功能簇.单纯照射组差异表达基因涉及19条生物学通路,富氢水组差异表达基因涉及24条生物学通路,单纯照射组与富氢水组的差异表达基因有5条共同生物学通路.选择2条差异表达基因进行mRNA水平的验证,PCR扩增结果与芯片结果具有良好的一致性.结论 富氢水对γ射线照射后Beagle犬外周血淋巴细胞基因表达的影响,可能涉及多种生物学过程、细胞组分、分子功能的改变及多条信号通路的激活.     

女性不孕症患者血清及宫颈黏液中自身抗体检测对病情的评估价值

目的  分析女性不孕症患者血清及宫颈黏液中自身抗体检测对病情的评估价值。方法  选取2012年7月-2014年7月间至该院接受检查的女性不孕患者138例作为观察组对象。另取同期在该院因宫颈炎症接受检查的已育女性106例作为对照组。比较两组研究对象的血清及宫颈黏液自身抗体水平、外周血调解性T细胞（Treg）水平,进一步分析观察组患者中自身抗体与Treg水平的相关性。结果  ①观察组患者的血清及宫颈黏液中抗精子抗体（AsAb）、抗卵巢抗体（AoAb）、抗人绒毛膜促性腺激素（AhCGAb）、抗子宫内膜抗体（EMAb）、甲状腺自身抗体（ATA）、抗-β-2糖蛋白1抗体（α-β-2GP1）水平高于对照组女性（P <0.05）;②观察组患者的外周血Treg水平低于对照组（P <0.05）;③不孕症女性血清及宫颈黏液中的AsAb、AoAb、AhCGAb、EMAb、ATA、α-β-2GP1等自身抗体水平与外周血Treg水平呈负相关（P <0.05）。结论  女性不孕症患者血清及宫颈黏液中自身抗体水平大幅上升,与患者的疾病发生发展以及病情严重程度均关系密切,是临床诊断及指导治疗的理想指标。

     

经皮肾镜气压弹道碎石术治疗肾结石的疗效

目的探究经皮肾镜气压弹道碎石术治疗肾结石的疗效。方法选取2013年1月至2015年1月河池市人民医院泌尿外科收治的肾结石患者92例,采用随机数字表法将患者分为气压弹道碎石术组和钬激光碎石术组,每组46例。气压弹道碎石术组患者给予经皮肾镜气压弹道碎石术治疗,钬激光碎石术组患者给予经皮肾镜钬激光碎石术治疗。比较两组患者的手术时间、结石的清除效果以及并发症发生情况。结果气压弹道碎石术组患者的手术时间[(96.2±9.5)min]短于钬激光碎石术组[(112.0±12.5)min],结石清除率为97.8%(45/46),高于钬激光碎石术组的84.8%(39/46),两组差异均有统计学意义(P<0.05)。气压弹道碎石术组并发症总发生率为2.2%(1/46),显著低于钬激光碎石术组患者的13.0%(6/46),差异有统计学意义(χ2=8.742,P=0.021)。结论经皮肾镜气压弹道碎石术治疗肾结石的疗效较好,其能有效清除结石,并降低并发症的发生率,值得在临床推广使用。     

成人住院患者尿路感染及经验用药调查

目的：调查某院成人住院患者尿路感染及经验用药情况。方法：调取柳州市人民医院2015年1月-2016年12月住院尿培养阳性的成人尿路感染患者,分析不同年龄、性别及危险因素对尿路感染的影响及细菌耐药及经验用药情况。结果：505例住院尿路感染患者,女性（71.49%）、61~90岁（70.30%）所占比例高,其中77例为反复发作性尿路感染患者。糖尿病、尿路梗阻和留置导尿管患者分别占40.59%、35.05%和30.10%。致病菌以大肠埃希氏菌为主（57.28%）,ESBL （extended-spectrum β-lactamases,超广谱β-内酰胺酶）阳性率达42.57%,环丙沙星耐药率达56.77%;反复发作性尿路感染检出细菌耐药率更高;84例真菌感染,尿路梗阻和留置导尿管都占67.86%。经验用药中以喹诺酮类（51.68%）、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂（28.12%）和头孢类（14.85%）为主;反复发作患者以喹诺酮类（44.16%）、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂（42.86%）为主。结论：我院住院患者尿路感染以G^-菌为主,耐药率高;控制血糖、尽早拔除导尿管以减低尿路感染的危险因素;经验用药基本符合指南要求,但对反复发作的尿路感染患者,经验用药可减少喹诺酮类的使用。     

北京市通州区社区卫生服务机构中成药处方合理性评价标准的探讨

目的：探讨社区卫生服务机构中成药处方合理性评价的具体标准,促进《医院处方点评管理规范（试行）》的贯彻实施。方法：在分析中成药处方点评特殊性的基础上,重点对中成药用药不适宜处方的点评标准及细则进行初步研究。结果：初步提出了中成药适应证不适宜、遴选药物不适宜、重复用药、联合用药不适宜等用药不适宜处方的界定标准,为统一和明确中成药处方合理性评价的标准提供了参考。结论：医院中成药处方合理性评价具体标准需不断完善统一,以进一步提高中成药合理使用水平。     

HPLC-MS/MS法定量研究氧化白藜芦醇对沙奎那韦在大鼠体内药动学的影响

目的:应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术建立大鼠血浆中沙奎那韦的定量测定方法,并用于氧化白藜芦醇对沙奎那韦在大鼠体内药动学研究。方法:液相色谱分离采用C₁₈反相色谱柱(150mm×2.1mm,5.0μm),流动相为乙腈/水(含0.2mmol·L^-1甲酸铵),流速为300μL·min^-1;质谱检测采用电喷雾正离子(ESI^+)模式,多反应监测。血浆样品采用液-液萃取方式提取,检测反应为m/z671.4→570.4(沙奎那韦),m/z721.4→296.2(利托那韦,内标)。将10只SD大鼠分为2组,对照组与实验组分别灌胃给予沙奎那韦(30mg·kg^-1)、沙奎那韦(30mg·kg^-1)+氧化白藜芦醇(40mg·kg^-1),于不同时间取血,测定血药浓度。结果:沙奎那韦在1.0~100.0ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.998 5),日内和日间精密度均小于12.16%,偏差为0.89%~6.24%,回收率为67.85%~82.38%,血浆样品稳定性好。同时服用氧化白藜芦醇时,大鼠体内沙奎那韦达峰浓度C_max、C_max1显著降低,而C_max、T_max、t_1/2、CL/F均无显著差异。结论:HPLC-MS/MS测定方法准确度高、专属性强、灵敏度高、快速高效。沙奎那韦的药时曲线存在双峰现象;氧化白藜芦醇可以显著降低沙奎那韦的达峰浓度,但对口服生物利用度等其他药动学参数没有显著性影响。