IL-18基因转导乳腺癌细胞肿瘤原性的改变及抗瘤作用的研究

目的：建立转人白细胞介素-18（IL-18）基因的乳腺癌细胞株Bcap37细胞,并探讨IL-18基因转导后Bcap37细胞肿瘤原性的改变和抗瘤作用。方法：将携带人IL-18的质粒pcDNA3.1-IL-18转导入人乳腺癌细胞系Bcap37细胞中,通过药物G418进行筛选,采用RT-PCR和ELISA法对IL-18基因的表达进行检测;裸鼠致瘤实验观察肿瘤原性的改变;观察灭活后Bcap37-IL-18细胞的抗瘤作用。结果：IL-18基因成功转导入Bcap37细胞中并能顺利表达;RT-PCR 电泳结果显示IL-18基因在mRNA水平有表达;ELISA结果显示,106个转导细胞在24h内分泌IL-18的含量是(126.3±4.5)pg; 空载体转染的细胞未检测到IL-18;裸鼠致瘤实验表明,接种Bcap37-IL-18细胞的裸鼠肿瘤的生长速度明显低于Bcap37组和Bcap37-pCDNA3.1组;抗瘤实验结果显示,放射灭活的Bcap37-pcDNA3.1细胞和Bcap37-IL-18细胞免疫接种裸鼠后,再接种Bcap37细胞于裸鼠左侧背部皮下。肿瘤长出的时间Bcap37-IL-18细胞免疫接种组比Bcap37 pCDNA3.1细胞免疫接种组明显延长,且肿瘤的体积Bcap37-IL-18细胞免疫接种组比Bcap37-pCDNA3.1细胞免疫接种组小。结论: IL-18基因能成功的整合到Bcap37细胞基因组中,且在转导的肿瘤细胞中持续表达;IL-18基因转染降低了Bcap37细胞的肿瘤原性;IL-18基因修饰的Bcap37细胞具有明显的抗肿瘤作用。     

过表达Notch1对肿瘤细胞增殖的影响

目的通过在肿瘤细胞内过表达Notch1胞内段活性部分,模拟细胞Notch途径的上调,检测细胞增殖状态的变化。方法利用包含Notch1胞内段的逆转录病毒感染实验细胞。通过CBF-1报告载体检测细胞内Notch信号的激活程度,MTS法检测细胞增殖情况,并对细胞的周期分布进行检测。结果Notch1胞内段的表达引起Notch信号在不同细胞中的上调,并引起Hela和HepG2细胞的增殖抑制和BGC-823细胞的增殖加速,而对Chang细胞的增殖没有明显影响。结论Notch信号的上调能引起不同肿瘤细胞增殖状态的变化,对Notch在肿瘤基因治疗中的应用具有重要意义。     

TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变

目的 检测转化生长因子（TGF-β1）能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变（epithelial-mesenchymal transition,EMT）及其相应的信号转导机制.方法 在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞（RLE-6TN）中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad 2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察.结果 加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad 2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失.结论 TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关.     

组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力影响的初步研究

目的初步研究福氏志贺菌组氨酸蛋白激酶EnvZ抑制剂对福氏志贺菌毒力的影响。方法通过构建志贺菌：EnvZ胞内段（SF-EnvZc）蛋白的原核表达质粒,表达并纯化SF-EnvZc蛋白,在SPECS公司的小分子化合物库中模拟筛选出的10个候选EnvZ抑制剂的基础上,通过体外磷酸化的方法筛选出能够有效地抑制SF- EnvZc蛋白磷酸化的小分子化合物（EnvZ抑制剂）,然后采用表面等离子共振（SPR）技术检测EnvZ抑制剂与SF-EnvZc蛋白的结合力,并采用小鼠角结膜志贺菌感染模型检测EnvZ抑制剂对福氏志贺菌株Sf9380毒力的影响。结果在10个候选EnvZ抑制剂中,化合物1、2、3能够有效地抑制SF-EnvZc蛋白的磷酸化,其IC50值分别为（70．17±5．83）、（10．18±0．86）和（37．66±9．64）μmol／L,且上述3个化合物表现出对SF-EnvZc蛋白的高亲和力,其平衡解离常数（Kd）分别为4．08、3．57和2．94μmol／L,其中化合物1和2能够明显抑制福氏志贺菌株Sf9380导致的小鼠角结膜炎症反应（由＋＋＋变为-）,化合物3能够明显降低其炎症反应（由＋降为＋）,化合物1、2、3的最小有效浓度分别为12．5、12．5和100μmol／L结论筛选出3个EnvZ抑制剂,化合物1、2、3能够不同程度地抑制或降低福氏志贺菌导致的小鼠角结膜炎症反应,提示EnvZ抑制剂能够降低福氏志贺菌的毒力。     

急性原发性房角关闭后视网膜神经纤维层的变化

目的探讨急性原发性房角关闭发作后视野正常患者的视网膜神经纤维层（retinal nerve fiber layer, RNFL）厚度的变化。方法31例具有单侧眼单次急性原发性房角关闭发作史而视野正常的患者在发作缓解后3个月采用光学相干断层扫描（optical coherence tomography,OCT）技术检测发作眼、对侧未发作眼的RNFL平均厚度、4个象限和12个钟点的RNFL厚度,30例年龄和性别匹配的健康个体随机选择一眼作为正常对照组。结果急性原发性房角关闭后RNFL平均厚度、下方象限厚度、6点部位厚度较对侧未发作眼、正常对照眼变薄,发作眼在7点部位的RNFL厚度比对照跟薄,差异均具有统计学意义。发作眼RNFL平均厚度与发作持续时间呈负相关。结论急性原发性房角关闭后尽管视野可以正常,但RNFL平均厚度和下方区域厚度变薄。     

上海专科门诊高血压人群治疗和降压达标状况调查

目的调查心血管病专科门诊高血压患者降压达标和用药的状况。方法采用测量血压和问卷调查相结合的方法。结果①2681例高血压病患者中,男1507例,女1174例,平均年龄为(65±12)岁,平均病程为(12±10)年,平均血压为(136.3±13.9)/(82.5±9.8)mmHg(1mmHg=0.133 kPa)。降压达标率为43.2% (1159/2681例)。②降压达标与未达标者的年龄、病史中最高收缩压(SBP)、病史中最高舒张压(DBP)、病程和体重指数(BMI)的差异均有统计学意义(P值均<0.01)。③降压未达标的患者中,单纯SBP升高者占39.6% (602/1522例),单纯DBP升高者占14.9%(227/1522例),SBP和DBP均升高者占45.5%(693/1522例),3者间年龄、病史中最高SBP、病史中最高DBP、病程、BMI、心血管危险因素分层和有无并发症、合并症的差异均有统计学意义(P值均<0.01)。④服用1种降压药物使血压达标者仅占44.8%。未达标的高血压患者中,0.9%未服药,44.6%仅服1种降压药。结论①上海地区心血管专科门诊的降压达标率为43.2%;②年龄大、基础血压高、病程长和BMI高等因素影响了降压达标,单纯SBP升高患者的血压较难控制;③有较大一部分高血压患者降压治疗不足,如能强化治疗、合理用药,完全能够提高降压达标率。     

hTERT mRNA和survivin mRNA在女性尖锐湿疣中的表达及其相互关系

目的:探讨hTERT mRNA和survivin mRNA在尖锐湿疣中的表达及其相互关系。方法:采用原位杂交方法检测80例尖锐湿疣和正常皮肤组织中的hTERT mRNA和survivin mRNA的表达情况。结果:尖锐湿疣中hTERT mRNA阳性表达率(66.25%)明显高于正常皮肤(20%)(P<0.05);survivin mRNA阳性表达率(55%)明显高于正常皮肤(5.0%)(P<0.05);hTERT mRNA和survivin mRNA两者的表达密切相关(P<0.01)。结论:hTERT和Survivin的过表达在CA中起着重要的作用。Survivin可导致端粒酶活化,但端粒酶激活可能不完全依赖于Survivin的调控。     

胰腺癌姑息性治疗方法初探

目的探讨胰腺癌姑息性治疗方法的选择及其对生存期的影响。方法对近3年来54例行姑息性治疗的胰腺癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果行胆肠吻合术 全身化疗(S C)18例,胆肠吻合术 动脉灌注化疗(S A)19例,胆肠吻合术 动脉灌注化疗 放疗(S A R)17例。行S A R组患者生存期显著长于前两组(P<0.05),且疼痛缓解明显。结论姑息性手术 区域动脉灌注化疗 放疗可以延长晚期胰腺癌患者的生存期及改善生存质量。     

泛影葡胺在治疗粘连性不全性小肠梗阻中的应用

目的评价泛影葡胺在治疗粘连性不全性小肠梗阻(APSBO)中的应用。方法对APSBO保守治疗48h无效的患者经胃管注入76%的泛影葡胺100ml,24h内到达结肠的继续保守治疗直至出院,24h未到达结肠的行手术治疗。结果本组72例经48h保守治疗,无效的25例经胃管注入100ml泛影葡胺,22例24h造影剂到达结肠继续保守治疗直至出院,3例24h造影剂未到达结肠行手术治疗,泛影葡胺能使88%(22/25)的患者避免手术。也将APSBO总体手术率从200%降到9.7%(7/72)。结论经胃管注入泛影葡胺是非手术治疗粘连性肠梗阻安全有效的方法,能减少这类病人的手术发生。     

免疫学实验教学改革初探

目的为尽可能使实验教学与临床应用接轨，对医学检验专业免疫学实验教学进行初步改革尝试。方法建立由先抓基础性实验再开设综合性实验，再进行提高性实验，最后选择临床目前较为先进的技术进行实验教学。结果缩小了实验教学与临床应用的距离。结论“三步法”实验教学方法可显著增强医学免疫学的实验教学效果，能帮助学生快速掌握免疫学实验技能，较具有推广应用价值。因此，实验教学改革势在必行。