In vivo and in vitro effects of QHF combined with chemotherapy on hepatocellular carcinoma

Objective： To investigate the synergistic anti-tumor effect of QHF （a Chinese medicine formula with anti- tumor active ingredients, including 800 mg/kg Cinobufotalin, 14 mg/kg Ginsenoside Rg3, 5.5 mg/kg Notoginseng and 100 mg/kg Lentinan） when combined with the chemotherapy drug cisplatin （DDP）. Methods： Hepatocellular carcinoma H22 cells were implanted into mice and after the transplants were successfully established the animals were divided into four groups, namely a normal saline（NS） control group, QHF group, DDP group and QHF＋DDP group. The tumor growth was monitored and the survival time determined. In vitro studies employing H22 cells used the first three groups, and determined the effects of QHF and DDP on tumor cell cycle distribution, apoptosis and morphologic changes in vitro. Results： QHF significantly inhibited the growth of tumors and prolonged the survival time of mice with hepatocellular carcinomas. QHF combined with DDP could attenuate DDP-induced leucopenia, spleen and thymus atrophy and other indicators of toxicity. The inhibition rate of tumor growth reached 82.54% with QHF＋DDP, and QHF prolonged the life span of DDP-treated mice by 66.83%. In the in vitro experiments tumor cells showed morphological changes characteristic of apoptosis by both light and transmission electron microscopy in the QHF group, and the apoptosis rate was 33.85%. Moreover, the proportion of cells in the G0/G1 phase was increased and those in the S-phase decreased. Conclusion： QHF combined with DDP could significantly inhibit tumor growth, induce the apoptosis of tumor cells and effectively attenuate DDP toxicity.     

HPLC法测定酵母菌细胞内维生素B1含量

目的 建立酵母菌细胞内维生素B1的含量测定方法.方法 采用Thermo DBS-C18分析柱(250 mm×4.6mm,5 μm),流动相为水-甲醇(70∶30),流速1.2 mL/min,柱温35℃,检测波长为238nm.结果 维生素B1在浓度1.0 ～ 5.0 μg/mL浓度范围内线性关系良好(y=294 400.5 X-65 837.9,r=0.997 9),方法回收率为88％ ～92％,重现性在RSD =0.8％～1.24％ (n =5).结论 本测定方法准确、可靠,重复性好,可用于测定酵母菌细胞内维生素B1含量.     

siRNA沉默CEACAM1基因对人胶质瘤SHG44细胞生物学行为的作用

目的 探讨CEACAM1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对胶质瘤SHG44细胞增殖、体外迁移和侵袭能力的影响. 方法 设计并化学合成针对CEACAM1的3对siRNA,脂质体法瞬时转染SHG44细胞.Western blot检测转染后细胞中CEACAM1、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达水平变化.CCK-8法检测转染后的细胞增殖情况,流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化.通过Transwell小室迁移和侵袭实验,观察下调CEACAM1对SHG44细胞体外迁移和侵袭能力的影响.结果 三组特异性siRNA转染48 h后,Western blot的结果显示,3个siRNA转染组CEACAM1蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组(P＜0.01),以CEACAM1-siRNA3干扰效果最为明显.后续实验表明,与两个对照组相比较,CEACAM1-siRNA组的细胞增殖减慢,β-catenin和Cyclin D1表达水平明显减少(P＜0.05).Transwell小室迁移和侵袭实验表明CEACAM1下调后的SHG44细胞迁移和侵袭能力较正常对照组及阴性对照组明显降低(P＜0.05). 结论 CEACAM 1-siRNA能有效抑制人胶质瘤SHG44细胞CEACAM1蛋白的表达,并抑制细胞增殖,降低细胞的体外迁移及侵袭能力.     

三种成体干细胞对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症状态的影响

目的比较人羊膜上皮细胞（（human amniotic epithelial cell, H-AEC））、羊膜间充质细胞（human amniotic mesenchymal
cell, HA-MSC）和脐带间充质细胞（Umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSC）分泌的细胞因子对脂多糖刺激巨噬细胞
系RAW264.7炎症状态的影响。方法将LPS刺激的RAW264.7细胞炎症模型作为对照组,比较H-AEC、HA-MSC、UC-MSC和
RAW264.7共培养或条件培养基培养RAW264.7对RAW264.7炎症状态的影响。比较各组RAW264.7细胞的迁移能力;检测各
组细胞分泌一氧化氮（NO）的水平;用实时定量多聚酶链反应（RT-PCR）检测各组细胞经典激活的巨噬细胞（classically
activated macrophage, M1 macrophage）相关的促炎基因如白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死基因а（TNFа）、一氧化氮合成酶-2
（NOS-2）以及M2 macrophage相关的抑炎基因如精氨酸酶（Arg-1）、甘露糖受体基因CD206、B类清道夫受体CD36）表达情况。
结果（1）H-AEC、HA-MSC、UC-MSC 处理后RAW264.7 的迁移率分别为14.7%±4.5%、9.6%±0.7%、13.0%±0.9%,与对照组
（31.1%±11.0%）相比,3 种细胞的条件培养基处理后RAW264.7 的迁移率均降低,差异具有显著性（P<0.05）;（2）H-AEC、
HA-MSC、UC-MSC共培养后RAW264.7 细胞分泌NO的水平分别为24.26±0.72、44.52±2.51、42.25±0.76 μmol/L,与对照组
（45.65±1.78 μmol/L）相比,H-AEC组细胞分泌的NO有显著性下降（P<0.05）;（3）促炎基因与抑炎基因的表达改变：（A）H-AEC
处理组促炎基因IL-1β、TNFа、NOS-2、INFβ的表达下调,与对照组相比有显著差别;HA-MSC、UC-MSC处理组促炎基因INFβ表
达下调显著,其余基因均上调表达;抑炎相关基因如Arg-1、CD206、CD36均上调;（B）3组细胞干预后抑炎症相关基因Arg-1、
CD206、CD36表达均上调,与对照组有显著差异。结论人羊膜上皮细胞、羊膜间充质细胞和脐带间充质细胞可以促进巨噬细
胞向M2型分化,但其效果和机制存在不同。
     

虹膜识别引导的个体化LASIK与传统LASIK治疗近视散光眼术后波前像差的对比研究

目的评价虹膜识别定位下波前像差引导的个体化LASIK治疗近视性散光眼术后波前像差的变化。方法采用随机对照研究,对接受LASIK治疗近视性散光眼的患者97人采用随机表分为两组,Zyoptix组49人(98眼)采用虹膜识别定位下波前像差引导的个体化LASIK治疗,Planoscan组48人(96眼)采用传统LASIK治疗,采集术前和术后6个月患者视力,屈光度和波前像差数据,比较两种手术对术后眼波前像差的影响。结果术前两组的球镜度、柱镜度、瞳孔直径6mm区的总体波前像差均方根值(RMS)、高阶像差RMS、三阶彗差三叶草像差和四阶球差RMS差异均无统计学意义(P>0.05)。术后6个月各观察值与术前比较差异有统计学意义(P<0.01)。术后6个月两组间比较柱镜度,瞳孔直径6mm的总体波前像差、总体高阶像差、三叶草像差和四阶球差的RMS,Zyoptix组均小于Planoscan组差异有统计学意义(P<0.05),两组球镜度、瞳孔直径6mm去四阶球差总体高阶像差和三阶彗差RMS值差异无统计学意义(P>0.05)。结论虹膜识别定位下波前像差引导的个体化LASIK治疗近视性散光眼术后降低波前像差效果要优于传统LASIK手术。     

苏嘉地区生殖健康服务机构服务内容调查

目的 了解生殖健康服务机构的主要服务内容。方法 采用分层抽样法抽取苏州嘉兴地区各级各类生殖健康服务机构85所，对其生殖健康服务人员进行3个工作日的病人流量分析。结果 (1)不同生殖健康服务机构服务内容不尽相同、各有侧重。(2)生殖道感染、孕产妇保健和计划生育服务是生殖健康服务机构的主要服务内容。(3)生殖健康服务机构门诊手术以计划生育手术为主。结论 各级各类生殖健康服务机构均为育龄妇女提供生殖健康服务，但服务内容各有侧重，服务质量不同；寻找安全、有效的避孕手段，进行规范、无菌的宫内手术操作，加强有关疾病诊治培训很有必要。     

小鼠睾丸高表达新基因Biot2-L表达谱分析及对睾丸发育影响的初步研究

目的 分析小鼠可能的生精相关的新基因Biot2-L的组织表达谱,探讨其对睾丸发育的影响.方法 利用生物信息学方法分析Biot2-L基因结构特征,不同物种间同源性情况.用RT-PCR、Real-time RT-PCR技术检测该基因在多种正常组织间的表达与定位,以及在睾丸发育过程中该基因表达的动态变化情况.结果 获得基因全长编码序列,生物信息学分析显示编码Biot2-L蛋白中有一CCDC7结构域,在高等哺乳动物如人、大鼠、牛、猩猩等中发现同源蛋白,氨基酸序列同源性达50%以上,均含有CCDC7或相似结构域.RT-PCR证明Biot2-L基因在成年雄性C57小鼠的睾丸组织中大量表达,而在其他10种组织中不表达或低表达.Real-time RT-PCR检测显示Biot2-L基因在睾丸发育过程中呈有规律的动态变化,出生5周时Biot2-L基因开始表达,于7周时达到高峰,老年期时(50周)表达水平下调,表达规律与睾丸发育和生精过程相符.结论 Biot2-L基因在成熟睾丸中高表达并随着睾丸发育过程,其表达水平呈有规律变化,提示该基因可能与睾丸发育及生精过程相关.     

盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的制备及评价

目的 制备盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂并考察制剂的纤毛毒性和体内药代动力学行为.方法 考察盐酸纳洛酮在不同pH溶液中的稳定性,不同吸收促进剂对盐酸纳洛酮的促渗透效果,筛选出适宜的处方;以离体蟾蜍上颚黏膜表面纤毛的相对运动百分率评价盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的纤毛毒性;考察盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂在大鼠体内的药代动力学行为.结果盐酸纳洛酮溶液在pH3.5~5.5范围内稳定,0.2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)促渗透效果最好;盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂的纤毛毒性小且可恢复;盐酸纳洛酮鼻腔喷雾剂起效快,在大鼠体内的生物利用度与肌肉注射相当.结论 本文制备的鼻腔喷雾剂体外性质稳定可控,纤毛毒性小,起效快,生物利用度高,具有较好的应用前景.     

GFP小鼠对三维体外着床模型的定位及验证

目的 本研究将基于已经建立的三维小鼠体外胚胎着床模型,运用绿色荧光（GFP）小鼠胚胎替代ICR小鼠胚胎,验证三维着床模型的可行性。方法 将孕第4天GFP小鼠及ICR小鼠囊胚与ICR小鼠的内膜组织进行体外共培养。观察两组胚胎黏着率的差异。对GFP小鼠囊胚组通过荧光显微镜进行观察,共培养后进行组织学研究。结果 GFP小鼠囊胚及ICR小鼠囊胚与ICR小鼠子宫内膜组织共培养28h后的胚胎黏着率分别为46.6%及54.8%;两组黏着率之间差异无统计学意义（P=0.364）。GFP小鼠囊胚与ICR小鼠子宫内膜组织共培养28h及40h后均可在荧光显微镜下见到胚胎,组织学研究证实GFP小鼠囊胚可以黏着于ICR小鼠子宫内膜。结论 三维着床模型确实能够实现不同来源小鼠胚胎的黏附着床。运用GFP小鼠胚胎还发现了胚胎与子宫内膜组织之间存在着信息及分子联系。     

术中肠管造瘘胃镜导引切除小儿小肠血管瘤30例分析

目的:探讨小儿小肠血管瘤的诊断,治疗方法。方法:对30例反复的消化道出血患儿剖腹探查,肠管造瘘,胃镜引导,诊断和治疗小儿小肠血管瘤。结果:本组患儿病灶位于空肠15例、回肠10例,广泛血管瘤(空肠、回肠、结肠)5例,29例患儿治愈出院,1例术后消化道再次出血而行手术治疗。结论:小儿小肠血管瘤术前诊断困难,常规肉眼剖腹探查手术,易盲目切除肠管,用肠管造瘘胃镜引导与肉眼观察相结合的方法,疗效满意。