化疗增敏剂影响 P-糖蛋白依赖多药耐药性肿瘤细胞~(99)Tc~m-MIBI 摄取的实验研究(英文)

目的观察化疔增敏剂对多药耐药性(Multi-drug resistance,MDR)肿瘤细胞 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响及伴随~(99)Tc~m-MI-BI 摄取动力学的变化,以建立用~(99)Tc~m-MIBI 来评价化疗增敏剂效果的方法。方法 MDR 人乳腺癌细胞 MCF-7/Adr 37℃培养。(1)实验组和对照组细胞培养基中分别加入化疗增敏剂维拉帕米(10 μmol/L)和等体积培养液 DMEM。~(99)Tc~m-MIBI 与细胞共同孵育2 h 后收集细胞,测定放射性活度和 P-gp 表达水平。(2)维拉帕米(10 μmol/L)加入细胞培养基中,与细胞孵育若干时间后~(99)Tc~m-MIBI 加入细胞培养基中,与细胞一起培养2 h 后收集细胞。测定放射性活度和P-gp 表达水平。结果 (1)维拉帕米作用2h 后,细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 较对照组显著增加(t=2.33,P<0.05),但 P-gp 表达水平差异无显著性(P>0.05)。(2)肿瘤细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 随维拉帕米作用时间的延长而增加,各时间点 UR 差异有显著性(F=58.2,P<0.05),并且,VRP 作用时间在80 min 内时,肿瘤细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 与 P-gp 的表达水平无相关性(r=0.16,P>0.05),VRP 作用时间大于8 h时,肿瘤细胞摄取~(99)Tc~m-MIBI 与 P-gp 的表达水平呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。结论化疗增敏剂能够影响 P-gp 过度表达所致 MDR 肿瘤细胞对~(99)Tc~m-MIBI 的摄取。     

通过改造工程细胞提高重组蛋白类药物产量的研究进展

哺乳动物细胞是表达蛋白类生物产品的理想宿主细胞。但是,表达水平常较低。通过对工程细胞进行改造,如抑制细胞凋亡、对细胞周期进行调控、提高翻译后加工能力、改变细胞新陈代谢的特性、实现基因组热点整合等,可有效地提高重组蛋白类药物的产量,为生物药品的规模化生产奠定基础     

HPLC—MS法同时测定人血浆中普伐他汀及其主要代谢物3’α-异普伐他汀

目的:建立同时测定人血浆中普伐他汀及其主要代谢物3’α-异普伐他汀的HPLC—MS法,并研究普伐他汀钠片在人体内的药代动力学。方法:血浆样品中加入内标霉酚酸,用固相萃取柱进行提取。色谱柱为Discovery C_(18)柱(5μm,150mm×4.6 mm),流动相为甲醇-乙腈-6 mmol·L~(-1)乙酸铵溶液(20:30:50),流速为0.4 mL·min~(-1)。采用HPLC—ESI~--MS法,选择离子检测方式,用于定量分析的检测离子为m/z423.4(普伐他汀和3’α-异普伐他汀)和m/z 319.2(内标)。结果:血浆中内源性物质对样品测定无干扰。普伐他汀和3’α-异普伐他汀的线性范围均为1.25—200 ng·mL~(-1),最低定量浓度均为1.25 ng·mL~(-1),提取回收率均大于80%,日内、日间RSD均小于10%。结论:本法灵敏、准确,适用于普伐他汀及其主要代谢物3’α-异普伐他汀的药代动力学研究。     

中医学发展有赖于对病证关系的再认识

提出就中医学辨证与辨病的关系,应该是方法与结果的关系.辨证必须以辨病为前提,证只有因病的存在才有自己的特殊性可言.而这时的病不能是传统意义上的以症状命名的"病",而必须是具有发展规律、表现出特定症状与相应阶段证候的"新"病.     

压电免疫传感器两种抗体固定方法的比较研究

目的比较压电免疫传感器两种抗体固定方法的优劣,选择压电免疫传感器抗体敏感膜固定的最佳方法. 方法分别采用巯基化方法和蛋白A(SPA)固定法将抗人胰岛素单克隆抗体固定在压电免疫传感器金膜电极表面,比较不同抗体工作浓度、不同浓度标准溶液反应条件下抗体固定量、一致性以及传感器响应能力如频率变化、反应时间、检测线性范围以及反应非特异性等. 结果两种固定方法制备的压电免疫传感器其检测灵敏度、反应时间相当,但巯基化固定方法抗体固定量大、一致性好、检测线性范围较宽、非特异反应低. 结论抗体巯基化法制备的压电免疫传感器具有检测范围宽、非特异反应低等优点,是免疫传感器抗体敏感膜制备的理想方法.     

胸主动脉腔内修复术采用裙边型烟囱支架（Longuette™）的PATENCY临床试验研究结果

背景与目的 烟囱技术是胸主动脉腔内修复术（TEVAR）中重建左锁骨下动脉（LSA）的方法,Ⅰa型内漏是其主要并发症。裙边型烟囱支架（Longuette?）专为烟囱技术设计,用于重建LSA时降低Ⅰa型内漏。为评估Longuette?烟囱支架联合TEVAR治疗累及LSA的Stanford B型主动脉夹层（TBAD）的疗效,笔者开展了前瞻性、多中心临床试验（PATENCY临床试验）。本研究总结PATENCY临床试验的1年结果和经验。方法 2018年10月—2022年3月,全国26家血管外科中心参与PATENCY临床试验,共纳入150例符合标准的TBAD患者。所有患者均在TEVAR术中采用Longuette?烟囱支架重建LSA。评估患者围手术期和术后12个月的临床效果和不良事件,并分析患者术后1年累积生存率、LSA通畅率和无内漏率。结果 患者年龄30~77岁,平均（54.48±11.12）岁,138例（92.0%）患者合并高血压病;急性、亚急性和慢性TBAD分别占74.7%,17.3%和8.0%。124例（82.7%）患者采用全身麻醉。手术成功率为99.33%（149/150）,手术时间（91.67±41.47）min,X线暴露时间（31.36±16.71）min,手术出血量为（71.55±60.40）mL。围手术期内漏发生率为5.33%（8/150）,包括Ⅰ型6例、Ⅱ型1例、Ⅳ型1例;1例（0.67%）患者发生Longuette?烟囱支架急性闭塞,再次实施腔内手术后恢复通畅;1例（0.67%）患者术后发生急性脑梗死;2例（1.33%）患者术后发生逆撕的Stanford A型主动脉夹层,其中1例术后3周死亡。术后30 d死亡2例（1.33%）。142例患者进行了密切随访,随访时间为11.67（5~16）个月。无主动脉支架和Longuette?烟囱支架移位。2例Ⅰ型内漏患者分别于术后6个月和1年进行了再次介入栓塞手术治疗,术后1年随访仍有6例患者有轻微的内漏持续存在,患者TBAD假腔保持稳定,无明显症状,均予以保守治疗。Longuette?烟囱支架内狭窄和闭塞分别发生1例和2例,逆撕的Stanford A型主动脉夹层患者1例,假腔增大,患者均无明显症状,予以保守治疗。无发生脑卒中、截瘫、左上肢缺血等并发症。术后12个月累积生存率、LSA通畅率、无内漏率分别为97.96%、97.96%和91.91%。结论 采用Longuette?烟囱支架在TBAD腔内治疗中重建LSA简便、安全、有效,其能够有效降低围手术期Ⅰa型内漏的发生率,为微创治疗主动脉弓部病变提供新的治疗方式。     

姜黄素通过TGF-β1信号通路抑制人肺泡横纹肌肉瘤细胞株PLA-802的机制研究

目的：观察姜黄素对人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RMS)细胞株PLA-802的抑制作用,以及对细胞内TGF-β1/Smad 4的表达的影响,探索姜黄素抑制RMS细胞生长的机制。方法：体外培养人RMS细胞株PLA-802,并用不同浓度的姜黄素作用不同的时间。用MTT检测姜黄素对PLA-802细胞生长情况的影响,用流式细胞术检测细胞周期的变化情况,RT-PCR和Western blot分别检测细胞内TGF-β1和Smad 4的mRNA和蛋白水平的表达。结果：MTT结果显示姜黄素显著降低了PLA-802细胞的存活率（P<0.05)。流式细胞结果表明姜黄素明显降低了S期而增加了G1期(P<0.05)。而TGF-β1和其下游因子Smad4的mRNA和蛋白水平的表达也明显受到姜黄素的抑制,且这种抑制作用呈浓度-时间依赖性(P<0.05)。结论：姜黄素发挥其抑制PLA-802细胞的作用可能是通过抑制TGF-β1信号通路,这将为临床治疗肺泡RMS提供新的思路。     

Dopamine receptor D2 regulates GLUA1-containing AMPA receptor trafficking and central sensitization through the PI3K signaling pathway in a male rat model of chronic migraine

BackgroundThe pathogenesis of chronic migraine remains unresolved. Recent studies have affirmed the contribution of GLUA1-containing AMPA receptors to chronic migraine. The dopamine D2 receptor, a member of G protein-coupled receptor superfamily, has been proven to have an analgesic effect on pathological headaches. The present work investigated the exact role of the dopamine D2 receptor in chronic migraine and its effect on GLUA1-containing AMPA receptor trafficking.MethodsA chronic migraine model was established by repeated inflammatory soup stimulation. Mechanical, periorbital, and thermal pain thresholds were assessed by the application of von Frey filaments and radiant heat. The mRNA and protein expression levels of the dopamine D2 receptor were analyzed by qRT‒PCR and western blotting. Colocalization of the dopamine D2 receptor and the GLUA1-containing AMPAR was observed by immunofluorescence. A dopamine D2 receptor agonist (quinpirole) and antagonist (sulpiride), a PI3K inhibitor (LY294002), a PI3K pathway agonist (740YP), and a GLUA1-containing AMPAR antagonist (NASPM) were administered to confirm the effects of the dopamine D2 receptor, the PI3K pathway and GULA1 on central sensitization and the GLUA1-containing AMPAR trafficking. Transmission electron microscopy and Golgi-Cox staining were applied to assess the impact of the dopamine D2 receptor and PI3K pathway on synaptic morphology. Fluo-4-AM was used to clarify the role of the dopamine D2 receptor and PI3K signaling on neuronal calcium influx. The Src family kinase (SFK) inhibitor PP2 was used to explore the effect of Src kinase on GLUA1-containing AMPAR trafficking and the PI3K signaling pathway.ResultsInflammatory soup stimulation significantly reduced pain thresholds in rats, accompanied by an increase in PI3K-P110β subunit expression, loss of dopamine receptor D2 expression, and enhanced GLUA1-containing AMPA receptor trafficking in the trigeminal nucleus caudalis (TNC). The dopamine D2 receptor colocalized with the GLUA1-containing AMPA receptor in the TNC; quinpirole, LY294002, and NASPM alleviated pain hypersensitivity and reduced GLUA1-containing AMPA receptor trafficking in chronic migraine rats. Sulpiride aggravated pain hypersensitivity and enhanced GLUA1 trafficking in CM rats. Importantly, the anti-injury and central sensitization-mitigating effects of quinpirole were reversed by 740YP. Both quinpirole and LY294002 inhibited calcium influx to neurons and modulated the synaptic morphology in the TNC. Additional results suggested that DRD2 may regulate PI3K signaling through Src family kinases.ConclusionModulation of GLUA1-containing AMPA receptor trafficking and central sensitization by the dopamine D2 receptor via the PI3K signaling pathway may contribute to the pathogenesis of chronic migraine in rats, and the dopamine D2 receptor could be a valuable candidate for chronic migraine treatment.Supplementary InformationThe online version contains supplementary material available at 10.1186/s10194-022-01469-x.     

四氢生物蝶呤反应性苯丙氨酸羟化酶缺乏症的临床与基因研究

目的 探讨四氢生物蝶呤（tetrahydrobiopterin,BH4）反应性苯丙氨酸羟化酶（phenylalanine hydroxylase,PAH）缺乏症临床表型和基因型的关系。方法 38例高苯丙氨酸血症（hyperphenylalaninemia,HPA）患儿均进行口服BH。负荷试验（20ms／kg）或Phe-BH。联合负荷试验,同时进行尿蝶呤谱分析、红细胞二氢蝶啶还原酶（dihyaropteridine reductase,DHPR）测定。对7例BH4反应性PAH缺乏症患儿采用聚合酶链反应（PCR）和单链构象多态性（single strand conformation polymorphism,SSCP）分析对PAH外显子进行突变筛检,并结合DNA直接测序方法进行突变分析。结果 确诊10例BH4反应性PAH缺乏症患儿,男6例,女4例;平均年龄7．8个月;生化代谢表型均为轻度或中度HPA。7例BH4反应性PAH缺乏症患儿PAH基因型分别为S70del／-、R241C／R243Q、S70del／A389G、Y166X／-、R11lX/-、EX6-96A〉G／R241C和IVS4-1G〉A／R241C。A389G是新发现的突变基因型。结论 BH4反应性PAH缺乏症多表现为轻、中度HPA生化代谢表型,R241C是BH4反应性相关突变基因型中较常见的一种类型。推测S70del可能是一种BH4反应性相关突变类型.     

牛磺酸治疗高血压病的疗效及对血管内皮细胞功能的影响

目的观察牛磺酸对原发性高血压病(EH)病人的疗效及血管内皮活性物质内皮素1(ET-1)、血栓素A2(TXA2)、一氧化氮(NO)和降钙素基因相关肽(CGRP)的影响。方法56例EH病人用牛磺酸治疗2个月,观察用药前后血中ET-1、NO、CGRP和TXA2的变化。结果牛磺酸治疗EH总有效率为71.4%。牛磺酸治疗后血中NO、CGRP浓度均较治疗前显著升高(P<0.01),血中ET、TXA2浓度显著下降(P<0.01)。结论牛磺酸有较好的降压作用,可明显改善EH病人血管内皮功能。