survivin的siRNA靶向干扰膀胱癌的实验研究

目的实验研究靶向转染survivin的小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）对膀胱癌生物学行为的影响。方法设计1对survivin编码基因序列特异的siRNA，用脂质体转染T24膀胱癌细胞株。采用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡；荧光实时定量PCR检测干扰前后survivin的mRNA表达；用survivin的siRNA片段插入空载体后建立重组载体pRNAT-U6、1／Neo-survivin。结果脂质体转染T24细胞后的转染效率为92．3％；survivin编码基因序列特异的siRNA能有效下调survivin基因的表达，呈时间和剂量依赖性，最大效应浓度为100nmol／L，此时survivin表达水平下调了75．91％，并显著地抑制了细胞生长，抑制率达55．29％，差异有统计学意义（P〈0．01）；细胞凋亡率亦增至45．70％，与对照相比差异有统计学意义（P〈0．01）。用限制性内切酶将空载体线性化，T4DNA连接酶将siRNA片段插入空载体中，对该重组表达载体进行鉴定，获得RNA干扰质粒载体pRNAT-U6．1／Neo-survivin。结论siRNA．survivin能显著下调膀胱癌细胞survivin基因表达水平，促进细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖，可能成为膀胱癌基因治疗的新工具。成功构建的靶向survivin基因表达的RNA干扰质粒载体为进一步应用RNA干扰技术进行survivin基因功能研究奠定了基础。     

抗DR5抗体对食管鳞癌的细胞毒作用及机制

目的：探讨抗人DR5功能性单克隆抗体mDRA-6对食管鳞癌EC9706和109细胞的细胞毒作用及其作用机制。方法：利用MTT法检测mAb mDRA-6对食管癌细胞的细胞毒作用;在显微镜下观察食管癌细胞死亡的形态变化;以琼脂糖凝胶电泳检测食管癌细胞中的DNA片段化。利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达、细胞凋亡率和线粒体膜电位;利用caspase抑制剂分析mAb mDRA-6的细胞毒作用机制。结果：mAb mDRA-6对食管鳞癌细胞有显著的细胞毒作用,并呈剂量和时间依赖性,但对食管上皮细胞NEC细胞没有毒性。经mAb mDRA-6处理,食管鳞癌细胞出现典型的细胞凋亡特征：细胞膜皱缩,出泡,染色质浓缩,形成凋亡小体以及DNA片段化等。流式细胞术检测结果显示,食管癌细胞表面表达DR5,而食管上皮细胞NEC细胞不表达;经1.2μg/ml的mAb mDRA-6作用24小时后,大多数食管鳞癌EC9706和109细胞的表面均表达磷脂酰丝氨酸。Caspase 8的抑制剂几乎完全抑制mAb mDRA-6诱导的细胞凋亡,Caspase 9抑制剂的则影响小。此外,在mAb mDRA-6诱导的食管癌细胞凋亡的早期,线粒体膜电位不改变,在凋亡的晚期,线粒体膜电位降低。结论：mAb mDRA-6主要通过死亡受体信号传导途径诱导细胞凋亡,对食管鳞癌细胞产生细胞毒作用,其在以TRAIL/DR5系统进行的肿瘤治疗和探讨DR5功能结构域方面具有广阔的应用前景。     

Prevention of rotavirus infection by oral administration of cow colostrum containing antihumanrotavirus antibody

After immunizing 8-month pregnant Holstein cows with human rotavirus, Wa strain, cow colostrum containing neutralizing antibody to human rotavirus, designated as Rota colostrum, was obtained. After randomly grouping 13 infants from a single orphanage, 6 infants received 20 ml of Rota colostrum every morning and 7 control infants received 20 ml of market milk. One month later, rotavirus associated diarrhea was observed in 6 of the 7 infants given milk and 1 out of the 6 infants given Rota colostrum. Orally administered Rota colostrum significantly protected infants from diarrhea caused by rotavirus (P < 0.05). Two out of 5 Rota colostrum recipients who were free from diarrhea showed rises in complement fixation (CF) antibody titer after the rotavirus infection epidemic. Thus, Rota colostrum prevented the outbreak of diarrhea but did not prevent immunological responses to natural rotavirus infection. In the therapeutic trial Rota colostrum had no effect on duration of diarrhea, bowel movements or virus shedding in stool. However, there were no side-effects of Rota colostrum.     

全膝关节置换后不放置引流的相关管理策略

背景:近年来,随着全膝关节置换技术提升、手术时间缩短、术中及术后止血药的应用,其总失血量不断减少,术后引流量也逐渐减少,术后快速康复理论应运而生,引流管放置也再次成为骨科医生所热议的问题,越来越多的医生认为可以常规取消放置引流,引流似乎已可有可无。目的:旨在复习既往文献,对全膝关节置换后引流放置的相关问题归纳总结,提供围术期引流管理的相关经验。方法:检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库等中文数据库,以及PubMed、The Cochrane Library、WebofScience、EMBASE、OVID等外文数据库,以"引流,膝关节置换术"及"totalknee arthroplasty,drainage"为检索词,检索自建库始至2020年2月为止所有与主题相关的文献,总结归纳全膝关节置换后不放置引流管围术期各方面需综合考虑的要素。结果与结论:①引流管的放置问题关乎全膝关节置换手术的最终结果,与术后出血、血肿、血栓、感染等并发症的发生关系密切;②目前全膝关节置换术后不推荐常规放置引流,但不意味着不需要管理,其实际上对临床医护在围术期各方面的管理提出更高的要求,包括但不限于术前适应证选择、手术操作、止血带使用、术中及术后药物使用、物理疗法的使用等。     

广州市越秀区儿童体格发育及健康影响因素调查分析

目的了解广州市越秀区7岁以下儿童体格发育现状及其健康影响因素,为进一步改善7岁以下儿童生长发育水平提供科学依据。方法根据中国妇幼保健中心2005年全国第四次儿童体格发育调查制定的要求,对越秀区4097名儿童进行体格发育检查及广州市制定的儿童健康影响因素流行病学问卷调查。评价儿童生长发育状况及采用非条件Logistic逐步回归分析的方法对儿童健康影响因素进行多因素分析。结果儿童低体重率、生长发育迟缓率、消瘦率、肥胖率分别为1.98%、1.03%、1.93%、3.69%;男童低体重率、消瘦率、肥胖率与女童无显著性差异（P〉0.05）;0～2岁儿童低体重率、生长发育迟缓率、消瘦率、3～6岁儿童肥胖率随年龄增加呈上升趋势（P〈0.01）;非条件Logistic回归分析发现,出生体重（P=0.001）、母亲文化（P=0.008）、辅食添加（P=0.002）、月收入（P=0.002）、追着喂食（P=0.001）、进食玩玩具（P=0.022）、经常感冒（P=0.045）等7个因素与儿童营养不良发生相关。讨论广州市越秀区儿童营养状况良好,但仍需加强对0～2岁儿童营养不良及3～6岁儿童肥胖抚养人的健康宣教和健康行为形成的早期干预。     

青海土族人群HLA-DRB1等位基因多态性分析

目的：分析青海土族人群HLA-DRB1位点等位基因多态性特点。方法：采用序列特异性引物聚合酶链反应技术,对青海互助地区50名健康无血缘关系的土族个体HLA-DRB1基因座进行分型,并与国内其他地区少数民族人群进行比较。结果：青海土族人群中HLA-DRB基因座共检出16个等位基因,其中DRB1＊04、DRB1＊08、DRB1＊14、DRB1＊15、DRB3＊、DRB4＊基因频率较高；DRB1＊06、DRB1＊07、DRB1＊09、DRB1＊13、DRB1＊16、DRB1＊23基因频率较低。结论：青海土族HLA有独特性。青海土族基因频率与蒙古族有相似之处。     

急诊腹腔镜治疗出血性宫外孕202例临床分析

目的探讨急诊腹腔镜治疗出血性宫外孕的可能性、优越性。方法回顾分析1998年8月~2005年10月急诊腹腔镜出血性宫外孕402例,随机分为腹腔镜组202例,开腹组200例。比较两组手术时间、并发症、术后病率、术后输卵管通畅情况。结果腹腔镜比开腹手术住院时间短、术后恢复快、并发症少、术后病率少。手术时间,腹腔镜组(1998年8月~2001年12月)比开腹手术组长,(2002年1月~2005年10月)短于开腹组,结论腹腔镜手术应用于急腹症出血性宫外孕,当休克早期,在抗休克的同时行腹腔镜手术较安全、有效,病人术后恢复快、不增加并发症,更适应有生育要求患者。     

Synthesis of polyaminoquinones by vinylogous nucleophilic substitution polymerization of 2,5-disubstituted p-benzoquinones with diamines

Vinylogous nucleophilic substitution polymerization of 2,5-dihydroxy-p-benzoquinone and 2,5-dimethoxy-p-benzoquinone with various diamines in m-cresol afforded polyaminoquinones with inherent viscosities as high as 0,5 dl.g^?1 in quantitative yields. The polyaminoquinones, except for the polymer derived from 1,3-bis(aminomethyl)benzene, were partially soluble or practically insoluble in organic solvents, but were solubilized by alkaline hydrosulfite reduction. Thermal analyses showed an initial weight loss at around 200°C in both air and nitrogen atmospheres, followed by gradual decomposition.     

人era的结构特点分析及其定点突变体的构建

目的：构建最近克隆的人era基因的定点突变体。方法：利用数据库对era的结构特点进行分析，在此基础上用改良的重叠延伸法分别构建人EraN端和C端的定点突变体。结果：获得了分别针对人EraN端TGP结合结构域（位于29－36氨基酸残基）和C端具有RNA结合活性的 KH结构域（位于297－340氨基酸残基）的定点突变体。结论:人era定点突变体的构建为进一步的功能研究奠定了基础。