脑磁图在癫痫灶定位中的应用

目的：应用脑磁图（MEG）对癫痫灶进行定位，探讨脑磁图对癫痫灶定位的价值。方法：应用美国4D Vectorview306通道全头型生物磁仪，对21例癫痫患（其中男13例，女8例，年龄3－52岁，平均23．7岁）进行发作间期脑磁图检查。结果：17例测得发作间期棘波，4例未检测到棘波，结论：脑磁图对癫痫灶定位有很高的应用价值。     

Effects of the degree of deacetylation on the physicochemical properties and Schwann cell affinity of chitosan films

Chitosan is a potential material for the preparation of nerve repair conduits. In order to find a better chitosan for the application in peripheral nerve regeneration, the effects of the degree of deacetylation (DD) on the physicochemical properties and Schwann cell affinity of chitosan films have been evaluated. Six kinds of chitosan samples with similar molecular weight, but various DD in a range from 70.1 to 95.6% were prepared from one stock chitosan material and fabricated into films. X-ray diffraction analysis showed that there were more crystalline regions in the higher DD chitosan films. Swelling and mechanical property measurements revealed that the swelling index of chitosan films decreased and their elastic modulus and tensile strength increased with the increase in DD. The adsorption amount of fibronectin and laminin on chitosan films was measured by means of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Culture of adult rat Schwann cells on the films showed that the chitosan films with higher DD provided better substrata for Schwann cell spreading and proliferation. In conclusion, DD of chitosan plays an important role in their physicochemical properties and affinity with Schwann cells. The results suggest that chitosan with a DD higher than 90% is considered as a promising material for application in peripheral nerve regeneration.     

Histamine and IL-6 interaction in the stimulation of nerve growth factor secretion from cultured astrocytes

Inflammation Research - .     

重组Rab8截短体蛋白的原核表达、纯化和抗体制备

目的 获得Rab8纯化蛋白,制备多克隆抗体,为深入研究Rab8在病毒感染宿主细胞过程中的作用奠定基础.方法 首先从HepG2细胞中克隆Rab基因,然后从Rab8质粒中亚克隆Rab8 C端编码122个氨基酸的基因片段,构建Rab8与6His的融合蛋白原核表达质粒.原核表达与蛋白纯化后,免疫动物,制备Rab8多克隆抗体.采用ELISA法检测其效价.Western检验抗体特异性,间接免疫荧光染色法验证其免疫组化特性.结果 克隆了人Rab8编码基因,构建了表达Rab8 C端编码122个氨基酸的原核表达质粒pQE31-Rab8-122,经过大肠杆菌表达、镍亲和层析柱纯化,获得相对分子量约15 000的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠后收获抗血清.ELISA显示抗体效价达1/20 000.Western blot和免疫荧光染色结果显示此多克隆抗体能够与原核表达的Rab8蛋白发生特异性反应,并能够识别HepG2细胞中内源性Rab8蛋白.结论 本研究获得原核表达的Rab8纯化蛋白,成功的制备了Rab8多克隆抗体,为进一步研究Rab8参与病毒感染宿主细胞提供了重要的实验材料.     

微小RNA-23b-3p通过靶向TGFBR3促进人心房肌成纤维细胞纤维化相关基因表达

目的:探究微小RNA-23b-3p(mi R-23b-3p)对人心房肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用及其可能作用靶基因。方法:分离并体外培养房颤患者心耳中原代心房肌成纤维细胞,并用细胞免疫荧光染色实验鉴定;双萤光素酶报告基因实验检测mi R-23b-3p与潜在靶基因转化生长因子β受体3(TGFBR3) 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用; CCK-8、Ed U染色及Transwell实验检测细胞活力、增殖及迁移能力,RT-qPCR和Western blot法检测TGFBR3及纤维化相关基因的m RNA和蛋白表达。结果:在人心房肌成纤维细胞中过表达mi R-23b-3p不影响细胞的活力、增殖及迁移能力,但可显著增强细胞中纤维化相关基因COL1A1、COL3A1和ACTA2的表达(P 0. 05或P 0. 01)。双萤光素酶报告基因实验显示mi R-23b-3p与TGFBR3 3'-UTR有结合作用。RT-qPCR和Western blot结果证实mi R-23b-3p可在转录水平抑制TGFBR3表达。过表达mi R-23b-3p和沉默TGFBR3均能显著促进人心房肌成纤维细胞中Smad3激活和纤维化相关基因表达(P 0. 05或P 0. 01)。结论:TGFBR3是mi R-23b-3p的作用靶基因,并介导mi R-23b-3p促进心房肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达。     

职业过劳测验的编制

目的:编制职业过劳测验.方法:将职业过劳测验、艾森克人格问卷简式量表中国版、明尼苏达工作满意度问卷-短式修订版、一般自我效能感量表对162名销售人员进行测量.结果:职业过劳测验包含精疲力竭和焦虑两个因素,它们与人格、工作满意度、自我效能感和销售业绩排名之间存在复杂的关系.结论:职业过劳测验信度、效度较好,适用于实际测量.     

VEGF真核表达载体的构建及在内皮与心肌细胞内的表达

目的：探讨外源性人VEGF165基因在内皮细胞与心肌细胞内表达的可行性。方法：构建了(vaseular endothelium growth factor,VEGF)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)基因其表达载体pIRES2—FGFP—VEGF165，以脂质体法转染内皮细胞和心肌细胞，采用荧光显做镜检测内皮细胞与心肌细胞中EGFP的表达，同时利用免疫组织化学方法检测VEGF的表达。结果：成功地构建了真核表达载体pIRES2—EGFP—hVEGF165，采用脂质体法转染内皮细胞与心肌细胞后，经荧光显微镜观察，可见细胞内有EGFP的表达，同时经免疫组化证实有VEGF的表达。结论：采用脂质体法可以成功地将外源性VEGF165基因转染到内皮细胞与心肌细胞中，并进行表达。本研究为今后利用VEGF基因治疗心肌缺血等疾病提供了实验基础。     

路氏乳杆菌JCM1081黏附相关蛋白的初步鉴定

目的研究路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri,也称罗伊氏乳杆菌)JCM1081菌体表面蛋白对其黏附HT-29细胞的影响。方法将路氏乳杆菌JCM1081菌体进行胰蛋白酶、蛋白酶K处理;用氯化锂和盐酸胍对乳杆菌表面的蛋白进行抽提,进行SDS-PAGE后与黏蛋白受体进行Western blot,并对杂交阳性蛋白进行质谱分析鉴定。结果路氏乳杆菌JCM1081菌体经胰蛋白酶、蛋白酶K处理后,其对HT-29细胞的黏附力显著下降(P<0．01);用氯化锂去除路氏乳杆菌JCM1081菌体外表面的S层蛋白后,路氏乳杆菌JCM1081对HT-29细胞的黏附力无显著变化;Western blot结果显示相对分子质量(Mr)为29×103和14×103的两种菌体表面蛋白与黏蛋白受体杂交中出现了强阳性;质谱分析结果显示29×103蛋白与路氏乳杆菌ATCC55730的h0793蛋白相似性高达71．1％。结论路氏乳杆菌JCM1081菌体表面的蛋白参与了乳杆菌的黏附,其中29×103和14×103的两种胞壁表面蛋白能够特异地识别黏蛋白受体并与之结合,29×103蛋白属ABC转运蛋白家族。     

多层螺旋CT三维成像行国人气道径线分析

目的探讨国人气管和主支气管各种解剖径线的长度与角度.方法用多层螺旋CT三维成像法测定300例成年健康体检者锁骨胸骨端水平气管内径、锁骨胸骨端水平到隆突的气管长度,左、右主支气管和右中间支气管内径与长度,以及左、右主支气管长轴与矢状面的夹角.结果男性气管、左、右主支气管、右中间支气管内径与长度,以及右上肺叶支气管开口内径均大于女性,而女性左、右主支气管长轴与矢状面夹角均大于男性(p<0.05或0.01).成年人与老年人上述各解剖径线值差异无显著(p>0.05).左主支气管内径值与右主支气管内径值呈高度相关,且分别与气管内径值和身高呈高度相关(p<0.01).结论通过多层螺旋CT三维成像法测定国人气管、左和右主支气管径线值,获左、右主支气管内径值与患者身高和气管内径测量值的回归方程,可预测其左、右主支气管内径值.