人急性早幼粒细胞性白血病细胞诱导分化生成树突状细胞的体外研究

树突状细胞(dendritic cells,DC)在激发机体抗白血病T细胞免疫应答中具有重要作用,有报道DC可以由单核细胞及粒细胞分化生成,本研究应用细胞因子在体外诱导了急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞向DC的分化.从M3型APL患者外周血分离白血病细胞,加入GM-CSF(100ng/ml)或GM-CSF(100ng/ml) rhIL-4(500U/ml)体外培养14天,并于培养结束前3天加人TN-α(100ng/ml).结果表明,GM-CSF可以促进白血病细胞体外增殖,并从幼稚状态逐渐分化成熟,表达高水平的CD45分子,其中部分为CD14~ 的单核细胞,部分为CDla~ 的DC(M3DC);培养后期加入TNF-α,可以促进DC生成,约占35%;以GM-CSF IL-4培养也诱导了幼稚细胞的成熟,2周后DC约占10%,但较少单核细胞生成,培养至3周时DC约占60%;而在培养后第11天加入TNF-α则可以加速DC生成,3天后生成的白血病型DC达90%.电镜观察到M3DC具有与单核细胞来源的DC相似的超微结构,但具有的突出特征是部分细胞存在少量胞浆颗粒;M3DC高表达HLA-DR、B7-2、CD40、CD54分子,体外可以强烈刺激同种T细胞增殖.此类由白血病细胞诱导生成的DC可被用于体内外诱导生成肿瘤特异性CTL,在APL的免疫治疗中具有一定的应用价值.     

维甲类化合物Ro13-7410对HL-60细胞的作用

目的：探讨合成的第三代维甲类化合物（Ｅ）４［２５，６，７，８ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏ５，５，８，８ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ２ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｙｌ１ｐｒｏｐｅｎｙｌ］ｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ（Ｒｏｌ３７４１０）对白血病细胞ＨＬ６０的影响。方法：采用ＮＢＴ还原能力测定检测细胞分化，电镜和程序性细胞死亡检测试剂盒（ＰＣＤａｓａｙｋｉｔ）鉴别凋亡细胞，Ｆｕｒａ２／ＡＭ荧光法测定胞浆内Ｃａ２＋浓度，ＰＣＲＥＬＩＳＡ试剂盒检测端粒酶活性，流式细胞术测定细胞周期分布。结果：Ｒｏｌ３７４１０诱导ＨＬ６０细胞分化的同时伴随细胞凋亡的发生。在ＨＬ６０细胞凋亡和分化的过程中胞浆内Ｃａ２＋浓度增高，端粒酶活性明显受抑，多数细胞被阻止在Ｇ２／Ｍ期。结论：Ｒｏｌ３７４１０可诱导ＨＬ６０细胞凋亡和分化的同时发生。胞浆内Ｃａ２＋浓度的增高，端粒酶活性的降低以及细胞周期的阻止与细胞凋亡和分化的诱导有关     

鲜蛋的品质安全与控制

本文作者根据我国鲜蛋生产的实际,提出鲜蛋品质安全控制措施防止食源性疾病发生,以确保鲜蛋的食品卫生与安全。     

加权平均组合评价法及其应用

目的针对现有的组合评价方法的不足,提出一种改进的组合评价方法--加权平均组合评价法.方法通过实例介绍加权平均组合评价法的具体步骤,并比较该法与传统的四种组合评价方法的评价效果.结果加权平均组合评价法保距效果更佳.结论加权平均组合评价法有应用推广的价值.     

VEGF、MMP-2、MMP-9在卵巢原发性与转移性癌中表达的研究

目的 :探讨VEGF、MMP 2、MMP 9在卵巢原发上皮癌、库肯勃氏瘤中的表达差异及临床病理意义。方法 :采用免疫组化S P染色技术对 83例卵巢癌 (卵巢原发癌 4 5例、库肯勃氏瘤 38例 )进行分析 ,观察VEGF、MMP 2、MMP 9在卵巢癌中的表达。结果 :VEGF在卵巢原发癌和库肯勃氏瘤组织中的表达显著高于正常卵巢组织 (P <0 .0 5 ) ;MMP 2、MMP 9在正常卵巢组织中表达缺如 ;VEGF、MMP 2、MMP 9在卵巢原发癌与库肯勃氏瘤中表达均有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;VEGF、MMP 2、MMP 9在库肯勃氏瘤中及卵巢原发癌中 ,任意两指标阳性表达均有正相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF、MMP 2、MMP 9在库肯勃氏瘤的形成机制中起重要作用 ,与肿瘤的浸润转移密切相关 ,并可为鉴别卵巢原发癌与库肯勃氏瘤提供一定的依据     

盐酸二甲双胍缓释片体外释放度研究

目的对盐酸二甲双胍缓释片体外释放度相关因素进行研究。方法对溶出介质、转速、测定波长及辅料等因素进行考察,确定盐酸二甲双胍缓释片体外释放度的测定方法,对测定方法进行回收试验,并对三批样品及参比制剂进行测定。结果采用转篮法,以1000ml水为溶出介质,转速为100rpm/min,采用UV法,测定波长为233nm,将溶出液稀释至1～12.5μg/ml进行测定。结论本释放度方法简单,快速,可用于盐酸二甲双胍缓释片体外释放度测定。     

重组结核分枝杆菌特异性分泌抗原融合蛋白的活性鉴定及初步应用

目的：融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白CFP10-ESAT-6或ESAT-6-CFP10，研究其免疫学特性，为结核病的血清学诊断提供物质基础。方法：将一个柔性的氨基酸“接头”插入原核表达载体pET32c（＋）中，构建pET32c（＋）-linker。PCR法扩增CFP10、ESAT-6基因。将CFP10克隆入改建的载体pET32e（＋）的linker前，ESAT-6克隆入linker后，构建CFP10-ESAT-6融合基因；或将ESAT-6克隆入改建的载体pET32c（＋）的linker前，CFP10克隆入linker后，构建ESAT-6-CFP10融合基因，分别转化大肠杆菌XL1-blue，抽提质粒，酶切鉴定；在大肠杆菌B121中表达，通过Western blot分析其抗原性。结果：两个目的基因分别被按顺序成功克隆入载体pET32c（＋）的linker前或后。重组质粒pET32c（＋）-CFP10-ESAT-6或pET32c（＋）-ESAT-6-CFP10靶基因的测序结果与预计序列完全一致。融合蛋白在B121菌中高效表达。Western blot分析表明，融合蛋白与活动性肺结核患者血清能发生特异性免疫反应。结论：成功地构建了多抗原基因DNA质粒；pET32e（＋）-CFP10-ESAT-6或pET32c（＋）-ESAT-6-CFP10质粒在B121菌中能高效表达rCFP10-ESAT-6或rESAT-6-CFP10融合蛋白，该蛋白兼具CFP10和ESAT-6两种蛋白的抗原性。本研究为rCFP10-ESAT-6或rESAT-6-CFP10融合蛋白在结核病血清学诊断中应用奠定了基础。     

传代培养角膜细胞的染色体遗传变异率分析

目的 分析传代培养角膜细胞染色体数目的变异率.方法 选择人角膜上皮细胞(HCE)、牛角膜内皮细胞(BCE)和兔角膜上皮细胞(RCE)细胞,采用直接法制备传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,1 000倍光学显微镜下计数分裂相染色体数目,进行核型分析,统计染色体数目变异情况.结果 HCE染色体众数为56 ～ 65,为超二倍体;BCE染色体众数为27 ～ 34,为亚二倍体;RCE染色体众数为74 ～ 88,为超二倍体.与起源细胞相比,以上3种传代细胞染色体数目均发生了改变.结论 该项核型分析为HCE、BCE和RCE 的功能研究提供了重要的参考信息.     

红外光谱与计算机对比软件对不同生地黄的快速鉴别

目的:对野生和栽培生地黄及不同贮藏年限的生地黄(2000、2002年采收)以及"道地(河南)和非道地(其他省份)"生地黄药材进行快速鉴别研究.方法:利用傅里叶红外光谱技术(FT-IR)结合对比软件,并借助计算机运用归一化图谱辅助处理技术.结果:野生和栽培生地黄红外吸收光谱有明显的差异;对不同贮藏年限生地黄的识别率为100%;"道地和非道地"生地黄既有整体差异,又有个体交叉,识别率高于90%.结论:该方法具有快速、准确等特点.     

Favorable prognosis for patients 12 to 18 months of age with stage 4 nonamplified MYCN neuroblastoma: a Children's Cancer Group Study.

PURPOSE: The long-term survival of children between age 12 and 24 months with stage 4 neuroblastoma and nonamplified MYCN (MYCN-NA) has not been defined previously. PATIENTS AND METHODS: Survival for stage 4 MYCN-NA neuroblastoma patients enrolled onto Children's Cancer Group (CCG) protocols 321P2 (1986 to 1991) and 3891 (1991 to 1996) was analyzed. Treatment consisted of intensive alkylator-based induction chemotherapy with or without autologous bone marrow transplantation (ABMT) with or without 13 cis-retinoic acid. Survival was analyzed by age strata less than 12, 12 to 18, 18 to 24, and more than 24 months at diagnosis. Patients younger than 12 months were treated on the moderate-intensity CCG protocol 3881. RESULTS: Forty-three patients with stage 4 MYCN-NA disease enrolled onto CCG-321P2 (n = 17) or CCG-3891 (n = 26) were between 12 and 24 months of age at diagnosis. After a median follow-up of 94 months (range, 4 to 140 months), the 6-year event-free survival (EFS) for the 12- to 18-month age group was superior to that of the 18- to 24-month age group (74% +/- 8% v 31% +/- 12%; P = .008). The EFS for children older than 24 months with stage 4 MYCN-NA neuroblastoma was 23% +/- 3%, and for children younger than 12 months was 92% +/- 3%. CONCLUSION: Children diagnosed with stage 4 MYCN-NA neuroblastoma in the second year of life form a transitional group between infants and older children in terms of prognosis. Patients between 12 and 18 months of age have significantly better long-term survival than that of older children treated with intensive chemotherapy with or without ABMT. These patients may not benefit from additional intensification of therapy beyond that provided in earlier clinical trials and may even maintain this high survival rate with less intensive therapy.