saRNA在转录水平激活人膀胱癌细胞p21WAF1/CIP1的表达研究

目的 探讨小激活RNA-dsP21-322上调人膀胱癌细胞系T24中抑癌基因p21WAF1/CIP1(p21)表达的效应.进一步分析dsP21-322是否还可上调p21前体mRNA的表达,以及增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系.方法 合成靶向p21启动子区的小激活RNA序列dsP21-322及阴性对照(dsControl),并分别转染至T24细胞,RT-qPCR和Western Blot分别检测p21 mRNA、前体mRNA和蛋白表达的变化.ChIP检测RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子富集的改变.结果 RT-qPCR和Western Blot结果显示,dsP21-322可以明显上调T24细胞系中p21成熟mRNA、前体mRNA及p21蛋白的表达,且与dsControl相比,差异均有统计学意义(P<0.001).此外,dsP21-322的转染可以明显增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系.结论 dsP21-322上调抑癌基因p21表达是发生在转录水平的基因调控过程,这一特征的发现为后续RNA激活机制的研究提供了部分理论依据.     

心脏死亡器官捐献获取流程探讨

目的总结并进一步探讨心脏死亡器官捐献(DCD)获取流程的初步经验。方法回顾性分析2009年7月至2012年1月期间广州军区总医院28例DCD者的临床资料、供体入选标准及器官获取流程。结果 28例DCD供体均成功实施了器官捐献,其中MaastrichtⅢ类3例(10.7%),MaastrichtⅣ类1例(3.6%),脑-心双死亡捐献(DBCD)供体24例(85.7%)。3例MaastrichtⅢ类供体实施了标准DCD器官获取流程(简称DCD流程),1例MaastrichtⅣ类供体采用DBCD器官获取流程(简称DBCD流程)非体外膜肺氧合(ECMO)模式,24例DBCD采用了DBCD流程ECMO模式。供体器官热缺血时间:DBCD为0 min,MaastrichtⅣ类为18 min,MaastrichtⅢ类平均25 min(22～28 min)。本组共获取了28个肝脏、40个肾脏、2个心脏,分别成功用于肝移植、肾移植和心脏移植。结论我国DCD器官获取可分为DCD流程和DBCD流程,后者又分为ECMO模式和非ECMO模式。ECMO模式可避免器官热缺血损伤且没有伦理学争议,对我国公民DCD器官有着十分重要的作用。     

体外膜肺氧合用于心死亡供肝的初步经验

目的 总结体外膜肺氧合(ECMO)保护心死亡供肝的初步经验.方法 回顾分析2009年7月至2011年5月期间广州军区总医院肝移植中心施行的17例心死亡肝移植供者临床资料,了解供者原发病和有关指标、供者捐献与获取流程、ECMO使用方法.结果 17例供者均先诊断脑死亡然后等待心脏停跳,属于脑心双死亡供者(DBCD).在心死亡过程全部应用了ECMO,ECMO时间51～380(平均187)min.所有供者均成功获取了供肝并用于受者.受者全组无手术死亡.术后肝功能恢复满意,未发生原发性移植肝无功能并发症.术后1个月内因肺部感染死亡1例,其余16例顺利康复出院并随访至今,随访最长时间为29个月.结论 DBCD是我国公民心死亡供体的特殊类型.ECMO可以控制DBCD热缺血损伤且没有伦理学争议,对我国公民心死亡器官捐献有着十分重要的作用.     

泌尿腔内手术患者术后尿脓毒症休克发生的相关因素及临床特征分析

目的 探讨泌尿腔内手术患者术后尿脓毒症休克发生的相关因素及临床特征分析.方法 选取泌屎腔内手术后并发尿脓毒症患者73例,其中15例并发尿脓毒症休克.记录患者年龄、性别、ASA分级、是否有泌尿系统感染史、术前尿白细胞(WBC)、尿细菌培养结果、是否预防性使用抗生素、术中肾盂是否积脓、手术方式、手术时间、术毕时血WBC和C反应蛋白浓度及术后早期是否出现感染征象.记录尿脓毒症休克患者血压、多器官功能障碍综合征评分和预后情况.尿脓毒症休克患者最低SP与休克诊断时间、休克纠正时间、ICU停留时间和最高多器官功能障碍综合征评分间进行Person相关分析.结果 女性和术后早期出现感染征象与尿脓毒症休克发生相关(P＜0.05).血压突然下降是尿脓毒症休克的首发症状,最低收缩压[(71±10) mm Hg]与休克诊断时间[术后(90±44)min]呈正相关,与ICU停留时间[(3.8±1.3) d]和最高多器官功能障碍综合征评分[(6.1±3.1)分]呈负相关(P＜0.05),但与休克纠正时间无关(P＞0.05).所有尿脓毒症休克患者出院时器官功能都恢复至术前水平.结论 女性和术后早期出现感染征象的尿脓毒症患者术后易发生尿脓毒症体克;及时诊断和治疗尿脓毒症休克,预后良好.     

口腔健康教育与局部用氟对青少年固定矫治中釉质脱矿的影响

目的:探讨口腔健康教育与局部用氟对青少年固定矫治后釉质脱矿发生率的影响。方法:将120例青少年矫治患者随机分成3组:第1组为对照组40例(638颗),该组患者不进行任何行为干预;第2组40例(643颗),对患者及家长进行口腔健康教育,但不涂氟;第3组40例(639颗),除了对患者和家长进行口腔健康教育外,同时用氟化物处理牙面。结果:3组患者牙釉质脱矿的比率分别为18.18%、6.53%和3.59%,各组间两两比较均有显著性差异。结论:口腔健康教育与使用氟化物对预防正畸牙釉质脱矿是有效和可行的。     

茵陈提取物对糖尿病大鼠肾组织中PTEN蛋白表达的影响及其肾脏保护作用

目的：探讨茵陈提取物（HACE）对糖尿病大鼠肾组织中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）表达的影响,阐明HACE对糖尿病大鼠肾脏保护作用的药理学机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠模型。30只Wistar大鼠随机分为对照组（6只）、模型组（12只）和HACE组（12只）,HACE组大鼠每天1次灌胃给予HACE（5 g·kg^-1）,对照组和模型组大鼠每天1次灌胃给予等量生理盐水。给药4个月后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率和尿总蛋白排泄率,HE染色观察大鼠肾组织病理形态表现,PAS和Masson染色检测肾小球细胞外基质（ECM）分布情况,免疫组织化学染色法检测大鼠肾组织中PTEN蛋白表达分布情况,Western blotting法检测各组大鼠肾脏组织中PTEN蛋白表达水平。结果：与模型组比较,HACE组大鼠肾小球系膜区扩大、PAS及Masson阳性染色物质聚集和基底膜增厚等现象明显减轻,24h尿白蛋白排泄率明显降低（P<0.05）,尿总蛋白排泄率差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学染色检测,对照组大鼠肾组织PTEN蛋白表达量较高,模型组大鼠肾组织中PTEN蛋白表达量降低,HACE组大鼠肾组织中PTEN蛋白表达量趋向正常。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组大鼠肾皮质中PTEN蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,HACE组大鼠肾皮质组织中PTEN蛋白表达水平明显升高（F=5.06,P<0.05）。结论：HACE提高大鼠肾脏组织中PTEN蛋白的表达可能是其对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制之一。     

血清miRNA-21和miRNA-192表达与糖尿病肾病的相关性研究

［摘要］ 目的探讨血清miRNA-21和miRNA-192表达与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的相关性。 方法选择2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患者（DM组）38例、DN患者（DN组）27例及同期体检健康者(对照组)30例,采用实时荧光定量PCR（real time-PCR,RT-PCR）技术检测血清miRNA-21和miRNA-192表达,采用PHILIPS-IU22彩色多普勒超声诊断仪检测肾主动脉（main renalartery,MRA）收缩期的峰值速度（peak systolic velocity,PSV）及阻力指数（resistance index,RI）等血流相关参数,比较分析以上指标的变化与DN的关系。 结果DN组和DM组RI明显高于对照组,DN组RI明显高于DM组,DN组PSV明显低于DM组和对照组(P＜0.05)。DN组和DM组miRNA-21表达高于对照组,miRNA-192低于对照组,DN组miRNA-21表达高于DM组,miRNA-192低于DM组(P＜0.05)。DN组血清miRNA-21与miRNA-192表达呈负相关（r=-0.837,P＜0.05）;miRNA-21表达与RI水平呈正相关（r=0.812,P＜0.05）,与PSV水平呈负相关（r=-0.793,P＜0.05）;miRNA-192与RI水平呈负相关（r=-0.807,P＜0.05）,与PSV水平呈正相关（r=0.782,P＜0.05）。DM组血清miRNA-21与miRNA-192表达呈负相关（r=-0.816,P＜0.05）;miRNA-21与RI水平呈正相关（r=0.714,P＜0.05）;miRNA-192表达与RI水平呈负相关（r=-0.745,P＜0.05）。 结论血清miRNA-21和miRNA-192表达与DN的发生发展有相关性,检测miRNA-21和miRNA-192表达可为DN的早期发现及治疗提供基因依据。     

康复新液联合利多卡因辅助氧疗治疗复发性口腔溃疡的临床研究

［摘要］ 目的探讨康复新液联合利多卡因辅助氧疗治疗复发性口腔溃疡的临床效果。 方法选取复发性口腔溃疡患者107例,用随机数字表法随机分为对照组（53例）与研究组（54例）,对照组给予利多卡因、氧疗治疗,研究组给予康复新液、利多卡因、氧疗治疗。于治疗后6天比较2组疼痛缓解程度,观察2组患者溃疡愈合时间,2组比较患者CD3+、CD4+、CD8+、白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平,随访观察2组溃疡复发状况及不良反应发生情况。 结果治疗后,研究组疼痛指数低于对照组,愈合时间短于对照组,总有效率高于对照组,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于对照组,TNF-α、IL-6水平低于对照组,复发率低于对照组（P＜0.05或P＜0.01）。2组不良反应发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论复发性口腔溃疡采用康复新液联合利多卡因辅助氧疗治疗可增强疗效,缓解疼痛,改善免疫功能,减轻炎症反应,降低复发率,且不良反应少.     

银杏叶片治疗精神分裂症患者脂代谢紊乱的疗效

目的 探讨银杏叶片对服用奥氮平的精神分裂症患者脂代谢紊乱的影响。方法 选取住院的精神分裂症患者共80例,随机平均分为2组:单用组给予奥氮平(15±5)mg/d治疗,联合组给予奥氮平(15±5)mg/d+银杏叶片1.2 g/d治疗,共治疗8周。于治疗前及治疗第2、4、8周末分别对2组患者进行血脂监测。结果 与治疗前对比,单用组第4周和8周末甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)均显著升高(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)显著降低(P<0.05);与治疗前对比,联合组8周末LDL和HDL无明显变化(P>0.05),TG和TC显著升高(P<0.05),但是8周末时联合组TG和TC显著低于单用组(P<0.05)。结论 服用奥氮平的精神分裂症患者会存在不同程度血脂水平的改变,而加用银杏叶片后能改善奥氮平所致的血脂异常。     

VEGFR2促进脑胶质瘤干细胞增殖和生长的机制研究

[目的]探讨VEGFR2促进脑胶质瘤干细胞增殖和生长的机制。[方法]通过19例新鲜分离的人脑胶质细胞瘤(Glioblastoma multiforme, GBM)标本进行组织分离、细胞培养,然后对培养的细胞进行慢病毒转染后进行BALB/c(nu/nu)小鼠成瘤实验,并获得神经胶质细胞瘤样本(T556, T1966, T4121, T3691)。分别对分离的人GBM细胞和异种移植神经胶质细胞瘤样本细胞进行流式细胞术CD133干细胞分选及VEGFR2、免疫组化、免疫荧光检测等分析、检测。[结果]CD133~+细胞表面VEGFR2的表达与CD133~-对照组相比富集(CD133~+阳性率19.6%而CD133~-对照的阳性率为4.7%;P<0.001 7);表面VEGFR2阳性的肿瘤细胞比例不同,从1.4%到25.9%(平均13.8±8.3%)不等。对石蜡包埋标本进行免疫组化分析发现GBM细胞表面及细胞浆均有分布VEGFR2,而胞浆VEGFR2则较为显著。对人GBM活检冰冻切片进行的免疫荧光染色证实VEGFR2细胞群聚集靠近血管结构;进一步对标本进行免疫荧光定位、免疫共沉淀和细胞表面蛋白生物素化实验发现VEGFE、VEGFR2和NRP1及磷酸化p-VEGFR2和增值标记蛋白Neuropilin-1在恶性脑胶质瘤病灶和周围正常组织及脑小血管周围的差异表达。[结论]VEGFR2优先表达于CD133人胶质瘤干细胞(GSC)的细胞表面及恶性脑胶质瘤病灶小血管周围,其增殖、生长能力和致瘤性,可能部分依赖于通过VEGFR2-Neuropilin-1 (NRP1)的信号传递,可能在GBM的增殖和生长过程中发挥一定作用。