和解聚散方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织α-SMA表达的影响

目的:观察和解聚散方对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白表达的影响,初步探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将雄性SD大鼠120只随机分为4组:假手术组,模型组,洛丁新组,和解聚散方组,每组30只,从造模后第2天开始灌胃,洛丁新组为1.0mg/kg/d,和解聚散方组为9.8g/kg/d,假手术组、模型组灌胃生理盐水3ml/只。分别于造模后7,14,21天取梗阻侧肾脏进行HE、Masson染色,观察肾组织病理结构变化;采用免疫组化方法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:模型组、洛丁新组、和解聚散方组中α-SMA在术后7天、14天、21天表达均明显高于假手术组,两个治疗组的表达水平明显低于模型组,和解聚散方组14天与洛丁新组14天组比较有显著性差异。结论:和解聚散方可以降低肾组织中α-SMA的表达,这可能是和解聚散方抗肾纤维化的作用机制之一。     

E-Cad、MMP9血清中的表达与胃癌痰湿证型关系的临床研究

目的立足于肿瘤转移的生物学特性与痰的病理特征相似基础上,探讨痰在肿瘤转移中发挥作用的可能物质基础。方法以酶联免疫吸附法检测胃癌痰湿证型患者30例治疗前后与非痰湿证型患者32例以及健康对照组10例血清中上皮钙黏附分子(E-Cad)、基质金属蛋白酶(MMP9)的表达;痰湿证组服用消痰散结方1个月,非痰湿证组不治疗。观察治疗前后血清中E-Cad、MMP9的表达变化,并与非痰湿组血清中E-Cad、MMP9的表达进行比较对照。结果两种黏附分子表达在痰湿证型与非痰湿证型中的表达均较健康组升高(P<0.05),痰湿组较非痰湿组升高(P<0.05);治疗组治疗后E-Cad的表达明显降低(P<0.05),MMP9的表达有降低趋势,但差异不显著。结论痰在肿瘤转移中发挥作用的途径可能是通过影响黏附分子的表达,两者存在相关性。     

越鞠甘麦大枣汤增强突触可塑性产生抗抑郁样作用＊

目的 研究越鞠甘麦大枣汤的抗抑郁样作用并分析其对小鼠海马突触可塑性的影响。方法 昆明小鼠随机分为对照组和越鞠甘麦大枣汤组，给药24 h和7 天后进行悬尾测试（Tail suspension test，TST）和强迫游泳测试（Forced swimming test，FST）。运用电生理（electrophysiological experiment）技术检测小鼠海马区Schaffe侧枝-CA1的长时程增强（long term potentiation，LTP），利用western blot方法分析海马脑区α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionicacid receptor，AMPAR）和N-甲基-d-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor， NMDAR）相关突触蛋白的表达水平。结果 给药24 h和7天后，与对照组小鼠相比，越鞠甘麦大枣汤给药组小鼠在TST（P <0.001）和FST（P <0.01）中的不动时间均明显降低，氯胺酮在给药24 h后显示出抗抑郁作用，但到第7天不能降低小鼠不动时间，越鞠甘麦大枣汤显示出更持久的抗抑郁样作用。电生理实验中，越鞠甘麦大枣汤可增强小鼠海马区的LTP（P < 0.001）。Western blot结果显示，GluR1、NR2B以及NR1的表达水平在给药后均明显增加（P < 0.05）。结论 越鞠甘麦大枣汤可能通过增强昆明小鼠海马脑区LTP，以及增加AMPA和NMDA受体相关突触蛋白的表达水平以提高突触传递效能，从而产生抗抑郁样作用。     

高纯度GLA包合工艺研究Ⅱ——包合工艺的单因素、2因素试验

目的:考察尿素包合工艺各因素对纯度和产率的影响。方法:采用单因素试验考察原料的配比、包合温度、包合时间、对纯度的影响及3次包合后提取方法对产率的影响,采用2因素试验考察了不同配比和乙醇含量、包合次数和包合方法对产物的影响。结果和结论:单因素试验经方差分析和显著性测验说明原料的配比以1∶3∶8(油∶尿素∶95%乙醇)为最好,1次包合后纯度为30%左右,包合的最佳温度为-15～-20℃,包合时间以24h为好。2因素实验说明不同配比与乙醇含量最佳组合为配比1∶3∶8、乙醇为90%～95%,其纯度最高。包合的次数在3次以上时,纯度才可达到90%以上,且方法之间差异不显著。     

知母皂苷对脂多糖引起巨噬细胞分泌TNF-α和NO的影响及机制

目的:观察知母皂苷是否能抑制脂多糖引起的小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α和NO释放并探讨PI3K/Akt/p70S6K信号转导通路的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞培养24 h,加入不同浓度知母皂苷(1、10和100μmol/L)或加入不同的阻断剂(PI3K特异性阻断剂LY294002、Akt特异性阻断剂TCBN),之后加入脂多糖(10 mg/L)继续培养。ELISA法和Griess法分别测定巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO的含量;免疫化学荧光染色法观察巨噬细胞磷酸化p70S6K表达水平的改变。结果:加入脂多糖作用2 h巨噬细胞上清液中TNF-α开始含量明显增加,24 h达高峰。知母皂苷(1、10和100μmol/L)、LY294002(20μmol/L)和TCBN(10μmol/L)均可不同程度的抑制脂多糖引起的巨噬细胞TNF-和NO产生增加。知母皂苷(100μmol/L)可减少脂多糖引起的小鼠腹腔巨噬细胞磷酸化p70S6K表达增加。结论:知母皂苷显著抑制脂多糖引起的巨噬细胞炎症因子TNF-α和NO释放,其作用机制与知母皂苷下调PI3K/Akt/p70S6K信号转导通路表达有关。     

梓葛冻干粉对人脐静脉内皮细胞缺氧/ 复氧损伤的保护作用

目的:研究中药单体组方梓葛冻干粉对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECs,采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型。用梓葛冻干粉干预后,采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Western blot法分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达。结果:与模型组相比,梓葛冻干粉12.5 mg.L-1显著提高细胞活力(P<0.05);梓葛冻干粉49.0,24.5,12.5 mg.L-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性(P<0.05);梓葛冻干粉24.5,12.5 mg.L-1能显著减少LDH的释放量及降低MDA和NO的含量(P<0.05),并上调细胞Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01);梓葛冻干粉49.0,24.5,12.5 mg.L-1显著降低Bax的表达并上调Bcl-2/Bax(P<0.05,P<0.01),且梓葛冻干粉49.0,24.5 mg.L-1显著降低Caspase-3的表达(P<0.01)。结论:梓葛冻干粉可显著拮抗缺氧/复氧对HUVECs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化和抗凋亡能力有关。     

《脉书》对中医理论体系影响之探讨

在中医学术的历史进程中,<脉书>与<灵枢>等早期经络文献即含有中医整体观理论与辨证论治方法,对经络学说的继承和发展极为重要.经络学说所含的辨证论治模式也为后世八纲及各种辨证方法提供了基础.     

中药标准组分的高效液相色谱/质谱联用(HPLC/MS)表征

高效液相色谱／质谱联用表征是化学表征的重要内容，本文通过高效液相色谱／质谱联用方法系统表征中药标准组分，采用了电喷雾电离源（ESI）、大气压化学电离源（APCI）的正负离子扫描模式，荻取标准组分在统一分析条件下，不同表征模式中化合物的光谱、质谱信息。通过对不同标准组分中大量表征数据的比对和分析可发现和归纳色谱、质谱规律，用于不同药材的成分差异性研究，以及由系统制备得到的同种药材不同层次标准组分中成分与含量的变化，为制备成分的确定和高效制备条件及参数的优化提供基础。建立包含分析方法的标准组分色谱质谱数据库，结合色谱、质谱规律，实现已知化合物的搜索匹配与自动质谱解析；预测和发现结构类似的未知化合物，提高研究效率，加强中药物质基础研究的系统性和深入性。     

可见光光谱用于表寒里热证舌诊的快速分类

目的:提出一种应用光谱法来反映舌部信息的方法,最终达到将中医证型客观化的目的。方法:使用光谱仪采集舌部的光谱数据,再通过偏最小二乘和支持向量机的方法,找出光谱数据与中医证型之间的联系,从而实现中医证型客观化。结果:实验用可见光光谱,对采集到的53例表寒里热证患者、37例健康人作分析,分别使用支持向量机和偏最小二乘的方法对数据进行分类和预测,两种方法都可以100%正确地将两类数据区分开,但从预测精度上来讲,支持向量机的预测误差平方均值为0.07734,要优于偏最小二乘的0.13539,所以支持向量机的方法用于可见光光谱的分类要更优一些。结论:提出了中医舌诊的客观化的一种全新研究思路,并为进行中医症候的分类打下基础。     

鹅绒委陵菜多糖提取及抗氧化活性的研究

目的采用浸泡提取法、超声波提取法、碱水提取法提取鹅绒委陵菜多糖(PAP)。方法通过对3种方法所得鹅绒委陵菜粗多糖提取率进行比较,并用硫酸-苯酚法对多糖含量进行定性定量分析;同时还研究了体外条件下多糖对.OH、O2-.和DPPH.自由基的清除效果。结果用热水浸提法所得多糖得率及总糖含量最高,其提取率及含量分别为2.25%和49.38%。PAP的浓度在0.40 mg/ml时,对.OH、O2-.和DPPH.的清除率分别达到89.73%、90.12%和88.72%。结论鹅绒委陵菜多糖具有体外抗氧化活性作用。