血清HCV RNA检测在预防输血后丙型肝炎中的意义

目的 探讨血清HCV RNA检测在预防输血后丙型肝炎中的意义。方法 用ELISA法检测2000年1月至2003年12月末抗．HCV阴性的全血标本56400份次，再进行RT-PCR（荧光适时技术）检测HCV RNA，并对输过HCV RNA筛查阴性血液的患者进行追查。结果 HCVRNA阳性率为2．5‰（146／56400）。对输过HCVRNA筛查阴性血液的患者追查结果，无一例发生输血后丙型肝炎。结论 对抗-HCV阴性的血液标本用敏感的试剂进行HCV RNA检测在预防输血后丙型肝炎中不但有效，而且可行。     

神经生长因子诱导后的交感神经元样PC12细胞与新生大鼠心肌细胞共培养的实验研究

探讨神经生长因子(NGF)诱导的交感神经元样PC12细胞作为体外再造心肌神经支配研究模型的可行性。用含0.04?TA的0.25%胰酶分离新生大鼠原代心肌细胞,然后与NGF诱导的交感神经元样PC12细胞共培养,通过光学显微镜观察、常规H.E.染色、激光共聚焦显微镜和扫描电镜观察等对其进行评价。结果表明:在二维共培养模型中,NGF诱导的交感神经元样PC12细胞长出神经突起,突起及其上的膨体能够到达跳动的心肌细胞表面,神经突起随心肌细胞一起跳动。采用神经元样PC12细胞作为体外再造心肌神经支配研究模型是可行的,神经细胞与心肌细胞可能存在支配关系。     

MUS81基因在喉癌中的突变和表达

目的 探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性.方法 应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变;应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组织中的表达情况.结果 42例喉癌、癌旁组织标本中,癌旁正常组织均无突变,喉癌组织标本中19例发生突变,占45.2%(19/42),11例喉癌组织第9外显子发现有突变,占26.2%(11/42),8 例喉癌组织第10外显子有突变,占19%(8/42),分析表明具有统计学意义(P<0.01).逆转录-PCR结果表明,42例喉癌中有17例MUS81基因mRNA低表达,占40.48%(17/42).Western印迹方法分析结果表明,42例喉癌中有17例MUS81蛋白质低表达,占40.48%(17/42),经统计学分析肿瘤组与对照组差异有统计学意义(P<0.01).分析表明MUS81基因突变与mRNA和蛋白质低表达有显著相关性(P<0.01).统计结果显示喉癌MUS81基因突变与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性(P>0.05).MUS81基因低表达与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性(P>0.05).结论 发现MUS81基因在喉癌组织中有突变发生及表达异常,提示MU81基因突变和表达异常可能是喉癌发生及发展的重要因素之一.     

JAK2抑制剂对食管癌细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响

目的 研究食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡及COX-2表达与信号转导子和激活子3（STAT3）信号传导通路的关系，明确以JAK2/STAT3为靶向的信号转导在Eca-109细胞中的分子调控机制。方法 将JAK2抑制剂AG490作用于Eca-109细胞，用MTT法检测细胞增殖；流式细胞仪、DNA琼脂糖电泳法及透射电子显微镜检测细胞凋亡；Western blot法检测细胞中JAK2、p-JAK2、p-Stat3及COX-2的蛋白表达变化；RT-PCR 检测COX-2 mRNA的变化。结果 AG490呈时间、剂量依赖性的抑制Eca-109细胞增殖并诱导凋亡，抑制JAK2/STAT3通路蛋白的表达，呈浓度依赖性地下调p-JAK2及p-Stat3蛋白的表达（P <0.05），并下调COX-2 mRNA及蛋白的表达（P <0.05）。结论 JAK2/STAT3信号传导通路调控AG490对Eca-109细胞作用的细胞内信号传导机制，最终通过下调COX-2表达影响Eca-109细胞的增殖并诱导凋亡。     

胎牛血清外泌体对成骨细胞增殖的作用

背景:研究表明外泌体具有促进骨再生的能力,但从胎牛血清中提取的外泌体是否可以促进骨形成仍存在争议。目的:观察胎牛血清外泌体对成骨细胞增殖能力的影响,从而为临床治疗骨破坏提供新思路。方法:通过超速离心法从胎牛血清中提取外泌体,采用透射电子显微镜和Western blot法验证外泌体是否提取成功;然后用10 mg/L胎牛血清外泌体干预成骨前体细胞MC3T3-E1,通过CCK-8实验检测外泌体对成骨细胞增殖能力的影响,Western blot检测外泌体对成骨细胞骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白表达的影响。以不含外泌体的胎牛血清培养的MC3T3-E1细胞为对照组。结果与结论:①胎牛血清外泌体具有典型的脂质双层膜结构,大小在30-150 nm之间,外泌体表面标记因子CD81表达呈阳性,而微囊表面标记物CD40表达呈阴性;②外泌体组的增殖能力明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);外泌体组成骨标志性因子骨形态发生蛋白2和骨桥蛋白的表达水平明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);③结果表明,胎牛血清外泌体对成骨细胞的增殖起促进作用,可为临床治疗骨破坏提供新思路。     

noggin基因修饰神经干细胞移植对衰老小鼠学习记忆能力的改善

本研究旨在探讨重组腺病毒介导的noggin基因修饰的小鼠神经干细胞(NSCs)移植入D-半乳糖致衰小鼠海马后的迁移及对小鼠学习记忆能力的影响。分别以含noggin基因的重组腺病毒(pAdEasy-1-noggin-GFP)及对照病毒(pAdEasy-1-GFP)转染体外培养的NSCs,获取神经干细胞克隆(NSCs-noggin;NSCs-GFP),移植入由D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠右侧海马CA3区,术后4周采用Y-电迷宫检测小鼠的学习记忆行为,并对各组小鼠脑组织海马段行石蜡冠状切片、免疫组织化学和BrdU免疫荧光化学方法检测。结果显示:基因修饰的NSCs移植对小鼠的学习记忆行为的改善比pAdEasy-1-GFP组更为明显,其记忆保持率持续时间更长;NSCs移植后能在宿主海马内迁移,基因修饰的NSCs移植组在海马内的BrdU阳性细胞数较多(P<0.05)。以上结果表明noggin基因不但可能参与衰老小鼠的学习记忆行为,而且能够促进NSCs的迁移。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的MRI研究

目的：探讨磁共振成像（MRI）对确定阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）病人阻塞部位的作用。方法：通过对35例OSAHS男性患者行多导睡眠仪、MRI及纤维喉镜检查配合Muller’s运动检查（FEMM）、同时对30例男性健康人的上呼吸道进行MRI检查，将两者检查结果进行比较，判定OSAHS患者上呼吸道狭窄的部位及狭窄程度，客观评价MRI对检查OSAHS患者的应用价值。结果：OSAHS患者的上呼吸道截面积明显小于健康人，轻度OSAHS患者多存在腭咽平面狭窄；中重度组OSAHA患者大部分所有平面都存在狭窄，但中度组以腭咽狭窄较明显，而重度组所有平面均存在较明显的狭窄，这种狭窄主要是由于口咽部周围软组织增生及软腭过长、肥厚及舌根宽大、肥厚所致。结论：MRI检查可判定OSAHS患者上呼吸道狭窄的部位及狭窄程度，有助于治疗方案的选择，对预估手术疗效具有重要的意义。     

髓过氧化物酶在大鼠哮喘中的作用及地塞米松对其的影响

目的：观察大鼠哮喘中性粒细胞（PMN）及其髓过氧化物酶（MPO）的表达水平及地塞米松（DM）对其的影响。方法：采用大鼠哮喘模型，随机分成哮喘组（A组）、正常对照组（C组）、地塞米松治疗组（D组），对血PMN进行分离纯化和支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞计数，免疫组化和比色法测定MPO的表达水平。结果：（1）A组血PMN和支气管壁中MPO的表达水平均显著高于C组（P〈0．01）；D组血PMN中其表达水平显著低于A组（P〈0．01），而在支气管壁两者没有显著性差异（P〉0．05）。A组肺组织和BALF中MPO的活性均显著高于C组（P〈0．01，P〈0．05），D组肺组织中其活性显著性低于A组（P〈0．01），而在BALF中两者没有显著性差异（P〉0．05）。（2）A组BALF、肺组织中PMN的计数均显著高于C组（P〈0．01）；D组肺组织中其计数显著高于A组（P〈0．01），而两组BALF中PMN占细胞总数的百分比无显著性差异（P〉0．05）。结论：PMN及其MPO的表达水平在哮喘时增加，PMN可能通过合成MPO参与了哮喘的炎症过程，DM对其合成功能有抑制作用，但加剧PMN在肺组织中聚集。MPO与气道中PMN的浸润密切相关。