Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的 观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果.采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶 3(caspase 3)的表达变化.结果 p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期.随着survivin基因被沉默,caspase 3表达升高(P<0.01).结论 靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡.     

乌鲁木齐市维吾尔族长寿家族成员第二掌骨骨皮质的X线形态学测量分析

用Ｘ线形态学测量方法，对乌鲁木齐部分维吾尔族长寿老人及其家族成员的第二掌骨骨皮质进行了测量。结果表明１０￣３９岁组骨皮质厚度，皮质厚度指数，皮质面积随年龄增长而增大，３０￣３９岁组达到峰值，其中骨皮质厚度、皮质面积的数值男性〉女性，３０￣３９岁组差别有显著性。４０岁以后各组数值开始下降，其下降速度女性快于男性，９０岁以上组最为明显，有显著性差异。     

抗人CD20单克隆抗体诱导Daudi细胞凋亡的功能研究

目的　观察由基因重组抗原制备的抗人CD2 0单克隆抗体 (CD2 0 McAb) 1- 2 8对B淋巴瘤细胞的促凋亡作用 ,并探讨其作用机理。方法　利用流式细胞术测定所获 1- 2 8单抗对标准CD2 0 FITC单抗的竞争抑制作用及对胞内游离钙的影响 ;通过电镜观察其诱导Daudi细胞凋亡后形态上的改变 ,免疫印迹实验显示Daudi细胞凋亡后功能上的变化。结果　 1- 2 8能明显竞争标准CD2 0 FITC单抗与Daudi细胞表面CD2 0分子的结合。电镜结果证实了 1- 2 8能够促进Daudi细胞发生凋亡的结论 ;实验结果显示Daudi细胞与 1- 2 8作用后胞内游离钙浓度明显升高 (P <0 .0 5 ) ,细胞内Bcl 2蛋白和caspase酶原的表达量下降 ,而Bax蛋白和caspase酶原降解的活性产物表达增加。结论　 1- 2 8能竞争结合Daudi细胞表面的CD2 0分子并诱导其发生凋亡     

84例周围血管病的足甲襞微循环观察

对84例周围血管病(脉管炎68例,静脉炎16例)和25例正常健康人进行了足甲襞微循环的对比观察。结果:患病组足甲襞微循环的血管形态、流态、管周状态均较正常健康组有明显差异(P<0.01)。提示:更接近病变部位的局部微循环观察更能代表病变的程度,对临床医生判断病情、选择用药和疗效观察都有很大帮助和参考价值。     

小鼠甲胎蛋白与结核杆菌热休克蛋白70基因融合载体的构建及体外表达

目的 构建小鼠甲胎蛋白(α-Fetoprotein，AFP)与结核杆菌热休克蛋白70(Mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70，Mt．HSP70)基因融合载体．并研究其在真核细胞中的表达情况。方法 以pcDNA3.1为基本单位构建AFP及HSP70的融合表达载体，融合基因以G-S-G-G-S连接子连接；用脂质体将系列载体导入COS-7细胞．48h后以免疫化学方法检测其表达。结果 构建的AFP和HSP70的单独及融合表达载体导入COS-7细胞48h后经RT-PCR检测可扩增出相应片段，细胞免疫化学染色为阳性。结论 AFP和HSP70的单独及融合表达载体构建成功，并能在真核细胞中表达。     

儿童退缩和同伴关系的相关

目的：用元分析方法对近20年关于儿童退缩和同伴关系相关的研究结果进行总结。方法：用多水平分析技术对儿童退缩和同伴接受的相关、退缩和同伴拒绝相关的研究结果进行总结分析。结果：儿童退缩和同伴接受之间有显著的负相关关系，退缩和同伴拒绝之间有低度的非负相关关系，各研究结果之间的变异显著。结论：退缩导致儿童不良的同伴关系。     

紫外线对两种聚四氟乙烯电荷储存稳定性的影响

利用在室温下的栅控恒压电晕充电后经不同强度紫外线辐照的表面电位测量,研究了紫外线对聚四氟乙烯(polytetrafluoroethylene,PTFE)多孔膜、聚四氟乙烯非多孔膜驻极体电荷储存稳定性的影响,探讨了两种聚四氟乙烯驻极体医疗产品使用紫外消毒方法的可行性.结果:(1)在常温条件下,紫外线辐照对两种聚四氟乙烯驻极体的电荷储存稳定性的影响不大;(2)聚四氟乙烯多孔膜驻极体的电荷储存能力随环境湿度的提高而略有下降;(3)聚四氟乙烯医用驻极体产品可采用紫外消毒法消毒.     

精索内动静脉高位结扎iNOS的表达与睾丸生精细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨精索内动静脉高位结扎术后，诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase．iNOS）的表达与生精细胞增殖和凋亡的关系。方法：免疫组化结合计算机图像分析系统检测iNOS阳性细胞光密度值；免疫组化方法检测并计算PCNA增殖指数（PCNA-Labeling index，PI）；原位末端标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-endlabeling method，TUNEL）检测生精细胞凋亡指数（apoptosis index，AI）。分析iNOS的表达与增殖、凋亡的相关性。结果：iNOS在术后3-15d表达增强，第7d呈强阳性表达。结扎组生精细胞PCNA增殖指数（PI）明显低于对照组（P〈0．01），凋亡细胞指数（AI）明显高于对照组（P〈0．01）。结论：精索内动静脉高位结扎，iNOS的表达与生精细胞PCNA增殖指数呈负相关，与生精细胞凋亡指数呈正相关。iNOS基因表达增强是生精细胞增殖减少和凋亡增加的重要原因。     

Induction of APOBEC3G in human hepatoma cells by interferon-α stimulation

To clarify the role of APOBEC3G (A3G) in cellular defense against hepatitis B virus ( HBV), the expression of A3G in normal human liver and the regulation of the A3G expression in hep-atoma cell line (HuH-7) were investigated. Expression level of APOBEC3s mRNA in human liver was determined by RT-PCR. HuH-7 and HepG2 cells were treated with various concentrations of IFN-α(0 U/ml, 100 U/ml, 500 U/ml, 1000 U/ml)for 12 h. The mRNA levels were measured by a quantitative RT-PCR, the results were normalized relative to the specimens without IFN-αstimulation. Total protein of HuH-7 cells treated with various concentrations of IFN-αfor 48 h was subjected to Western blot analysis. For reporter gene assay, HuH-7 cells were transfected with the reporter plasmids containing IRF-E sites and its mutants with different lengths. Then the cells were treated with or without 1200 U/ml IFN-a for additional 12 h (1000 U/ml) after 24 h of transfection, and the cell lysate was prepared and assayed for luciferase activity. It was found that normal human liver expressed the mRNA of A3G. A3G mRNA expression in HuH-7 and HepG2 cells were up-regulated by IFN-αstimulation in a dose-depen-dent manner. Western blot analysis indicated that A3G protein expression was also enhanced by IFN-αstimulation. Sequence analysis showed the existence of putative sites of IFN regulatory factor element (IRF-E) in 5' region of A3G gene upstream the initiation codon. IFN-αstimulation results in 6- to 8-fold increase in luciferase activity in cells transfected with the plasmid containing IRF-E sites of the 5' upstream sequences, whereas luciferase activity did not change in cells transfected with the plasmid containing mutant IRF-E sites or without IRF-E sites. As a conclusion, A3G are expressed in normal human liver. A3G expression was up-regulated by IFN-αstimulation in hepatoma cells and could be involved in host defense mechanisms against HBV. ERF-E site in 5' region of AP0BEC3G gene upstream the initiation codon plays an important role in this process.     

大鼠肠系膜淋巴结高内皮微静脉与淋巴迷路之间的网状纤维支架的研究

目的 研究大鼠肠系膜淋巴结内高内皮微静脉与淋巴迷路之间淋巴细胞归巢的通路.方法 用镀银染色光镜观察法和冻裂割断扫描电镜观察法观察健康、成熟Wistar大鼠肠系膜淋巴结的基质网状结构.结果 位于高内皮微静脉和淋巴迷路周围有网状纤维支架,在二者相临近部位有密集交织的网状纤维网.结论 淋巴结内高内皮微静脉和淋巴迷路之间密集交织的网状纤维网,为细胞的居留和迁移提供结构支持和适宜的微环境,可能是淋巴细胞归巢的重要通路.