多药耐药蛋白1和多药耐药相关蛋白5、7在糖尿病小鼠视网膜中表达的变化

目的 观察多药耐药蛋白1(muhidrug resistance 1,MDR1)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)5和MRP7在不同时期糖尿病小鼠视网膜中的表达变化.方法 通过腹腔注射链脲佐菌素诱导C57 BL/6小鼠建立糖尿病模型,伊文思蓝灌注检测血-视网膜内屏障变化.分别于糖尿病造模成功后的4周、12周和24周取小鼠视网膜,进行实时定量-PCR、免疫荧光、Western blotting等实验,检测各组小鼠视网膜中MDR1、MRP5和MRP7的表达变化.结果 伊文思蓝灌注结果显示在糖尿病12周就出现视网膜渗漏;实时定量-PCR结果发现与对照组相比,随糖尿病进展,MDR1、MRP5和MRP7在4周、12周和24周的表达均呈下降趋势(MDR1:P4周=0.028,P12周=0.003,P24周＜0.001;MRP5:P4周=0.045,P12周=0.009,P24周＜0.001;MRPy7:P4周=0.019,P12周＜0.001,P24周 =0.001),在糖尿病不同时期其变化也呈下降趋势(均为P＜0.05);免疫荧光观察到MDR1、MRP5和MRP7的荧光强度随糖尿病发展逐渐减弱;Western blotting检测可见在4周、12周、24周糖尿病小鼠视网膜中MDR1、MRP5和MRP7的表达均呈下降趋势.结论 在DR早期血-视网膜内屏障会受到破坏,视网膜中外排转运蛋白的表达也会受糖尿病的影响导致不同程度的下降.     

Correlation between intraocular pressure, central corneal thickness, stage of glaucoma, and demographic patient data: prospective analysis of biophysical parameters in tertiary glaucoma practice populations

PURPOSE: To determine the correlation of central corneal thickness (CCT) to Goldmann applanation tonometry (GAT) and dynamic contour tonometry (DCT, PASCAL), and to glaucoma stage as assessed by cup-to-disc ratio (CDR). DESIGN: Prospective, cross-sectional tricenter observation study. PATIENTS AND METHODS: From three glaucoma specialty practices a sample of 406 independent eyes was included. After ultrasound pachymetry, intraocular pressure was measured using PASCAL and Goldmann applanation tonometry and cup-to-disc ration was reassessed. Demographic data were included in the multivariate analysis. RESULTS: Mean corneal thickness was 540 microm. African Americans and normal-tension glaucoma patients showed the lowest values (518 microm and 522 microm, respectively). These values were significantly thinner than the central corneal thickness of Caucasians (549 microm) and ocular hypertensives (564 microm). Intraocular pressure assessed by Goldmann applanation tonometry shows a significant correlation with central corneal thickness (r = 0.068, P < 0.001), whereas PASCAL is not significantly associated with central corneal thickness (r < 0.001, P = 0.997). Increased IOP is significantly correlated with large ocular pulse amplitudes (r = 0.13, P < 0.001), which is predominantly seen in ocular hypertensives. A significant negative correlation was detected between cup-to-disc ratio and central corneal thickness (r = 0.102, P < 0.001). CONCLUSION: Glaucoma patients with thin central corneal thickness are more likely to be found at an advanced stage of the disease and among those with normal-tension glaucoma and black African ancestry. Underestimation of intraocular pressure by Goldmann applanation tonometry could be one causative factor.     

氧化应激机制在眼科疾病研究中的新进展

氧化还原反应是人体最基本的生化反应,对细胞生命活动产生着重要的影响。当机体遭受有害刺激导致氧化应激时,机体、组织、细胞受到一系列损伤。眼睛是位于体表的器官,易于受到各种理化因素影响导致氧化应激。本文介绍氧化应激机制在眼科眼表疾病、青光眼、白内障、糖尿病视网膜病变研究中的一些最新进展以及关于抗氧化的最新研究,为眼科疾病的研究以及防治提供方法及思路。     

黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治研究

背景高危角膜移植患者虽然常规应用免疫抑制性药物,但角膜移植片的排斥率仍很高。近年来传统中药在角膜移植中的作用逐渐引起关注,黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治作用需要进一步研究。目的探讨黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法16只正常雌性SD大鼠角膜作为供体,32只雌性Wistar大鼠作为受体,用角膜缝线法诱导角膜新生血管（CNV）,建立大鼠高危角膜移植模型,然后行封闭群大鼠SD．Wistar组间同种异体全板层角膜移植。采用随机数字表法将大鼠随机分为4个组,包括模型对照组（生理盐水灌服）、CsA组[10mg／（kg·d）CsA灌服]、黑睛排斥汤组[4g／（kg·d）黑睛排斥汤灌服]和联合用药组[10mg／（kg·d）CsA＋4g／（kg·d）黑睛排斥汤灌服],各组大鼠均于同种异体角膜移植后4d开始灌服相应药物,于术后第4天起裂隙灯显微镜下观察眼前节反应,每隔2天观察1次,连续观察30d。参考Larkin等的标准对角膜}昆浊程度、水肿程度及新生血管程度进行评分,记录移植排斥指数（RI）并观察植片的存活状况,对角膜进行常规组织病理学检查,采用流式细胞分析法对受体角膜局部和全身免疫状态进行检测,对4个组大鼠的各种检测指标进行比较。结果模型对照组大鼠角膜移植术后10d左右发生排斥反应,CsA组和黑睛排斥汤组大鼠均于术后12～13d发生排斥反应,而联合用药组大鼠于术后22d发生排斥反应。与模型对照组比较,CsA组、黑睛排斥汤组和联合用药组大鼠角膜移植后角膜混浊程度评分、角膜水肿评分和新生血管评分均明显下降,差异均有统计学意义（P〈0．05）,且联合用药组上述各指标的评分均明显低于CsA组和黑睛排斥汤组,差异均有统计学意义（P〈0．05）,而CsA组与黑睛排斥汤组的各种评分差异均无统计学意义（P〉0．05）。模型对照组角膜移植片存活时间平均为（10．38±1．69）d,联合用药组平均为（22．50±3．07）d,差异有统计学意义（t=-9．790,P=0．000）。组织病理学检查表明,术后15d联合用药组大鼠角膜基质中淋巴细胞浸润及新生血管评分少于CsA组和黑睛排斥汤组。流式细胞学检查证实,黑睛排斥汤组、CsA组和联合用药组大鼠角膜移植术后外周血中CD4＋淋巴细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均低于模型对照组,联合用药组CD4＋淋巴细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均低于CsA组和黑睛排斥汤组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论黑睛排斥汤对高危角膜移植模型大鼠术后角膜排斥反应有抑制作用,其疗效与0．1％CsA接近,二者联合用药有协同作用。     

OCT测量视网膜神经纤维层厚度及视盘参数在青光眼早期诊断中的应用及意义

目的探讨光学相干断层扫描仪(optical coherence tomography,OCT)测量视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度及视盘参数在青光眼早期诊断中的应用及意义。方法青光眼患者120例(192眼)分为早期青光眼组42例(66眼)、中期青光眼组46例(76眼)和晚期青光眼组32例(50眼),另设正常对照组50例(82眼),均采用Topcon 3D OCT检测RNFL厚度和视盘参数,计算各个参数的受试者工作特征曲线下面积(are aunder the receiver operating characteristi ccurve,AROC),并对检测结果进行比较分析。结果正常对照组、早期青光眼组、中期青光眼组和晚期青光眼组的平均RNFL厚度分别为(112.31±9.34)μm、(105.45±6.74)μm、(82.19±7.28)μm、(52.48±7.85)μm;与正常对照组比较,各青光眼组的RNFL厚度差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);各青光眼组之间两两比较差异也均有显著统计学意义(均为P<0.01)。与正常对照组相比,各青光眼组的视盘面积无明显变化,差异均无统计学意义(均为P>0.05),而视杯面积、视杯容积、杯盘比、水平杯盘比和垂直杯盘比均显著增加,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);盘沿面积和盘沿容积均显著降低,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);各青光眼组间除视盘面积外,各参数差异也均有显著统计学意义(均为P<0.01)。在正常对照组与早期青光眼组和全部青光眼组之间,对于RNFL厚度来说,平均RNFL厚度的AROC值最大;对于视盘参数来说,杯盘比的AROC值最大。结论 RNFL厚度和视盘参数是早期诊断青光眼的敏感指标,OCT检测RNFL厚度和视盘参数有助于青光眼的早期诊断。     

解脲脲原体血清型3在小鼠生殖道中的致病性

目的 探讨不同浓度解脲脲原体血清型3(UU3)在小鼠生殖道中的致病性.方法 将156只昆明小鼠按完全随机设计法分为A、B、c组(每组各48只)及对照组(12只)共4组.将3种不同浓度的UU3接种至各实验组小鼠阴道内,各组的浓度分别为:A组1×107 copy/g,B组1×106copy/g,c组1×105 copy/g;对照组仅接种UU液体培养基.于接种后第1、3、7、14、21、35天每次随机处死A、B、c组各8只及对照组2只小鼠,取宫颈管分泌物,荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测各组UU3的浓度及阳性率;取宫颈、子宫内膜及输卵管组织,光镜下观察其形态,并计算致病率.结果(1)A、B、C 3组UU3总阳性率分别为63%(30/48)、50%(24/48)和17%(8/48),3组间比较,差异有统计学意义(P<0.01).接种后1、3、7、14、21、35 d小鼠的UU3阳性率,A组分别为8/8、7/8、6/8、5/8,4/8和0,B组分别为7/8、5/8、5/8、4/8、3/8和0,C组分别为3/8、2/8、2/8、1/8、0和0;对照组各时间点均为0.接种后1 d的UU3阳性率3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);其他各时间点3组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)在UU3检测阳性者中,A、B、C组的UU3浓度在接种后1、3、7、14、21 d分别为1.70×107、3.75×106和1.45×105copy/g,8.26×10+6、2.56×106和1.07×105copy/g,4.04×106、1.37×106和5.43×104copy/g,2.86×106、6.72×105和4.68×103copy/g,2.41×105、1.12×105和0 copy/g.除接种后21 d外,接种后各时间点A、B、C 3组的UU3浓度比较,差异均有统计学意义(P<0.05);A、B组内接种不同时间点的UU3浓度比较,差异均有统计学意义(P<0.05);C组接种不同时间点的UU3浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05).(3)接种后7～35 d,A、B、C 3组的总致病率分别为56%(18/32)、44%(14/32)和6%(2/32),3组间比较,差异有统计学意义(P<0.01);接种后7、14、21、35 d小鼠的致病率,A组分别为5/8、5/8、4/8和4/8,B组分别为4/8、4/8、3/8和3/8,C组分别为1/8、0、1/8和0;对照组各时间点均为0.除接种后14 d外,各时间点A、B、C 3组间致病率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论在小鼠生殖道局部接种不同浓度的UU3,其致病性不同.当UU3浓度≥1×106copy/g时,其致病性明显增强.     

酸性成纤维细胞生长因子在宫颈癌中的表达及其信号传导途径

目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)在宫颈癌发生发展中的作用及其信号传导机制.方法应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)对36例宫颈癌组织aFGF 及其受体FGFR1的表达进行了分析;并以不同浓度的aFGF 和酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂genistein诱导宫颈癌细胞株HeLa细胞,[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定蛋白激酶C(PKC)及细胞外信号调节激酶(ERK)的活性.结果 aFGF mRNA 和FGFR1 mRNA在宫颈癌组织中的半定量检测结果分别为(1.233±0.064)和(1.168±0.103),与正常宫颈组织相比,差异有显著性(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05);随着aFGF浓度的增加,HeLa细胞PKC及ERK 活性随之升高,与aFGF浓度呈剂量依赖效应;genistein抑制细胞内PKC及ERK 活性,与genistein 浓度亦呈剂量依赖效应.结论提示aFGF 与宫颈癌的发生、发展、浸润呈正相关,其受体具有TPK活性,TPK激活后可进一步激活PKC和ERK,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子.     

米非司酮对中期引产母、儿外周血SCE的影响

目的探讨用不同剂量米非司酮（MFT）中期妊娠引产对母、儿姐妹染色单体交换（SCE）频率的影响,评估MFT对人体的染色体稳定性影响。方法选择符合研究条件的中期引产患者120例,随机分为4组：空白对照组,分别口服MFT 150、200、300 mg引产组,于胎儿娩出后取母亲静脉血及胎儿脐带血,进行SCE频率检测比较。结果①母亲组MFT 150 mg组、200 mg组与对照组SCE频率比较差异无统计学意义;300 mg组与对照组SCE频率比较,差异有统计学意义（P〈0.001）;各组均随着用药剂量加大,SCE频率逐渐升高（spearmanr=0.802,P〈0.05.）。②胎儿各组脐血SCE频率与是否用药以及药物剂量差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论①小剂量MFT（150、200 mg）引产,不引起母亲SCE频率显著增加。但300 mg引产时,SCE频率显著提高,应引起临床注意。②不同剂量MFT对胎儿SCE频率无影响。     

以Krukenberg瘤为首发表现胃癌55例临床分析

目的比较Krukenberg瘤为首发表现的胃癌患者与原发卵巢上皮性癌患者的临床病理资料,探讨前者的临床病理特征。方法回顾性分析2005年9月至2013年9月郑州大学第一附属医院妇产科以Krukenberg瘤为首发表现的胃癌患者55例（Krukenberg瘤组）的临床资料,同期原发卵巢上皮癌患者55例（原发卵巢癌组）作为对照。结果 Krukenberg瘤组患者的平均年龄为（35.1±4.6）岁（20~56）岁,显著低于原发卵巢癌组的（57.2±6.8）岁（40~72）岁（P〈0.05）。Krukenberg瘤组合并腹水比例（34.5%,9/55）明显低于原发卵巢癌组（90.9%,50/55;P〈0.05）。Krukenberg瘤组血清CA125升高30例,平均CA125水平为（98.7±14.1）kU/L;原发卵巢癌组CA125升高55例,平均CA125水平为（473.9±123.9）kU/L;两组CA125水平比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。Krukenberg瘤组术前术后诊断符合率（9.1%,5/55）明显低于原发卵巢癌组（100.0%,55/55;P〈0.05）。Krukenberg瘤组病理类型多为胃印戒细胞癌（49.1%,27/55）,原发卵巢癌组多为浆液性囊腺癌（74.5%,41/55）。Krukenberg瘤组患者6个月生存率为54.5%（30/55）,1年生存率为36.4%（20/55）,3年生存率为3.6%（2/55）;原发卵巢癌组分别是72.7%（40/55）、60.0%（33/55）和23.6%（13/55）。结论以Krukenberg瘤为首发表现的胃癌患者病理类型以胃印戒细胞癌为主,术前诊断率低,预后差,患者多为中青年妇女,合并腹水比例较低,血清CA125的测定及PET-CT检查对鉴别诊断有重要价值。     

超声对子宫切除术后下尿路形态学改变的观察研究

目的：利用超声观察子宫切除术后女性膀胱和尿道静态及动态的形态变化,从而评估其解剖结构的改变。方法：收集2012年6月-2013年3月于广东省人民医院进行检查的、因子宫病变行全子宫切除术的术后患者136例,根据手术方式及切除范围将其分为3组：A组为腹腔镜辅助的阴式子宫切除术者29例,B组为开腹子宫切除术者41例,C组为开腹广泛子宫切除术者66例。另将无盆腔或腹部手术史者50例设为对照组。4组均行经腹及经会阴超声检查,测量参数包括静止期及压力期（Valsalva呼吸时）膀胱颈移动度（UVJ-M）、膀胱尿道后角（PUVA）及膀胱残余尿量。结果：C组患者术后膀胱及尿道等下尿路解剖结构发生明显改变,UVJ-M、PUVA-r、PUVA-s等参数与对照组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）。 B组患者术后膀胱及尿道等下尿路解剖结构也发生变化,改变程度较C组小,UVJ-M参数与对照组、C组相比差异有统计学意义（均P＜0.01）,PUVA-r、PUVA-s等参数与对照组相比差异无统计学意义（均P＞0.05）。 A组患者术后膀胱及尿道等下尿路解剖结构无明显改变,UVJ-M、PUVA-r、PUVA-s等参数与对照组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论：①超声可对子宫全切术后女性膀胱及尿道形态学变化进行实时观察、客观评价解剖结构的改变。②子宫切除的3种手术方式中以开腹广泛子宫切除术对女性膀胱及尿道解剖结构改变最大,腹腔镜辅助的阴式子宫切除术则几乎没有影响。