大鼠和小鼠Pig-a基因突变试验历史背景数据采集

目的 介绍大鼠及小鼠 Pig-a基因突变试验方法,并汇总国家药物安全评价监测中心 2015—2022年开展的基于免疫磁珠检测法的大鼠及小鼠 Pig-a 基因突变试验背景数据。方法 阴性物质包括超纯水和 0.5% 羧甲基纤维素钠（CMCNa）,雄性 C57BL/6J 小鼠间隔 24 h ig 0.5% CMC-Na,连续 7 d;雄性 SD 大鼠间隔 24 h ig 0.5% CMC-Na,连续 14 d;大鼠间隔24 h ig 超纯水,连续 3 d。阳性对照为已知致细菌突变化合物,包括 N-乙基-N-亚硝基脲（ENU,10、40 mg·kg^-1）、盐酸丙卡巴肼（PCZ,60、150 mg·kg^-1）、乌拉坦（EC,300、800 mg·kg^-1）、N- 亚硝基二甲胺（NDMA ,1.5 mg·kg^-1）、N- 亚硝基二乙胺（NDEA,15 mg·kg^-1）。小鼠间隔 24 h ig ENU 40 mg·kg^-1,连续 3 d;间隔 24 h ig NDMA 1.5 mg·kg^-1、NDEA 15 mg·kg^-1,连续 7 d。大鼠间隔 24 h ig PCZ 150 mg·kg^-1、EC 800 mg·kg^-1、ENU 40 mg·kg^-1,连续 3 d ;间隔 24 h ig PCZ 60 mg·kg^-1、EC300 mg·kg^-1、ENU 10 mg·kg^-1,连续28 d。分别于给予受试物前,首次给予后14、28 d采集外周血,用流式细胞术检测大鼠红细胞表面 CD59蛋白的结合情况,结合免疫磁性计数微球技术计算网织红细胞（RETs）占总红细胞的百分率（%RET）（作为外周血毒性考察指标）、总红细胞中CD59表达为阴性细胞（RBC^CD59-,即突变的总红细胞）发生率和RETs中CD59表达为阴性细胞（RET^CD59-,即突变的 RETs）发生率。结果 各试验%RET数值均无大幅增加。SD大鼠和 C57BL/6J 小鼠的阴性对照组RBC^CD59-和 RET^CD59-突变率均低于 5×10-6,小鼠的背景值相对不稳定。连续 3 d ig给予小鼠 40 mg·kg^-1的 ENU,RBC^CD59-和RET^CD59-发生率自给药后2周开始均大幅增加（P＜0.05）,给药后4周进一步增加（P＜0.01、0.001）;给予小鼠NDMA后2、4周,RBC^CD59-发生率略有增加,但仍在阴性背景范围内,但RET^CD59-发生率在给药后第2周大幅增加（P＜0.001）,给药后第4周则大幅回落;给予小鼠NDEA后2周,RBC^CD59-和RET^CD59-发生率均有所增加（P＜0.05、0.001）,给药后第 4 周则有所降低。连续3 d ig给予大鼠40 mg·kg^-1 ENU,或连续28 d ig给予大鼠10 mg·kg^-1 ENU,RBC^CD59-、RET^CD59-发生率自给药后第2周开始均大幅增加（P＜0.001）,给药后第 4 周进一步增加（P＜0.001）;连续 3、28 d ig 给予大鼠不同剂量的 PCZ 或 EC 后,RBC^CD59-和RET^CD59-发生率的变化趋势与 ENU类似,但 EC诱发的突变细胞率低于 ENU和 PCZ。结论 体内 Pig-a基因突变试验可在首次给药后4周内有效检出致细菌突变化合物ENU、PCZ、EC、NDMA、NDEA的致突变性。提供了大鼠和小鼠Pig-a基因突变试验的背景值范围,为标准化试验方法的建立和研究结果的判定提供借鉴。     

基于网络药理学预测三七治疗幽门螺杆菌相关疾病机制及实验验证

目的 基于网络药理学预测三七治疗幽门螺杆菌（Hp）相关疾病机制,研究三七中有效活性成分人参皂苷Rb₃对Hp造成的胃上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法 使用Herb数据库收集“三七”的相关预测靶点,使用Gene Cards数据库收集Hp相关疾病的靶点;使用Draw Venn Diagram网站绘制Venn图,得到靶点交集;进行蛋白互作（PPI）网络分析、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。将GES-1细胞分为对照组、模型组及人参皂苷Rb₃低、中和高浓度（1、5、10 μ mol· L^-1）组,人参皂苷Rb₃组使用相应浓度的人参皂苷Rb₃预处理,培养过夜12 h至融合度为70%～80%。Hp悉尼株1 （SS1）按感染复数（MOI） 100加入细胞中制备损伤模型,人参皂苷Rb₃继续给药,共培养48 h。对照组不加SS1,对照组和模型组不加药。改良吉姆萨染色后通过光学显微镜观察细胞形态;结合Hoechst 33342荧光染色和Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒法检测活性氧（ROS）水平;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测凋亡相关基因TP53、Bax、Bcl-2表达量;Western blotting法检测P53、p-Akt、cleaved/pro-Caspase 9、Bcl-2、Bax、cleaved/pro-Caspase 3的蛋白表达情况。结果 网络药理学结果表明三七治疗Hp相关疾病的靶点共16个,其PPI网络分析得到按度值大小排名前6位靶点为TP53、CASP3、PTGS2、IL6、TNF、IL1β。GO富集分析与KEGG富集分析结果均显示与凋亡相关。与模型组比较,经人参皂苷Rb₃处理后,GES-1细胞的细胞核染色质致密深染,破裂的细胞逐渐减少;Hoechst 33342荧光染色细胞核强荧光数目明显减少;细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）;ROS水平显著降低（P＜0.05）;TP53与Bax的mRNA水平显著降低,Bcl-2 mRNA水平显著升高（P＜0.05）; p-Akt、Bcl-2蛋白表达显著升高（P＜0.05）,P53、Bax、cleaved/pro-Caspase 9与cleaved/pro-Caspase 3蛋白表达显著降低（P＜0.05）。结论 三七可能通过包括炎症及凋亡在内的多种途径治疗Hp相关疾病,人参皂苷Rb₃对Hp诱导的胃上皮细胞凋亡发挥显著改善作用,其可能机制是降低氧化应激水平,并调节Akt的磷酸化和P53的表达。     

影响胃癌预后因素的Cox回归分析

目的:探讨影响胃癌患者长期生存的预后因素.方法:采用Cox比例风险模型对可能影响胃癌患者预后的11项临床病理参数(包括患者年龄、性别、病理类型、浸润深度、分化程度、浸润的淋巴细胞量、胃旁淋巴结转移数目、癌组织脉管中有无癌栓、肿瘤大小、c-erbB-2表达、TNM分期等),进行单因素和多因素回归分析.结果:Cox单因素回归分析表明胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移数、脉管内是否有癌栓、临床分期、肿瘤直径、淋巴细胞浸润量与胃癌的预后有关(P＜0.05),而性别、年龄、病理类型、c-erbB-2表达等与预后无关(P＞0.05).但经Cox多因素回归分析,只有肿瘤的直径、脉管内是否有癌栓、淋巴细胞浸润量具有独立的预后意义(P＜0.05).结论:肿块的大小、脉管内是否有癌栓及局部淋巴细胞浸润量可以作为评估胃癌患者预后的独立指标,从而指导胃癌的治疗.     

九味虑平颗粒治疗广泛性焦虑症的临床疗效观察

目的:观察九味虑平颗粒治疗广泛性焦虑症(心脾两虚证)的临床疗效和安全性.方法:采用随机双盲双模拟阳性对照试验设计,将72例广泛性焦虑症(心脾两虚证)患者按3:1的比例随机分入九味虑平组(54例)和丁螺环酮组(18例)治疗4周,比较两组的临床疗效和不良反应发生率.结果:两组疗效相似,九味虑平组总有效率为94.34%,显效率为64.15%;丁螺环酮组总有效率100%,显效率77.78%.两组不良反应相似,不良反应发生率均为11.11%.九味虑平的主要不良反应有口干、便秘,个别病例出现心电图T波改变,但患者无自觉症状.结论:九味虑平颗粒用于治疗广泛性焦虑症(心脾两虚证)安全有效.     

食管癌术后早期肠内营养的临床应用

目的 探讨食管癌术后早期肠内营养的临床疗效.方法 将本院2009年9月～2012年9月住院的食管癌患者98例随机分早期肠内营养组（EEN）和传统肠内营养组（TEN）,每组49例,所有患者均于术后第1、10天测定血红蛋白（Hb）、清蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、淋巴细胞计数（TLC）、血清转铁蛋白（TF）水平,观察患者胃肠道功能恢复情况以及各种不良反应.结果 与术前比较,治疗后1d及10 d两组患者Hb、TLC、ALB及TP均不同程度升高,前后差异有统计学意义（P＜0.05）;与TEN组比较,术后10 d EEN组患者Hb、TLC、ALB及TP均显著升高,两组差异有统计学意义（P＜0.05）.EEN组排气时间比TEN组短,差异有统计学意义（t=1 1.057,P＜0.05）;EEN组发生轻度腹胀患者6例,轻度腹泻8例,TEN组患者出现腹胀2例,轻度腹泻3例,两组差异有统计学意义（X2=9.105,P＜0.05）.结论 早期行肠内营养能改变食管癌术后患者的机体营养状态,维护和促进胃肠道功能.     

康复新液促进小鼠压疮创面愈合机制的研究

目的 探讨康复新液对小鼠压疮创面促进愈合的作用及机制.方法 根据缺血-再灌注损伤机制,通过体外磁片加压法制备小鼠早期压疮模型,观察康复新液对小鼠压疮愈合的影响和组织病理学改变,通过免疫组织化学法从碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子(TGF-β)、表皮细胞生长因子(EGF)的蛋白表达方面研究康复新液的作用机理.结果 康复新液对小鼠压疮具有一定的促愈作用,可促进肉芽组织生长、血管新生、坏死组织、炎性物质的清除,较高剂量的康复新液可上调bFGF、TGF-β、EGF的蛋白表达,较低剂量的康复新液亦可促进bFGF的蛋白表达.结论 康复新液对模型小鼠早期压疮创面促愈和修复的作用机制可能与促进bFGF蛋白的表达相关,对TGF-β及EGF蛋白表达的上调可能也发挥了协同作用.     

加用马来酸桂哌齐特注射液治疗短暂性脑缺血发作疗效观察

目的:探讨加用马来酸桂哌齐特注射液治疗短暂性脑缺血发作的疗效。方法:将80例短暂性脑缺血发作患者,随机分为治疗组40例和对照组40例,治疗组在综合治疗的基础上应用加用马来酸桂哌齐特注射液,两组进行血液流变学、经颅多普勒(TCD)及临床疗效对比。结果:治疗组总有效率、血液流变学、TCD结果均优于对照组,两组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:马来酸桂哌齐特注射液治疗短暂性脑缺血发作疗效确切,值得临床推广。     

芦荟凝胶对烧烫伤创面的促愈作用

目的 观察芦荟凝胶对烧烫伤创面愈合及瘢痕形成的影响。方法 将100例烧烫伤患者,其中男性55例,女性45例,年龄15~65岁,平均为(37.5±3.2)岁,随机分为对照组和治疗组各50例,采用相同的方法清创处理,暴露或包扎治疗,治疗组用湿润烧伤膏加芦荟凝胶治疗, 对照组用湿润烧伤膏治疗,将药物均匀涂抹在创面,厚度约为1 mm,每天3次,观察2组患者创面愈合时间、感染率、瘢痕形成、色素沉着及不良反应等情况。结果 治疗组和对照组的平均创面愈合时间分别为(10.2±1.1)d和(16.7±1.9)d,感染率分别为4%和16%,瘢痕形成率分别为4%和22%,治愈率分别为96%和72%,色素沉着数分别为9和23,2组患者都没有出现明显的不良反应现象,2组观察指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 芦荟凝胶对烧烫伤创面具有明显的促愈作用,并能减少瘢痕的形成。     

我院2003年~2005年抗感染药物利用分析

目的:评价我院抗感染药物的应用现状及发展趋势。方法:对我院2003年~2005年抗感染药物的销售金额、用药频度等数据进行回顾性分析。结果:抗感染药物销售金额逐年增长,其增长率较西药总体增长率低;头孢菌素类药物和喹诺酮类药物的销售金额排序各年均位于抗感染药物的前2位;所用抗感染药物多数为国产药,大部分为国家基本药物。结论:我院抗感染药物用药结构基本合理,使用逐年减少,符合抗感染药物用药趋势。     

基于~1H-NMR的布洛芬缓释片和乳膏含量测定方法研究

目的:以基准物非那西汀为内标,建立布洛芬缓释片和布洛芬乳膏中布洛芬含量的核磁共振氢谱(1H-NMR)测定方法。方法:选定1H-NMR的脉冲程序zg 30,氢谱宽度6.009 k Hz,脉冲宽度11.95μs,延迟时间6.50μs,采样温度27℃,采样次数32次。结果:以布洛芬中δ2.46的峰为定量峰,非那西汀δ2.16的峰为内标峰,内标物非那西汀浓度为4.02 mg·m L-1,布洛芬质量浓度在1.0~8.0 mg·m L-1范围内具良好的线性关系Y=6.433X-0.181 3(r=0.999 6);缓释片和乳膏的平均加样回收率及其RSD分别为99.4%、0.88%(n=9)和100.2%、1.9%(n=9),测定布洛芬乳膏和布洛芬缓释片含量分别为95.1%、101.6%,与标示量相符。结论:该法经方法学验证可用于布洛芬制剂的含量测定。