氧化低密度脂蛋白诱导Zucker大鼠肾小球系膜细胞中NF-κB活性的变化

目的 :研究氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)对体外培养的Zucker大鼠肾小球系膜细胞 (GMC)核因子κB (NF κB)活性的影响以及NF κB的活性变化与大鼠鼠龄及基因型的相关性。方法 :(1)将 3月龄和 10月龄Zucker肥胖大鼠及Zucker瘦型大鼠的GMC(O3m、O10m,、L3m和L10m)进行传代培养。 (2 )采用电泳迁移率变动分析 (EMSA)和超迁移率实验 (GSA) ,检测不同浓度及不同时间相的Ox LDL对GMC中NF κB活性的影响及其亚单位p5 0和p6 5的变化。利用Westernblot检测Ox LDL刺激后NF κB的核转位。结果 :Ox LDL刺激后 ,O3m、O10m及L3m3组GMC中NF κB的活性均明显强于对照组 (P <0 .0 1) ;L10m组与对照组相比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。随着Ox LDL浓度的增加和刺激时间的延长 ,GMC中NF κB活性也相应增强 ,5 0mg/L的Ox LDL刺激 4h时 ,NF κB的活性强度达最高峰。Ox LDL主要激活NF κB的p6 5及p5 0亚单位 ;各组NF κB的活性相比较 :O3m 组高于O10m组 ,O3m组高于L3m组及O10m组高于L10m组 (P均 <0 .0 1) ;L3m组NF κB的活性高于L10m组 (P <0 .0 5 ) .结论 :Ox LDL可诱导Zucker大鼠GMC中NF κB活化 ,且呈时间和浓度依赖性 ;活性强度与大鼠的基因型及鼠龄密切相关。Ox LDL诱导的NF κB活化在Zucker肥胖大鼠的早期肾损害中起着更为重     

珍珠层水溶性提取物对人骨髓基质细胞成骨性分化的诱导作用

目的:探讨珍珠层水溶性提取物(WSM)对人骨髓基质细胞的诱导作用。方法:原代培养人骨髓基质细胞,条件培养基和WSM分别作用于第3代细胞,对照组不加处理因素。倒置显微镜观察细胞在施加处理因素后的生长状态;采用钙钴法染色检测AKP表达;应用RT-PCR方法检测BMP-2等生长因子表达;应用茜素红染色检测骨髓基质细胞的矿化结节形成情况。结果:施加处理因素第7d,WSM组、条件培养基组的BMP-2表达水平较对照组明显增加;WSM组及条件培养基组TGF-β1表达量较对照组相比未见差异。施加处理因素第7d,WSM组及条件培养基组骨髓基质细胞AKP染色明显,与对照组相比差异显著。每高倍视野阳性细胞数,条件培养基组、WSM明显多于对照组,差异具有显著性(P<0.01);加入处理因素18d,条件培养基组可见典型红色钙化结节形成,WSM组也可见到钙结节形成,但没有条件培养基组典型,对照组偶有零星钙化结节形成。结论:WSM可以促进体外培养的人骨髓基质细胞成骨性分化进程,具有一定的骨诱导作用。     

CCKB受体诱发的小鼠神经元蛋白质磷酸化的研究

目的：从蛋白质可逆磷酸化修饰的角度初步勾勒出CCK_B型受体介导的胞内信号转导途径。方法:培养的小鼠大脑皮质神经元分为实验组、对照组和受体拮抗剂组，在无磷培养基加入 ［32P］-NaH₂PO₄标记细胞中的磷蛋白后，刺激组给予CCK₈（10^-7 mol/L），对照组加入等量的无磷培养基，受体拮抗剂组在分别加入CCK_A型、CCK_B型受体拮抗剂L364 718、L365 260以及L364 718＋L365 260，浓度均为10^-8 mol/L，孵育10 min后，再加入10^-7 mol/L CCK₈，37 ℃作用60 min，液氮中终止磷酸化反应。裂解细胞提取蛋白质，双向电泳分离，放射自显影7d后，获得磷酸化蛋白的放射自显影双向电泳图谱。采用PDQuest 2D分析软件对图谱进行差异分析，并在Swiss-Prot蛋白质数据库和自建磷蛋白数据库中查询定性。结果:CCK₈作用60 min后，小鼠神经元CCK₈信号转导相关磷酸化蛋白有：多种蛋白激酶、细胞信号分子、生长因子受体、转录因子等。加入L364 718后，神经元中PKCδ、P55G等的磷酸化水平降低，加入L365 260后， PKCα、PKGβ、OGFR、EGFR等的磷酸化水平呈现不同程度的降低，表明皮质神经元中CCK_B受体介导的信号转导更复杂。结论:CCK_A型、GGK_B型受体均可介导CCK₈在神经元的信号转导，但CCK_B型受体可能发挥了更重要的作用，其介导的信号途径可能包括：肌醇磷脂信使系统、cAMP-PKA途径、MAPK途径、JNK途径、PI3K-PKB途径和cGMP-PKG途径。     

肝纤维化标志物在慢性肝病中的临床意义

为探讨肝纤维化标志物Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)和层粘连蛋白(LN)在慢性肝病肝纤维化的诊断和疗效观察中的临床意义, 采用RIA对52例慢性肝病患者, 42名健康对照者, 38例慢性肝病患者经保肝抗纤维化治疗后血清中的PCⅢ、HA、C-Ⅳ和LN进行检测, 同时与对照组和治疗后进行对比分析.慢性肝病患者血清PCⅢ、HA、C-Ⅳ和LN有不同程度升高, 与对照组比较差异显著(P＜0.05),38例慢性肝病治疗后血清PCⅢ、HA、C-Ⅳ和LN都有不同程度的下降, 与治疗前比较差异显著(P＜0.05).血清PCⅢ、HA、C-Ⅳ和LN的测定对慢性肝病肝纤维化的诊断及疗效观察具有重要的临床意义.     

豚鼠过敏性脑脊髓炎CNS中IL-1R的表达

目的 探索中枢神经系统脱髓鞘疾病进程中IL－1R的表达与神经胶质细胞活化的关系。方法 用牛脊髓髓鞘碱性蛋白加完全福氏佐剂对豚鼠进行免疫,诱发实验性过敏性脑脊髓炎（EAE）模型,采用免疫组化方法对EAE不同时期中枢神经系统中IL－1R的表达进行研究,同时采用抗蓖 凝集素RCA－1标记小胶质细胞、抗胶质纤维酸性蛋白标记星型胶质细胞。结果 在EAE症状出现之前3d至临床高峰期,小胶质细胞样细胞呈现IL－1R免疫反应阳性,表达IL－1R的星型胶质细胞样细胞呈活化状态,而恢复期则主要为星型胶质细胞样细胞呈现免疫反应阳性。结论 在EAE不同时期表达IL－1受体的细胞型不同与不同时期神经胶质细胞的活化类型有关,即与EAE早期小胶质细胞的活化和恢复期星型胶质细胞增生有关。     

小儿鼻颅底针形内窥镜的检查与手术

目的：探讨应用针形内窥镜对小儿鼻颅底疾病进行探查与手术的方法及疗效。方法：在外径１．９ｍｍ的进口针形内窥镜及电视同图像系统监视下,对８例小儿（７ｄ￣１２岁）鼻颅底有关疾病进行探杳与手术。结果：先天性后鼻孔闭锁３例中,１例好转,３例痊愈。外伤性脑脊液鼻漏１例,经修补痊愈先天性脑膜脑膨出２例,确诊后１例暂缓治疗。另１例行内窥镜手术痊愈。颅底神经母细胞瘤２例取材作病理检查确诊。结论：在电视图像监视下应用     

STR-PCR方法检测贵州小型香猪遗传变异性的研究

目的 准确分析贵州小型香猪种群遗传变异及近交程度。方法 采用１０对短串联重复序列（ＳＴＲ）引物,对贵州小型香猪个体进行ＰＣＲ检测。结果 在检测到的８８个有效等位基因型中,纯合基因型５０个,占５５．７％。个体平均杂合率为０．４０８１,位点平均杂合率为０．５５６２。结论 贵州小型香猪具有一定遗传稳定性,符合封闭群动物遗传学特征。     

EFFECTS OF MICROWAVE TREATMENT ON THE LYMPHOCYTESUBSETS IN CASES OF CHRONIC LYMPHEDEMA OF EXTREMITIES

R68llm6 Objectif Pour determiner l'dtat immunitaire des sons-groups l~taires T des malades aveclwtoeddlne chronique des extremitys et l' effet du traitement per micrreondes. ANt~ ie malades avec Iy7nphedimedes extradites(n = 20 ) et ies volontaires no~ux (n = 10 ) out ate studies per FITC on PHmerque MOAbs et cytometrie dcouleur double pour erminer ies changements des Phenotype l~taires T chez ies malades avec lpephoeddnZe aunt et aprdstraitement. ~flats Le rdsultat a montrd que ie pourc…     

13年室间质控菌株鉴定工作的实践和体会

为了提高菌株鉴定水平, 我们自1985～1998 年参加了省临检中心细菌室间质控工作, 共鉴定下发菌株142 株,鉴定正确131 株(占92.25% ), 误检11 株(7.75% )。本文总结了鉴定工作的经验, 并对误检原因进行分析。认为理论、实践和学科新进展是提高鉴定水平的关键     

2-(4-氨基-3-氯-5-三氟甲基苯基)-2-(叔丁氨基)-乙醇盐酸盐对气道平滑肌的松弛作用

目的：研究2-(4-氨基-3-氯-5-三氟甲基苯基)-2-(叔丁氨基)-乙醇盐酸盐(SPFF)对豚鼠气道平滑肌的松弛作用。方法：以盐酸异丙肾上腺素为对照考察SPFF对离体豚鼠气管条的松弛作用，及对离体豚鼠左心房的正性变时作用，并使用离体气管条考察特异性β2受体阻滞剂ICI118551对SPFF的拮抗作用。以沙丁胺醇为对照考察SPFF下对豚鼠药物引喘的保护作用。通过放射配基竞争结合实验，测定了SPFF对肺组织β受体的特异结合。以蛋白竞争结合法考察了SPFF对肺内CAMP含量的升高作用。结果：SPFF对离体豚鼠气管条的松弛作用与异丙肾上腺素相当，且这一作用可被ICI 118551竞争性拮抗，而SPFF对离体豚鼠左心房的正性变时效应为异丙肾上腺素的60％，SPFF对β2受体的选择性是异丙肾上腺素的163倍。SPFF下对药物引起豚鼠喘息的保护作用比沙丁胺醇强约7倍，对肺内β受体的结合能力分别是异丙肾上腺素的4倍和沙丁胺醇的约200倍，而对肺组织内cAMP的升高作用约相当于同剂量沙丁胺醇的3倍。结论：SPFF是-种强效、高选择性的β2受体激动剂。