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91.
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用噬菌体肽库筛选重组日本血吸虫线粒体相关蛋白的表位 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:筛选和鉴定重组的日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj38的表位。方法:用纯化的rSj338/26GST免疫家兔获得抗rSj338/26GST的多克隆抗体IgG,将抗体进一步纯化,获得抗rSj338单特异多克隆抗体IgG。用纯化抗rSj338抗体对噬菌体12肽库进行5轮免疫学筛选,挑取克隆。采用Western blot免疫识别,核苷酸序列测定分析其获得的表位并与rSj338/26GST进行同源性比较。将获得的不同表位的阳性克隆分别免疫小鼠,并采用Western blot及dot-ELISA方法筛选能刺激小鼠产生较高滴度抗rSj338抗体的阳性克隆,并将阳性噬菌体免疫的小鼠血清对纯化的rSj338/26GST,26GST,日本血吸虫成虫及虫卵抗原进行Western blot识别。结果:经5轮免疫学筛选后挑取的32个克隆,用Western blot方法30个克隆能被抗rSj338抗体识别,核苷酸序列分析发现共有11种表位,与rSj338无一级结构的同源性。经动物免疫初步实验筛选。共获得4个免疫原性较强的阳性克隆,其免疫鼠血清均可识别rSj338/26GST,日本血吸虫成虫及虫卵抗原。结论:获得了4种日本血吸虫中国大陆株线粒体相关蛋白rSj338的表位,均为模拟表位,这将为日本血吸虫病的疫苗研究开辟新的途径。 相似文献
93.
近年来 ,脑功能成像技术发展迅速 ,已在脑科学研究中占有重要地位。研究中通常需要将同一被试的多种模式成像结果或同一模式的时间序列结果结合起来分析 ,首先要解决的问题就是几幅图像的严格对齐问题 ,即所谓的图像配准。在模拟退火算法和其它工作的基础之上 ,较好的解决了图像配准中的连续变量全局优化问题 ,通过基于点的配准方法 ,实现了时间序列脑功能图像的高精度配准。 相似文献
94.
人源腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段及其全抗体的研制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 运用噬菌体表面表达技术,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞。提取总RNA,逆转录cDNA,聚合酶链反应扩增人IgG Fab轻、重链基因,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段,并在E.coli中进行分泌性表达。通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体,并进行序列测定。然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC-L-Fc上。转染昆虫sf-9细胞,利用杆状病毒,昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达,免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白。结果 分离到一株Fab克隆AAVs-31,腺病毒伴随病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性,间接免疫荧光试验呈阳性,序列分析结果表明是一新的序列,所获得的基因为人源IgG Fab基因。由Gamma链和Kappa链组成。表达的全抗体ELISA反应、免疫荧光反应和间接免疫荧光试验均为阳性,免疫沉淀试验结果显示它结合病毒颗粒,不结合任一VP1、VP2、VP3单独衣鞘蛋白。结论 用噬菌体表面表达技术首次获得了抗腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段,并在真核系统中表达了其全抗体,它们识别的可能是衣鞘蛋白组装时形成的表位。 相似文献
95.
高强度聚焦超声在医学领域中应用的新进展 总被引:1,自引:0,他引:1
本文综述了国内外在高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)技术方面研究与应用的新进展。介绍了HIFU的治疗功能原理,特别给出了焦斑半径的具体计算公式和对相关组织的热效应、空化效应、机械效应,辐照效应等损伤机理,重点研究了热效应随声波频率及声强变化的规律。给出了HIFU的一般试验模型即分层组织模型以及HIFU应用与临床的情况。重点研究了HIFU源,主要讨论了换能器的聚焦方式(1)球面自聚焦换能器,(2)声透镜聚焦换能器,(3)大功率多元超声换能器,(4)电子扫描或相控阵列聚焦换能器,以及频率选择与目标深度和辐照强度的关系,并指出与其匹配的几类聚焦换能器的优缺点,列举了HIFU技术在泌尿科、肿瘤学、神经外科、眼科、妇科、止血以及其他医学领域中的最新应用。最后评价了目前HIFU在治疗方面的优势与某些不足以及可能改进的有效措施.展望了HIFU技术广阔的应用前景. 相似文献
96.
抗磺胺嘧啶单克隆抗体的制备及其ELISA检测试剂盒的建立 总被引:16,自引:1,他引:16
目的 :制备抗磺胺嘧啶 (SD)的单克隆抗体 (mAb) ,并研制SD快速检测试剂盒。方法 :以SD BSA的偶联物作为抗原免疫BALB/c小鼠 ,采用杂交瘤技术制备抗SD的mAb。并用抗SDmAb和SD HRP酶标抗原 ,建立一种可检测样品中的游离SD分子的竞争法ELISA。结果 :获得 5株可分泌抗SDmAb的杂交瘤细胞 1A1、1B8、1E4、2C1和 3D9。其中 1A1、1B8和 1E4为IgG1,2C1和 3D9为IgG2。试剂盒的半数抑制率 (I5 0 )为 9.3μg/L ,理论最低检出量达到 0 .6μg/L ,对于不同样品中SD的回收率均高于 60 %。除与SD反应以外 ,该试剂盒对其他磺胺类药物检测的交叉反应均小于 3 %。结论 :成功地制备了抗SD的mAb ,并建立了一种可快速检测各种样品中SD的竞争ELISA试剂盒 相似文献
97.
Debelenko LV; Brambilla E; Agarwal SK; Swalwell JI; Kester MB; Lubensky IA; Zhuang Z; Guru SC; Manickam P; Olufemi SE; Chandrasekharappa SC; Crabtree JS; Kim YS; Heppner C; Burns AL; Spiegel AM; Marx SJ; Liotta LA; Collins FS; Travis WD; Emmert-Buck MR 《Human molecular genetics》1997,6(13):2285-2290
Lung carcinoids occur sporadically and rarely in association with multiple
endocrine neoplasia type 1 (MEN1). There are no well defined genetic
abnormalities known to occur in these tumors. We studied 11 sporadic lung
carcinoids for loss of heterozygosity (LOH) at the locus of the MEN1 gene
on chromosome 11q13, and for mutations of the MEN1 gene using dideoxy
fingerprinting. Additionally, a lung carcinoid from a MEN1 patient was
studied. In four of 11 (36%) sporadic tumors, both copies of the MEN1 gene
were inactivated. All four tumors showed the presence of a MEN1 gene
mutation and loss of the other allele. Observed mutations included a 1 bp
insertion, a 1 bp deletion, a 13 bp deletion and a single nucleotide
substitution affecting a donor splice site. Each mutation predicts
truncation or potentially complete loss of menin. The remaining seven
tumors showed neither the presence of a MEN1 gene mutation nor 11q13 LOH.
The tumor from the MEN1 patient showed LOH at chromosome 11q13 and a
complex germline MEN1 gene mutation. The data implicate the MEN1 gene in
the pathogenesis of sporadic lung carcinoids, representing the first
defined genetic alteration in these tumors.
相似文献
98.
目的 了解某三甲专科医院血源性病原体职业暴露发生现况,为降低职业暴露风险采取有效防控措施提供参考。方法 利用某三甲专科医院2018—2020年发生的职业暴露相关数据进行回顾性研究,从职业暴露的工作类别、工龄、种类、病原体类别等方面开展统计分析,使用Fisher确切概率法进行组间比较。结果 2018—2020年,该院共发生血源性病原体职业暴露114例,其中锐器伤暴露94例,占比最高(82.5%);护士发生职业暴露64例,占比最高(56.1%);工龄≤1年人员发生职业暴露70例,占比最高(61.4%);职业暴露主要发生在处理丢弃针头等锐器物(35.9%)和检查、治疗及护理操作(22.8%)等环节。卡方检验结果显示,不同职业类别人员发生职业暴露的类型不同,医技人员和护士发生血液/体液暴露比例更高(x2=9.774,P<0.05)。对所有发生职业暴露的工作人员建立健康随访档案,定期追踪监测,尚未发现人员因职业暴露而感染血源性疾病。结论 通过对低年资医务人员和工勤人员职业防护的精准培训、强化标准预防和标准化操作规程、提供安全用具、完善血源性病原体职业暴露的监测和防护体系等综合性集束化措施,降低职业暴露风险,为采取有效防控提供依据。 相似文献
99.
目的:基于对江苏省大型三甲医院医患群体的调查,从患者总体就医认知、就医心理和期望、就医行为与感受等方面,研究患者就医特征,并对构建理性就医行为提出参考建议。方法:采用随机抽样方法,对苏北、苏中及苏南9家医院的医患群体进行问卷调查,采用描述性分析和卡方检验等方法对医患双方的回答进行处理。结果:在患者总体就医认知方面,大部分患者缺乏对就医义务的认知和担当;患者对医学带教和医学发展认知存在局限,对就诊结果期望过高是造成医患纠纷的主要原因;对暴力伤医的犯罪行为存在错误认知。在就医心理和期望方面,患者在就诊时最关注与疾病诊疗相关内容,最担心出现医疗过失或差错;但医方认为患者更关注诊疗费用。患者的心理压力负担普遍超过了身体疾病带来的痛苦,医务人员的服务态度对患者的心理影响较大。在就医行为与感受方面,患者的就医选择与国家政策不契合;患者对良好医患关系、服务态度的期望值较高;医患双方倾向形成若朋友般的关系;患者在医患沟通中往往处于被动,医方良好的倾听和解释技巧可以让患者获得良好的沟通感受。结论:患者群体的就医认知存在缺陷,非理性就医思维与行为表现明显,医患双方的信息不对称和角色差异使得医患关系和医患信任度面临较大挑战。政府部门、教育与卫生行政部门应尽早从完善法律、普及患者公众教育、加强医生培训等方面帮助患者群体回归理性就医行为。 相似文献
100.
目的:研究益糖康通过抑制糖基化终末产物(AGE)/糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路纠正骨骼肌细胞过度凋亡进而改善胰岛素抵抗(IR)的作用机制。方法:(1)体外实验,制备益糖康含药血清,将C2C12细胞设置空白组、模型组、益糖康含药血清高、中、低剂量(40、20、10 g·kg-1)组、RAGE抑制剂组,除空白组外,用棕榈酸诱导C2C12 IR模型细胞,然后分别采取相应的干预方式后检测各组细胞的活性及葡萄糖消耗量水平,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测重要凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53、胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]的mRNA及蛋白表达水平。(2)体内实验,将96只符合研究标准的Wistar大鼠设置空白组、对照组、益糖康高、中、低剂量组(40、20、10 g·kg-1)、吡格列酮(1.35 mg·kg-1)组,运用高糖高脂糖尿病模型诱导饲料联合... 相似文献