2型糖尿病与动脉粥样硬化相关性研究进展

本文介绍了2型糖尿病及动脉粥样硬化相关性的分析研究,主要从基因多态性、炎性因子、血管紧张素Ⅱ1型受体、胰岛素抑制、糖化血红蛋白等方面阐述,分析了二者之间可能存在的共同基础病变机制,可望通过二者相关作用的研究,为早期发现糖尿病、动脉粥样硬化提供有力证据,为预防治疗疾病提供新的方法.     

一例罕见P表型个体家系研究

目的 研究1例广东籍罕见P表型的血清学特点及其家系的分子遗传背景.方法 用血清学方法鉴定P表型,提取先证者及其家系成员的静脉血基因组DNA,采用PCR方法扩增.α-1,4半乳糖基转移酶[α-(1,4)galactosyltransferase,A4GALT]基因第3外显子,并对扩增产物进行直接测序分析.此外,用测序方法针对该家系中发现的变异在100名健康献血者中进行筛查.结果 先证者及其家系成员中共有5人为P表型,A4GALT基因都存在纯合的点突变c.100G>A(P.Va134Ile)及组合缺失插入突变c.418-428delllins34(P.Gln139Trpfs72);家系成员中有1人为P2表型,两条等位基因中一条为上述突变型,另一条为野生型.健康献血者中发现5名携带c.100G>A杂合突变,未发现c.418-428del11ins34突变.结论 A4GALT基因的纯合缺失插入突变导致无功能的等位基因是该家系罕见p表型的分子遗传基础.测序结果表明p表型的遗传方式为常染色体隐性遗传.     

Identification of Specific Pluripotent Stem Cell Death—Inducing Small Molecules by Chemical Screening

A potential application of embryonic and inducible pluripotent stem cells for the therapy of degenerative diseases involves pure somatic cells, free of tumorigenic undifferentiated embryonic and inducible pluripotent stem cells. In complex collections of chemicals with pharmacological potential we expect to find molecules able to induce specific pluripotent stem cell death, which could be used in some cell therapy settings to eliminate undifferentiated cells. Therefore, we have screened a chemical library of 1120 small chemicals to identify compounds that induce specifically apoptotic cell death in undifferentiated mouse embryonic stem cells (ESCs). Interestingly, three compounds currently used as clinically approved drugs, nortriptyline, benzethonium chloride and methylbenzethonium chloride, induced differential effects in cell viability in ESCs versus mouse embryonic fibroblasts (MEFs). Nortriptyline induced apoptotic cell death in MEFs but not in ESCs, whereas benzethonium and methylbenzethonium chloride showed the opposite effect. Nortriptyline, a tricyclic antidepressant, has also been described as a potent inhibitor of mitochondrial permeability transition, one of two major mechanisms involved in mitochondrial membrane permeabilization during apoptosis. Benzethonium chloride and methylbenzethonium chloride are quaternary ammonium salts used as antimicrobial agents with broad spectrum and have also been described as anticancer agents. A similar effect of benzethonium chloride was observed in human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) when compared to both primary human skin fibroblasts and an established human fibroblast cell line. Human fibroblasts and hiPSCs were similarly resistant to nortriptyline, although with a different behavior. Our results indicate differential sensitivity of ESCs, hiPSCs and fibroblasts to certain chemical compounds, which might have important applications in the stem cell-based therapy by eliminating undifferentiated pluripotent stem cells from stem cell-derived somatic cells to prevent tumor formation after transplantation for therapy of degenerative diseases.     

Follistatin-like protein 1的生物学作用及其研究进展

Follistatin-like protein 1(FSTL1)是一种细胞外的糖蛋白,其参与细胞多种生物学过程,包括细胞增殖、凋亡、新陈代谢、分化、免疫反应及内分泌功能等。FSTL1存在于在大部分哺乳动物中,可由多种细胞分泌。通过激活PI3K-Akt、雌激素受体及其信号通路等发挥作用。目前关于FSTL1在炎症反应中的作用尚不够明朗。近年FSTL1被认为参与了机体自身免疫性疾病、移植排斥及肿瘤等疾病的发生。因而,拓展FSTL1在临床上的研究有着重要意义。     

TNF-α诱导类风湿关节炎滑膜细胞NF-κB信号通路活化的探讨

目的研究TNF-α对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞NF-κB信号转导通路活化的影响。方法原代培养类风湿性关节炎滑膜细胞;应用Western blot检测滑膜细胞p65-NF-κB和ΙκBα蛋白的表达变化;应用免疫荧光技术分析NF-κB核移位的变化。结果 TNF-α刺激不同时间后p65-NF-κB蛋白在滑膜细胞核内表达增加,而在胞浆表达减少,30 min时最明显;同时,免疫荧光显示TNF-α可促使NF-κB向滑膜细胞核内移位;TNF-α刺激20 min后ΙκBα蛋白降解明显增加。结论TNF-α诱导类风湿关节炎滑膜细胞NF-κB信号通路活化,可能与类风湿关节炎炎症进程有关。     

CTGF shRNA表达质粒的构建及对大鼠肌源性干细胞CTGF表达的影响

目的 观察针对结缔组织生长因子(CTGF)所构建的短发卡RNA(shRNA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠肌源性干细胞(MDSCs)表达CTGF的影响.方法 针对CTGF mRNA上的序列,体外合成表达shRNA的DNA质粒载体pGenesil-3-shRNA并行测序鉴定;从新生SD大鼠骨骼肌中分离培养MDSCs并鉴定.实验分成对照组(MDSCs+TGF-β1培养),实验组(MDSCs+ TGF-β1+pGenesil-3-shRNA培养).观察shRNA质粒转染结果.利用Real-Time PCR及Western Blot检测CTGF mRNA和CTGF蛋白表达.结果 正确构建了靶向CTG,F基因的质粒载体pCenesil-3-shCTGF;大鼠MDSCs 48 h、72h和96h时实验组的CTGF mRNA及蛋白质水平均低于对照组(P＜0.05).结论 针对CTGF构建的pGenesil-3-shCTGF能够转染MDSCs,并在48h、72h和96h时能明显降低TGF-β1刺激MDSCs所产生CTGF的表达.     

类风湿关节炎滑膜成纤维细胞通过高表达RANKL促进破骨细胞分化及活化

目的探讨类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RA-FLS）对破骨细胞（Oc）分化和活化的作用及机制。方法活动期RA滑膜体外分离培养FLS,以骨关节炎（OA）-FLS为对照,分别与健康人外周血单核细胞（MNC）共培养后,抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色鉴定Oc并计数、甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝情况。细胞免疫荧光染色检测FLS RANKL表达,Real-time PCR及W estern blot检测RANKL和OPG mRNA、蛋白表达。结果 RA-FLS与MNC共培养7 d时TRAP＋且细胞核≥3个的Oc很少,14 d时见较多的Oc,21 d甲苯胺蓝染色示清晰的骨吸收陷窝,而OA-FLS与MNC共培养后未见Oc,也未见骨吸收陷窝。细胞免疫荧光染色示RA-FLS较OA-FLS高表达RANKL（P〈0.05）。RA-FLS RANKL mRNA和蛋白表达较OA-FLS明显增高,而OPG mRNA和蛋白表达则明显降低,RANKL/OPG mRNA和蛋白比率较OA-FLS明显增高（均P〈0.05）。结论 RA-FLS可能通过高表达RANKL,促进外周血MNC向Oc分化,并促进Oc的骨吸收功能。     

吴茱萸次碱联合乌司他丁治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的 观察吴茱萸次碱对重症急性胰腺炎(SAP)的干预作用以及与乌司他丁联用的疗效.方法 50只SD大鼠随机均分为5组:假手术组,模型组,乌司他丁组,吴茱萸次碱组,乌司他丁+吴莱萸次碱组,每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠以5％牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制作SAP模型并给予相应的处理.造模后24 h,对大鼠胰腺组织进行病理学检查,并检测血清淀粉酶活性和TNF-α和IL-6水平.结果 除假手术外,各用药组病理学评分均明显低于模型组,且联合用药组评分最低(均P ＜0.05).各用药组血清淀粉酶活性显著低于模型组(P＜0.05),且联合用药组评分最低(均P ＜0.05).各实验组和模型组大鼠血清TNF-α和IL-6水平均明显高于假手术组(均P ＜0.05),且联合用药组评分最高(均P＜0.05).结论 吴茱萸次碱对大鼠SAP具有治疗作用,其机制可能与改善胰腺组织微循环有关;吴茱萸次碱与乌司他丁联用能明显增强对SAP的疗效.     

高脂血症性胰腺炎临床特点分析及治疗方法探讨

目的 探讨高脂血症性胰腺炎的发病特点及诊治方法.方法 分析该科自2005年7月～2011年7月收治的高脂血症性胰腺炎患者的临床资料.结果 全组30例,年龄(33.7±13.4)岁,体质量指数男性(29.5±3.2),女性(23.4±5.6) ;反复发作10例 ;多伴有糖尿病、脂肪肝等疾病.其中轻型23例,重型7例,血三酰甘油平均值重型组较轻型组为高,经治疗后血TG降至5.65 mmol/L以下的平均时间及平均住院天数重型组较轻型组为长.其中有3例重型胰腺炎患者采取血液灌流治疗,其血TG降至5.65 mmol/L以下的时间及平均住院天数均明显缩短.结论 HAP有发病年龄轻、体型肥胖、可以反复发作的临床特点,且多有基础病.HAP在一般急性胰腺炎治疗基础上有其自身特点.