艾灸血浆对离体人胃黏膜上皮细胞损伤的保护作用及其线粒体细胞凋亡通路机制

目的:探讨艾灸血浆对胃黏膜细胞凋亡的影响,揭示艾灸对胃黏膜细胞的保护作用及其信号转导机制。方法:24名健康人随机等分为艾灸穴位组和艾灸非穴位组,分别艾灸中脘、关元和足三里穴及非穴位对照点各10 d。将人体胃黏膜上皮(GES-1)细胞分为空白组、模型组、艾灸穴位血浆组、艾灸非穴位血浆组,采用含8%乙醇的培养液造成GES-1细胞损伤模型,分别加以预先提取的灸前人体血浆、艾灸穴位和非穴位血浆。流式细胞技术检测细胞凋亡率;Western-blot法检测细胞内热休克蛋白70(HSP70)、第二个线粒体来源的胱氨酸酶激活物(Smac)、凋亡诱导因子(AIF)的表达;细胞免疫化学法检测半胱氨酸天冬酸蛋白酶-3、9(Caspase-3、9)的表达。结果:模型组与空白组比较,细胞凋亡率明显增加,HSP70、Smac、AIF、Caspase-3、Caspase-9表达均上调(均P<0.01);艾灸穴位血浆组与模型组比较,凋亡率明显下降(P<0.01),HSP70表达进一步提高(P<0.01),Smac、AIF、Caspase-3、Caspase-9表达下调(均P<0.01);艾灸非穴位血浆组与模型组比较,凋亡率、Smac表达下降,Caspase-3、Caspase-9表达也下调(均P<0.01),但高于艾灸穴位血浆组(P<0.05,P<0.01)。结论:艾灸中脘、关元和足三里穴位后提取的人体血浆能抑制GES-1细胞凋亡,其信号转导通路可能是:促进细胞内HSP70合成,通过线粒体凋亡通路,抑制Smac、AIF表达,同时阻断其与Caspase-9的结合,减少Caspase-3含量,抑制细胞凋亡。     

百令胶囊对哮喘豚鼠骨髓及肺组织CD34+、Eotaxin及CCR3表达的影响

目的:通过观察百令胶囊对支气管哮喘豚鼠骨髓及肺组织中CD34+、Eotaxin及CCR3表达的影响,探讨百令胶囊治疗哮喘的可能机制。方法:健康雄性豚鼠30只随机分成对照组(A组)、哮喘组(B组)及百令胶囊治疗组(C组),每组10只。B、C组以卵白蛋白(OVA)作为抗原腹腔内注射联合雾化吸入复制哮喘模型,末次激发后24 h处死豚鼠,制备豚鼠肺组织病理标本,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织炎症改变;免疫组化检测CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3在肺组织中的表达。结果:哮喘组肺组织CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3的阳性细胞数明显增加;百令胶囊治疗组肺组织中CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达均有不同程度的减轻,与哮喘组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:百令胶囊可通过下调骨髓及肺组织中CD34+祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达水平,发挥其抗气道炎症的作用。     

Louki Zupa decoction attenuates the airway inflammation in acute asthma mice induced by ovalbumin through IL-33/ST2-NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway

ContextAsthma is a common respiratory system disease. Louki Zupa decoction (LKZP), a traditional Chinese medicine, presents a promising efficacy against lung diseases.ObjectiveTo investigate the pathogenic mechanism of asthma and reveal the intervention mechanism of LKZP.Materials and methodsForty-eight female Balb/c mice were randomly divided into 6 groups: normal control group (NC), ovalbumin (OVA)/saline asthma model group, OVA/LL group, OVA/LM group, OVA/LH group and OVA/DEX group (n = 8 per group). The asthmatic mice were modelled through intraperitoneal injecting and neutralizing OVA. LKZP decoction was administrated by gavage at the challenge stage for seven consecutive days (2.1, 4.2 and 8.4 g/kg/day). We investigated the change in lung function, airway inflammation, mucus secretion and TH-1/TH-2-related cytokines. We further verify the activated status of the IL-33/ST2/NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway.ResultsLKZP was proved to improve asthmatic symptoms, as evidenced by the down-regulated airway resistance by 36%, 58% and 53% (p < 0.01, p < 0.001 vs. OVA/saline group), up-regulated lung compliance by 102%, 114% and 111%, decreased airway inflammation and mucus secretion by 33%, 40% and 33% (p < 0.001 vs. OVA/saline group). Moreover, the content of cytokines in BALF related to airway allergy (such as IgE) and T helper 1/T helper 2 cells (like IL-2, IL-4, IL-5, IL-13, TNF-α and IFN-γ), were also markedly reduced by 13–65% on LKZP intervention groups compared with model group. Mechanistic research revealed that the IL-33/ST2-NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway was activated in the OVA/saline group and LKZP significantly down-regulated this pathway.Discussion and conclusionLKZP improves lung function, airway inflammation, mucus secretion and correct immune imbalance by intervening with the IL-33/ST2-NF-κB/GSK3β/mTOR signalling pathway, presenting a promising therapeutic choice for asthma.     

活血解毒方对缺氧/复氧所致心肌细胞凋亡的影响＊

目的 研究活血解毒方对缺氧/复氧（H/R）所致的心肌细胞凋亡的影响。方法 体外培养H9C2心肌细胞并分成正常对照组（Control组）、缺氧复氧组（H/R组）、H/R + 活血解毒中药组、LY294002组和活血解毒中药 + LY294002组，其中正常对照组给予DMEM培养基培养，缺氧复氧组给予缺氧4 h、复氧6 h处理，缺氧复氧 + 活血解毒中药组、LY294002组和活血解毒中药 + LY294002组分别给予活血解毒中药、LY294002、活血解毒中药配合LY294002预处理24 h，然后均给予缺氧4 h、复氧6 h处理。采用CCK8检测各组心肌细胞的存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡水平，电镜观察各组心肌细胞中线粒体、自噬体的变化，Western Blot检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved caspase3）、β-连环蛋白（β-Catenin）、p-p65、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）蛋白的表达。结果 活血解毒方预处理显著增加H/R诱导的H9C2心肌细胞凋亡，降低凋亡相关蛋白Cleaved caspase3、β-Catenin、p-p65表达，增加Bcl-2表达。结论 活血解毒方可通过抑制细胞凋亡，降低缺氧/复氧所致的心肌细胞损伤，其作用机制可能与PI3K信号通路相关。     

安胃汤免煎剂对实验性胃溃疡大鼠血清胃泌素、表皮生长因子的影响

目的:通过实验性乙酸大鼠胃溃疡模型,研究安胃汤免煎剂防治慢性胃溃疡机理。方法:采用放射免疫方法观察安胃汤免煎剂对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型愈合时血清胃泌素、表皮生长因子的影响。结果:与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组均可降低血清胃泌素(P<0.01)和提高血清表皮生长因子(P<0.01),安胃汤大剂量组与雷尼替丁组相比差异有显著性意义(P<0.05)。结论:安胃汤发挥抗溃疡作用可能通过降低血清胃泌素和提高血清表皮生长因子,而减少粘膜攻击因子和增强胃粘膜保护而发挥抗溃疡作用。     

抗痛风胶囊对急性痛风性关节炎的作用及下调关节软骨组织MMP-1蛋白表达

目的:观察抗痛风胶囊对大鼠急性痛风性关节炎(AGA)的治疗作用及对软骨组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)蛋白表达的影响。方法:大鼠足踝关节注射尿酸钠悬液诱导AGA,容积法检测踝关节肿胀程度,HE染色观察关节软骨组织的病理组织学变化,免疫组织化学染色及图像分析检测关节软骨内MMP-1蛋白表达。结果:抗痛风胶囊0.3 mg/kg和1.2 mg/kg连续灌胃给药5d,明显减小AGA大鼠足容积,第5d关节肿胀抑制率高达70%～90%。HE染色后显微镜下观察,可见模型组大鼠足踝关节软骨组织细胞排列紊乱、出现充血、肿胀和关节表面的破坏,抗痛风胶囊治疗后,明显改善其病理组织学变化。免疫组织化学检测可见,与模型组比较,抗痛风胶囊和秋水仙碱(0.8mg/kg)均明显下调软骨细胞MMP-1蛋白的表达,其平均光密度值明显降低。结论:抗痛风胶囊对AGA具有明显治疗作用,且降低AGA大鼠关节软骨组织MMP-1蛋白表达可能该药缓解关节炎症肿胀的主要作用机制之一。     

健脾调肝汤治疗晚期原发性肝癌对生活质量的影响

目的:观察健脾调肝汤治疗晚期原发性肝癌对生活质量的影响。方法:将60例患者随机分成治疗组与对照组各30例,2组患者均采用相同的西药(保肝、降酯、止痛等)治疗;治疗组同时加用健脾调肝汤治疗。2组均治疗1个月为1个疗程,2个疗程后评价疗效。观察2组中医证候变化、生活质量、体重变化、肝功能变化及不良反应。结果:2组中医临床证候变化比较,治疗组与对照组总改善率分别83.3%与60.0%(P0.05);2组治疗后生活质量及体重变化比较,生活质量、体重治疗组高于对照组(P0.05);2组治疗后肝功能变化比较,2组治疗后肝功能3项指标(ALT、AST、TBIL)较治疗前均有明显改善(P0.05),其中ALT、AST水平治疗组较对照组改善更明显(P0.05)。不良反应2组未见明显发生。结论:健脾调肝汤治疗晚期原发性肝癌可改善临床症状,减轻肝损害及不良反应,提高生活质量、延长生存期。     

康艾注射液配合化疗治疗晚期结直肠癌

目的：观察康艾注射液联合FLOFOX4方案化疗在晚期结直肠癌综合治疗中的作用。方法：52例晚期结直肠癌患者随机分成康艾注射液加化疗（治疗组,26例）和单纯化疗组（对照组,26例）,治疗2周期后评价疗效。结果：治疗组有效率（42.3%）稍高于化疗组（34.6%）,但差异无显著性（P〉0.05）。治疗组不良反应中白细胞下降程度、肝功能异常的发生率均明显低于对照组,差异有显著性（P〈0.05）,且治疗组对患者体力状况及中医临床证候的改善均明显优于对照组（P〈0.05）。结论：康艾注射液能一定程度提高晚期结直肠癌患者的近期疗效,减轻化疗毒副作用,改善常见临床症状,提高生存质量。     

茜草饮片炒炭前后止血机制的比较

目的:探讨茜草及茜草炭止血作用机制。方法:比较茜草和茜草炭对小鼠凝血时间、出血时间、血小板计数、毛细血管通透性、肝素和华发林所致病理性出血模型以及大鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)的影响。结果:茜草和茜草炭均能抑制小鼠腹腔毛细血管通透性,均能明显缩短大鼠TT、PT、APTT,但茜草炭作用强于茜草。茜草大小剂量和茜草炭饮片大剂量能提高小鼠血小板计数,明显对抗肝素及华发林的出血作用,茜草作用强于茜草炭。结论:茜草主要通过提高血小板计数,对抗肝素及华发林的出血来发挥止血作用;茜草炭主要通过抑制毛细血管通透性,缩短TT、PT、APTT来发挥止血作用;茜草和茜草炭的止血作用机制不同。