同步荧光—多波长数据线性回归法测定苯酚与间苯二酚

本文提出了基于同步荧光技术的多波长数据线性回归法测定苯酚与间苯二酚,研究了荧光法测定苯酚及间苯二酚的实验条件,考察了溶液酸度、放置时间等对荧光强度的影响。方法用于复方雷琐辛涂剂中苯酚与间苯二酚的同时测定,平均回收率分别为:苯酚,97.18(±2.42)%,间苯二酚,98.15(±2.70)%。     

Urinary prolactin as a reliable marker for preeclampsia, its severity, and the occurrence of adverse pregnancy outcomes

CONTEXT: It has been proposed that preeclampsia may result from of an imbalance in angiogenic factors. Although prolactin (PRL) is mainly related to lactation, it is also involved in other biological functions, including angiogenesis. OBJECTIVE: Our objective was to determine the relationship among preeclampsia, serum and urinary PRL (uPRL) levels, and excretion of antiangiogenic PRL fragments in urine. STUDY DESIGN: Using a cross-sectional design, uPRL and serum PRL levels, and the presence of PRL isoforms were determined in 546 pregnant women: 207 healthy pregnant, 124 with gestational hypertension, 48 with mild preeclampsia, and 167 with severe preeclampsia (sPE). RESULTS: uPRL concentrations were significantly (P < 0.001) higher in preeclampsia (11.99 ng/mg creatinine) than in healthy pregnancy (0.20 ng/mg creatinine) and gestational hypertension (0.19 ng/mg creatinine), and were even higher in sPE compared with mild preeclampsia (21.20 vs. 2.77 ng/mg creatinine, respectively; P < 0.001). Antiangiogenic PRL fragments (14-16 kDa) were detected in 21.6% of urine samples from women with sPE but in none from other groups. Patients with hemolysis, elevated liver enzymes, low platelet count syndrome, and/or eclampsia, placental abruption, acute renal failure, and pulmonary edema exhibited highest uPRL concentrations (P < or = 0.028) and frequency of antiangiogenic PRL fragments in urine (P < or = 0.036). High-serum PRL levels were associated with sPE independently of gestational age, proteinuria, and prolactinuria (P = 0.032). CONCLUSIONS: Preeclampsia is characterized by increased uPRL excretion. uPRL concentrations and their isoforms appear to be suitable markers to assess the severity of preeclampsia and occurrence of adverse outcomes. PRL and and/or its isoforms might be involved in the pathophysiology of preeclampsia.     

对女性运动员月经紊乱认识的进展

目的:认识导致女性运动员月经紊乱的相关因素。资料来源:检索Pubmed最近5年的相关文章,检索词为“osteoporosis,menstruation disturbance,eating disorders,athletics”,限定条件包括English,core clinical journals,female,humans.资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与女性运动员职业疾病相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到45篇相关文献,40篇文献符合纳入标准,排除的10篇文献为内容重复或与运动员无关。符合纳入标准的30篇文献中,6篇涉及运动员进食紊乱,10篇涉及月经紊乱,14篇涉及骨质疏松。资料综合:女性运动员,尤其是要求身材苗条的运动项目的运动员,是进食障碍、闭经和骨质疏松等运动相关疾病的高危人群。高强度的训练加上严格的饮食限制,会造成能量极度缺乏,最终影响黄体激素分泌,引起闭经或月经紊乱。骨密度降低、骨质疏松、应力性骨折及其他骨骼疾病都是运动导致闭经的主要并发症。简单的治疗方法就是增加食物摄入和保持能量平衡,而激素替代疗法的有效性尚无定论。结论:女性运动员进食障碍、月经紊乱以及骨骼疾病间的联系仍需研究,了解女性运动员月经不调的原因及干预措施必将有助于减少该疾病的发生率,而对于运动导致闭经的治疗有待进一步深入。     

新生牛皮胶原蛋白海绵的制备及其体外细胞相容性

目的:采用新生牛皮提取胶原蛋白、制备生物医用胶原蛋白海绵,观察其生物学活性与细胞相容性。方法:实验于2006-05/2007-02在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成。实验方法:①取出生24h内宰杀的新生尕里巴牛犊皮制备胶原蛋白海绵。②将新生牛皮胶原蛋白海绵与黑裘皮羔羊肾F3代成纤维细胞混悬液共培养,分别设胶原海绵材料组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(橡胶塞浸提液)。实验评估:①应用倒置相差显微镜观察细胞形态。②培养20,35d对细胞与胶原蛋白海绵共培养物进行AO染色观察细胞在胶原海绵中的增殖情况。③培养65d后制石蜡切片,行苏木精-伊红染色观察细胞在胶原海绵中的生长情况。结果:①细胞形态观察结果:阳性对照组细胞培养24h细胞圆缩,不贴壁,3d后全部死亡。胶原海绵材料组与阴性对照组细胞形态均正常,细胞贴壁生长良好。随着培养时间的延长,海绵孔隙逐渐变小,细胞数量增加,形态变小,海绵外观从柔软、混浊变得挺拔、透明。②细胞在胶原海绵中的增殖情况:吖啶橙-AO染色显示培养20,35d胶原海绵-羔羊肾成纤维细胞共培养物中有大量细胞存在,并且在胶原蛋白空隙中有大量细胞成团簇状生长。③细胞在胶原海绵中的生长情况:苏木精-伊红染色显示有大量蓝色细胞核和新生的红色胶原纤维。结论:制备的新生牛皮胶原蛋白海绵对岷县黑裘皮羔羊肾成纤维细胞有良好的生物相容性,无细胞毒性。     

局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43表达与滋补肝肾中药的干预效应

目的:观察局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43表达与滋补肝肾中药合剂干预效果的关系。方法:实验于2004-06/2005-06在山东大学医学院药理实验室、山东中医药大学中西医结合肿瘤防治中心实验室完成。雄性Wistar大鼠49只按随机数字表法随机分为假手术组、模型组(分设1,2,3周时间点)、中药组(分设1,2,3周时间点),每组7只。模型组与中药组进行右侧近端大脑中动脉电凝术造成大鼠局灶性脑缺血模型,假手术组行同样开颅术,但不凝闭大脑中动脉,其余操作同模型组。于造模成功后第6天起中药组灌胃给予滋补肝肾中药复方,剂量为9g/(kg·d),余2组分别灌胃给予同等量生理盐水,1次/d。假手术组大鼠于术后1周时麻醉下断头处死,模型组与中药组分别于给药1,2,3周时处死,取材后用免疫组化法观察局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白的表达。结果:纳入大鼠49只,造模不成功或死亡14只,最后每组5只共35只大鼠进入结果分析。模型组生长相关蛋白阳性信号密度值在给药1周、2周及3周组与假手术组比较差异均无显著性意义[(15.7±1.4)%,(15.3±1.3)%,(15.4±1.1)%,(15.1±1.3)%,P>0.05];中药组在治疗1周后生长相关蛋白阳性信号密度值较假手术组及模型组差异尚无显著性,但2周及3周组表达显著增强,与模型组和假手术组比较,差异有显著性意义[(23.4±1.3)%,(24.1±1.4)%,P<0.01]。结论:滋补肝肾中药复健片能增强局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43的表达,从而促进缺血性脑卒中后的神经功能重塑。     

骨髓基质干细胞复合羟基磷灰石-磷酸三钙修复骨缺损过程中的微循环变化

目的:了解骨髓基质干细胞复合羟基磷灰石-磷酸三钙构建组织工程骨修复骨缺损过程中,实验动物血液流变学和骨缺损修复区血流量的变化。方法:实验于2006-05/2007-01在解放军兰州军区总医院脊柱外科实验室完成。①构建组织工程骨:取健康新西兰白兔2只,双侧胫骨结节处穿刺抽取红骨髓8mL,分离培养并诱导骨髓基质干细胞;将复合羟基磷灰石-磷酸三钙支架材料以1×109L-1密度接种经诱导培养的骨髓基质干细胞。②实验方法:选择20只新西兰白兔,制作15mm长的桡骨节段性骨缺损模型,根据植入不同移植材料分为实验组和对照组各10只,实验组植入组织工程骨,对照组植入单纯羟基磷灰石-磷酸三钙。③实验评估:观察动物术后1h、7,14d血液流变学和术后14d骨缺损修复区血流量的变化。结果:20只兔均进入结果分析。①血液流变学结果:术后1h,2组各项指标比较无差异;术后7d,实验组全血黏度、血浆黏度和红细胞聚集指数低于对照组(P<0.05,0.01);术后14d,实验组全血黏度和红细胞聚集指数低于对照组(P<0.01)。②血流量比较:2组右侧桡骨正常皮质骨血流量无差异;实验组左侧骨缺损修复区皮质骨或骨痂血流量高于对照组(P<0.01)。结论:与单纯复合羟基磷灰石-磷酸三钙材料比较,骨髓基质干细胞复合羟基磷灰石-磷酸三钙的组织工程骨可改善骨缺损修复区的微循环。     

原发性高血压患者左室构型与儿茶酚胺的关系

目的：了解原发性高血压心脏超声构型的分型与血浆儿茶酚胺水平的关系。方法：实验于2003—02／2005—07在泰安市中心医院完成。选择102例原发性高血压患者，采用超声心动图（Ganau标准）将患者分为：①正常构型组：左室质量指数及相对室壁厚度均在正常范围。②向心性重构组：左室质量指数正常，但相对室壁厚度增加。③向心性肥厚组：左室质量指数与相对室壁厚度均增加。④离心性肥厚组：左室质量指数增加但相对室壁厚度正常。另选择50名年龄相当的健康查体者做为正常对照组。高血压患者停用降压药2周，所有受检者实验前1d禁用烟、酒、茶及咖啡，禁食12h，于清晨采静脉血10mL，以高效液相色谱法检测其血浆中的肾上腺素及去甲肾上腺素含量。结果：152名研究对象全部进入结果分析。向心性重构组、向心性肥厚组和离心性肥厚组的肾上腺素水平、去甲肾上腺素水平均高于正常对照组及正常构型组（P分别〈0．01），而且向心性重构组〉正常构型组，向心性肥厚组〉向心性重构组，离心性肥厚组〉向心性肥厚组（P〈0．05或0．01）。结论：原发性高血压患者血浆肾上腺素、去甲肾上腺素水平的升高促进了左室构型的发展。     

外括约肌主动收缩放松训练改善肛门失禁患者的肛门节制

目的:观察肛门失禁患者进行外括约肌主动收缩和放松的生物反馈训练后肛门节制功能的变化,分析外括约肌主动收缩训练改善肛门节制的可能机制。方法:于1998-10/1999-05在解放军总医院小儿外科采用CTD-SYNECTICS公司生产的直肠测压仪对27例正常儿童和另12例失禁患儿进行括约肌主动收缩状态下压力的测定,得到外括约肌收缩压力增加值。2004-10/2006-05在解放军总医院小儿外科采用生物反馈训练仪(CTD-SYNECTICS公司生产,通过可视动画形式和可听的声音高低信号形式将直肠肛门动力情况反映出来,通过指导者的语言讲解,配合正确的动画曲线和声音信号的指导训练,纠正异常的直肠肛门动力。)对13例不同年龄段的失禁患者进行括约肌主动收缩和放松的生物反馈训练。其中儿童7例,成人6例。每次外括约肌持续收缩的时间根据患者的耐受程度一般为5～10s,放松10s,完成6～8次上述收缩和放松动作后休息10min。儿童每次持续1～1.5h,成人1.5～2h,平均训练6次。记录首末次训练外括约肌收缩电位平均值的变化;直肠测压获得的距离肛门缘3,2,1cm层面8个方向外括约肌收缩压力的增加值。结果:全部参与实验的正常儿童27例、肛门失禁患儿12例和接受生物反馈训练的失禁患者13例均进入结果分析。①接受生物反馈训练的肛门失禁患者中10例末次训练外括约肌收缩电位的平均值显著大于首次训练(P<0.05),治疗有效率为76.92%(10/13)。②肛门失禁患者生物反馈训练前肛门外观呈开口状态,黏膜轻度外翻;10例经生物反馈训练治疗有效者肛门外观呈关闭状态,黏膜外翻消失。③正常儿童肛门外括约肌收缩状态下,距离肛门缘3,2,1cm层面,各方向括约肌收缩压力增加值分别为,后(6.133±7.263),(9.358±6.652),(9.412±6.628)kPa;右后:(2.611±2.609),(7.131±5.583),(7.116±6.355)kPa;右:(4.000±5.430),(8.810±6.271),(9.343±6.267)kPa;右前:(3.111±7.812),(7.264±7.441),(10.860±7.575)kPa;前:(2.467±6.559),(5.674±7.080),(11.600±8.099)kPa;左前:(2.289±5.876),(5.837±6.865),(12.390±9.169)kPa;左:(3.422±6.710),(7.161±6.313),(11.906±7.782)kPa;左后:(4.678±7.482),(8.252±6.537),(10.227±6.836)kPa,失禁患儿既不存在这种收缩压力增加值的显著梯度变化,也不存在压力增加值的方向变化。结论:正常儿童由近端向远端存在外括约肌主动收缩时存在压力显著增大的梯度变化,且存在外括约肌后方高压向前方高压的转变,形成对直肠肛门的直接方向压迫作用;失禁患儿无上述变化,可能是形成肛门失禁的机制之一。外括约肌主动收缩放松的生物反馈训练能加强外括约肌的收缩电位,有助于形成外括约肌压力纵向梯度变化及对直肠肛门的直接反向压迫机制。     

超临界流体萃取法及高效液相色谱法分析延胡索中延胡索乙素的含量

采用超临界流体萃取法提取延胡索及其成方制剂中的延胡索乙素,以苯作改性剂,于40℃,42 MPa压力下,二氧化碳静态萃取5 min,动态萃取3 ml。该法操作简便快速,提取完全,也为其它中药及其制剂中有效成分的定量分析建立了一种简便、快速、有效的提取方法。应用硅胶柱─反相洗脱系统的高效液相色谱法测定延胡索及其成方制剂中延胡索乙素的含量,方法简便、快速、精密度高。此色谱系统同样适于其它中药及其制剂中生物碱的定量分析。