颌骨骨肉瘤中p~(27)的表达及意义

目的 :分析细胞周期素依赖激酶抑制物 (CKI)p2 7蛋白在颌骨骨肉瘤的表达及意义。方法 :采用免疫组织化学ABC法检测p2 7蛋白在 2 0例颌骨骨肉瘤和 8例骨软骨瘤中的表达。结果 :2 0 % (4 2 0 )的骨肉瘤中p2 7呈阳性表达 ,87 5 % (7 8)的骨软骨瘤呈p2 7阳性 ,阳性表达率与骨肉瘤相比有显著性差异 (p <0 0 5 )。结论 :p2 7在颌骨骨肉瘤中低表达并可作为骨肉瘤发生和发展过程中的一个抑癌基因标志物     

肾移植术后服药前和服药后2小时新山地明血药浓度监测的临床意义比较

目的:新山地明给药后,个体间吸收变异相当明显,血药浓度监测管理对减少急性排斥反应发生及降低肝肾毒性十分重要。比较传统的服药前血药浓度(谷值)、服药后2h血药浓度(峰值)监测的临床意义。方法:选择2005-01/2006-04在中山大学附属第一医院行首次同种异体尸肾移植的受者60例,均知情同意。按随机数字表法分成服药前血药浓度组和服药后2h血药浓度组,各30例。两组患者肾移植后前3个月均接受新山地明5～7mg/(kg·d)、霉酚酸酯1.0～1.5g/d和皮质激素三联治疗。采用荧光偏振法测定患者新山地明服药前和服药后2h血药浓度,比较服药前血药浓度与服药后2h血药浓度监测方法预测肾移植急性排斥反应和不良反应(肝毒性、肾毒性)的有效性。结果:60例患者全部进入结果分析。①60例患者在术后3个月内急性排斥反应发生率为13.3%(8/60);不良反应发生率为28.3%(17/60),肝毒性发生率为20.0%(12/60),肾毒性发生率为8.3%(5/60)。②急性排斥反应发生时与非急性排斥反应时服药前血药浓度差异无显著性意义(P=0.08);急性排斥反应发生时服药后2h血药浓度显著低于非急性排斥反应时服药后2h血药浓度(P<0.01)。③发生肝肾毒性1周内的服药前血药浓度与未发生时服药前血药浓度差异无显著性意义(P=0.15);发生肝肾毒性1周内的服药后2h血药浓度显著高于肝肾毒性未发生时(P<0.01)。结论:在肾移植术后早期,与服药前血药浓度相比,服药后2h血药浓度能更敏感的反映急性排斥反应和不良反应的发生。     

CCU病房患者应激状态下发生精神异常2例

1　临床资料　患者,A,男,81岁,西安市人,农民,主因间断胸闷、气短、双下肢浮肿8mo余,加重10d于1999-12-10急诊收住西京医院心内科CCU病房.入院查体:BP19.3/13.3kPa,神志清,端坐位呼吸,查体合作,口唇紫绀,肝颈反流征(+),双肺布满干湿罗音,以中下肺野中小水泡音为主,心界左扩,心率75次·min-1,律齐,心前区可闻及级收缩期杂音,肝大肋下2指,生理反射存在,病理反射未引出.入院后心电图示:心肌供血不足.胸片提示:心影大,心胸比0.69,肺瘀血.入院诊断:1高血压病级、高心病、急性左心衰.2冠心病.1999-12-12因目睹邻床青年患者病危抢救全过程,于当…     

pcDNA3．1-VEGF165质粒转染骨髓基质干细胞后血管内皮生长因子的表达

目的:检测pcDNA3.1-VEGF165载体转染对兔骨髓基质干细胞血管内皮生长因子表达的影响。方法:实验于2005-07/2006-01在山东省青岛市市立医院中心试验室完成。①pcDNA3.1-VEGF165质粒由华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科杨述华教授惠赠。②选取1月龄新西兰大白兔1只,无菌条件下取胫骨和股骨,进行骨髓基质干细胞的分离与培养。③转染前24h计数细胞,每孔5×105细胞接种于6孔板,待骨髓基质干细胞达到80%～90%融合时准备转染,设立未转染组、空载体组和载体组。未转染组无特殊处理,空载体组转染pcDNA3.1载体,载体组转染pcDNA3.1-VEGF165。④转染后72h,反转录聚合酶链反应检测各组骨髓基质干细胞中血管内皮生长因子165mRNA的表达;酶联免疫吸附法检测各组骨髓基质干细胞中血管内皮生长因子165蛋白的含量。结果:①骨髓基质细胞分离培养形态观察:初始分离的骨髓细胞呈圆形,大小不一;24h后有少量细胞贴壁;48h后贴壁细胞部分为成纤维样细胞;72h贴壁的成纤维样细胞数不断增加;96h后贴壁生长的细胞主要为梭形的成纤维样细胞;分瓶后细胞形成克隆;传代后细胞贴壁生长,分裂相增多,并不断增殖分化形成均一的梭形细胞。②转染72h后各组细胞血管内皮生长因子165mRNA的表达情况:反转录聚合酶链反应检测到载体组在576bp处有明显条带,空载体组和未转染组均未见血管内皮生长因子165表达。③转染72h后各组细胞血管内皮生长因子165蛋白含量检测结果:酶联免疫吸附结果显示,载体组转染pcDNA3.1-VEGF165载体的骨髓基质细胞培养上清液中血管内皮生长因子165蛋白浓度为(170.1±14.3)ng/L,而空载体组与未转染组均未检测到血管内皮生长因子165蛋白表达,差异有显著性意义(t均=42.206,P=0.000)。结论:应用pcDNA3.1-VEGF165载体转染,可使兔骨髓基质干细胞获得外源性血管内皮生长因子165基因和蛋白的表达。     

海军陆战队员高温强训中注射丹参液前后血液流变学与凝血功能的变化

目的:观察高温高湿环境下负荷30kg野外强训时,注射丹参液前后海军陆战队员血液流变学和凝血系统的变化。方法:于2005-08在南海海面和某岛屿上选择男性解放军海军陆战队员112名,经医院全面检查身体合格,18～32岁,军龄1～14年。成建制的随机抽取55名作为训练组,负重30kg参加高温高湿环境下各种强训,另外57名陆勤人员作为对照组。训练组注射丹参液前后高温强训各8h,训练末各取1次血标本,检查两组队员凝血功能5项指标及血液流变学14项指标。结果:112名海军陆战队员均进入结果分析。①未注射丹参液前训练组全血低切黏度、全血中切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、红细胞比积、红细胞沉降率、全血低切还原黏度、全血中切还原黏度、全血高切还原黏度、血沉方程K值、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变性指数、红细胞电泳指数均高于对照组[训练组:(9.4±0.3)mPa.s,(5.6±0.4)mPa.s,(4.7±0.3)mPa.s,(1.5±0.2)mPa.s,(47.4±3.1)%,(7.3±1.1)mm/h,(19.4±3.8)mPa,s,(9.7±1.5)mPa.s,(8.0±1.5)mPa.s,(61.4±10.5),(2.7±0.2),(5.5±1.0),(0.8±0.1),(6.4±1.3);对照组:(8.1±0.5)mPa.s,(4.7±0.3)mPa.s,(4.1±0.3)mPa.s,(1.3±0.2)mPa.s,(44.8±3.3)%,(8.5±1.4)mm/h,(15.5±2.4)mPa.s,(8.2±1.5)mPa.s,(7.4±1.6)mPa.s,(51.8±9.7),(2.4±0.4),(4.5±0.8),(0.7±0.3),(5.3±1.1),P<0.05,P<0.01]。注射丹参液后训练组全血低切黏度、红细胞比积高于对照组[(8.7±0.3)mPa.s,(46.5±3.1)%;(8.1±0.5)mPa.s,(44.8±3.3)%,P<0.05]。②注射丹参液前训练组凝血酶原时间、部分活化凝血酶原时间、纤维蛋白原、D-二聚体、血清纤维蛋白降解产物、血小板与对照组相比,差异显著[训练组:(10.2±0.2)s,(23.9±1.1)s,(3.8±0.2)g/L,(309.6±13.3)mg/L,(7.7±0.4)mg/L,(270.1±14.2)×109L-1;对照组:(11.6±0.3)s,(28.4±1.4)s,(2.9±0.4)g/L,(241.5±13.7)mg/L,(5.9±1.2)mg/L,(174.5±22.0)×109L-1,P<0.01]。注射丹参液后训练组血小板、D-二聚体、纤维蛋白降解产物高于对照组[训练组:(236.2±11.2)×109L-1,(279.3±13.8)mg/L,(8.2±0.6)mg/L;对照组:(174.5±22.0)×109L-1,(241.5±13.7)mg/L,(5.9±1.2)mg/L,P<0.05,P<0.01],凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、纤维蛋白原与对照组相比无差异。结论:注射丹参液可增强红细胞的柔软性,改善红细胞变形和聚集能力,降低纤维蛋白原含量,防止血液高黏发生。     

彩色超声多普勒引导器官移植术患者颈内静脉穿刺及对并发症的监控效应

目的:为提高器官移植术患者颈内静脉穿刺置管的成功率及其安全性,减少并发症,应用彩色多普勒超声引导颈内静脉穿刺置管,并与采用传统的体表标志法穿刺者进行对比观察。方法:选择2004-11/2007-04南京医科大学附属无锡第一医院收治,预计穿刺较困难的肝移植及肾移植手术患者70例,根据患者意愿分为彩超定位组和对照组各35例。彩超定位组应用HDI5000型彩色多普勒超声显像仪进行实时立体定位,引导行颈内静脉穿刺置管并定期监控;对照组采用传统的体表标志法定位行颈内静脉穿刺置管。记录穿刺置管时间、成功率和并发症,穿刺置管成功后定期监控置入导管所在血管的血流情况、有无血栓形成或栓塞及飘浮导管的位置是否合适等。结果:70例均进入结果分析。①彩超定位组穿刺置管操作时间少于对照组(P<0.001)。②彩超定位组46次穿刺操作均一次成功,43次经颈内静脉单壁直接穿入,3例次穿过双壁,经稍退针后成功穿入,无一例次发生误穿动脉或其他并发症;对照组45次穿刺中,一次直接成功者20例次,6例次曾误穿入动脉。③21例肝移植患者均成功置入飘浮导管全程行有创心功能监测,术后监测发现4例有早期血栓形成。结论:①将彩色多普勒超声技术用于器官移植术患者颈内静脉穿刺时进行立体定位,引导穿刺置管,可明显提高穿刺置管的成功率和安全性。②通过术后定期监控,可了解导管位置是否保持准确及有无血栓形成等并发症发生。     

肾包膜内注射骨髓间充质干细胞在链脲佐菌素糖尿病模型大鼠体内的定位及功能测评

目的:观察骨髓间充质干细胞在体外不诱导条件下,移植于链脲佐菌素所致糖尿病大鼠后在胰腺的定位及胰岛素分泌情况。方法:实验于2004-08/2006-03在2级实验室唐山工人医院中心实验室和具有国家认证的屏障动物环境实验室华北煤炭医学院动物中心完成。①实验材料:青年清洁级SD大鼠购自华北煤炭医学院动物中心(SCXK2002-0003),4周龄,体质量180～250g,动物级别:SPF/VAF。②实验方法:体外培养雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞,并采用流式细胞仪鉴定。选取雌性SD大鼠,按65mg/kg剂量腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型。给药后二三天,大鼠血糖升高,当血糖≥16.7mmol/L且稳定2d,认为糖尿病模型建立成功。将建模成功的40只大鼠完全随机分为对照组、实验组,每组20只。对照组大鼠右侧肾包囊注射磷酸缓冲液0.2mL,实验组大鼠右侧肾包囊下注射骨髓间充质干细胞0.2mL,细胞数为4×105L-1。于移植前及移植后第3,5,7天采大鼠尾静脉血检测血糖。③实验评估:于移植前及注射后7d采大鼠心脏血检测C-肽值,移植后7d取大鼠胰腺组织作石蜡切片,应用原位杂交技术检测Y染色体细胞。结果:40只大鼠全进入结果分析。①骨髓间充质干细胞鉴定:骨髓间充质干细胞呈梭形、放射状,形成数个细胞克隆时排列整齐,原代培养7～10d即可长满,按1∶3传代,生长四五天达融合。流式细胞术表面标志鉴定显示,培养的原代骨髓间充质干细胞表面标志CD90阳性,基质细胞表面标志CD44阳性,造血细胞表面标志CD45及内皮细胞表面标志CD31阴性。②大鼠尾静脉血血糖值、心脏血C-肽值分析:血糖结果显示,对照组治疗后第3,5,7天血糖值及C-肽值与治疗前相比,无明显变化(P>0.05);实验组治疗后第3,5,7天血糖值较治疗前明显下降,治疗后第7天C-肽值明显上升,与对照组对应时间比较,差异均显著[实验组治疗前:(21.75±2.44)mmol/L,(0.21±0.01)μg/L;实验组治疗后:(12.23±1.95)mmol/L,(14.00±2.85)mmol/L,(12.75±2.86)mmol/L,(0.26±0.01)μg/L;对照组治疗后:(21.63±1.34)mmol/L,(23.03±1.11)mmol/L,(22.48±1.92)mmol/L,(0.21±0.01)μg/L,P均<0.01]。③原位杂交技术检测Y染色体细胞:对照组大鼠胰腺组织切片中未见黄绿荧光Y染色体,实验组大鼠胰腺组织切片中可见黄绿荧光Y染色体,存在于胰腺腺泡间隙,或胰腺组织中。结论:雄性大鼠骨髓间充质干细胞在肾包囊注射下可到达雌性糖尿病大鼠胰腺组织,使糖尿病大鼠血糖下降,C-肽值升高,具有分化为胰岛素分泌细胞的可能性。     

Enhanced proteolysis of plasma von Willebrand factor in thrombotic thrombocytopenic purpura and the hemolytic uremic syndrome

To examine whether enhanced in vivo proteolysis of von Willebrand factor (vWF) would account for the reported loss of larger multimers in acute thrombotic thrombocytopenic purpura/hemolytic uremic syndrome (TTP/HUS), we studied eight patients with acute TTP/HUS whose blood samples were collected into an anticoagulant containing a cocktail of protease inhibitors to impede in vitro proteolysis. In all, enhanced proteolytic degradation of vWF was expressed as a relative decrease in the intact 225-Kd subunit of vWF and a relative increase in the 176-Kd fragment. However, instead of the loss of larger forms of normal multimers reported by other investigators, the plasma of all but one of our patients (whether they had TTP or HUS) contained a set of larger than normal (supranormal) multimers. Hence, although proteolytic fragmentation of vWF was enhanced during acute TTP/HUS, this phenomenon was not associated with the loss of larger multimers. In the five patients who survived the acute disease and underwent plasma exchange (three with HUS and two with chronic relapsing TTP), subunits and fragments returned to normal values, and supranormal multimers were no longer detected in plasma. In conclusion, even though vWF proteolysis is enhanced in acute TTP/HUS, it does not lead to loss of larger multimers.     

A new solid-phase immunoassay for terminal deoxynucleotidyl transferase: analysis of TdT antigen in cells, plasma, and serum

A solid-phase immunoassay for terminal deoxynucleotidyl transferase has been developed using a primary antibody-coated polystyrene bead and secondary antibody conjugated with horseradish peroxidase. The immunoassay was compared with assays for enzyme activity and detection of antigen with immunofluorescence using cells from peripheral blood and bone marrow from patients with leukemia or lymphoma. In each instance, the solid-phase immunoassay correlated correctly with cellular samples judged to be positive by other tests. However, the level of detection of terminal transferase antigen in plasma or serum of patients with leukemia did not reflect accurately the level of terminal transferase in neoplastic cells. The solid-phase immunoassay was greater than 100-fold more sensitive than conventional assays for enzyme activity, rendering it potentially useful for quantitatively monitoring terminal transferase in patients with leukemia.