P53、nm23基因变化与胃癌转移及预后的研究

目的:探讨P53、nm23基因在人胃癌组织中的表达及其与淋巴转移和预后的关系。材料和方法:胃癌切除术的手术标本(共93例)。采用免疫组织化学法。结果:P53阳性率为49.4％(46/93),nm23为56％(52/93)。P53阳性表达与胃癌患者的年龄、性别、肿瘤组织学分型、浸润深度、淋巴结转移之间无显著性差异,但与胃癌患者预后有统计学意义。nm23低表达与淋巴结转移及预后有显著的相关性。93例胃癌组织中的淋巴结转移者63例,其中nm23表达阳性28例(44％),无转移者30例,其中nm23阳性表达24例(80％),二组之间有非常显著的差异(P<0.01)。nm23表达阳性组1,3,5年生存率分别为80％、65％和24％,而表达阴性者1,3,5年生存率为68％、41％和21％。二组间生存分布差异有显著性(P<0.05)。结论:胃癌nm23低表达有发生淋巴结转移倾向,P53高表达和nm23低表达患者预后差。P53、nm23基因变化对胃癌淋巴结转移和预后起重要作用。     

补肾中药复方延缓老年雄性大鼠股骨皮质骨、松质骨骨量增龄性丢失的实验研究

目的　研究补肾中药复方延缓老年大鼠股骨皮质骨 、松质骨骨量增龄性丢失的作用。方法３６只２４月龄 Ｓ Ｄ 雄性大鼠随机分为２４月龄本底对照组、３０月龄增龄对照组、补肾中药复方低剂量组、补肾中药复方高剂量组,每组各９只。低剂量组、高剂量组均自２４月龄给药至３０月龄。各组相应处理以后分别测定各组大鼠左侧股骨以松质骨为主的近段、远段以及以皮质骨为主的中段的骨密度。结果　补肾中药复方低剂量组大鼠股骨各段骨密度增龄性减少率出现延缓的趋势;高剂量的补肾中药复方则能明显延缓股骨各段骨密度增龄性减少率。结论　补肾中药复方具有量效依赖性地延缓大鼠皮质骨、松质骨增龄性骨丢失的作用     

肿瘤浸润淋巴细胞及重组白细胞介素2治疗原发性肝细胞癌

目的探讨联合应用肿瘤浸润性淋巴细胞（ｔｕｍｏｒｉｎｆｉｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ,ＴＩＬ）和重组白细胞介素２（ｒＩＬ２）治疗对原发性肝细胞癌（ｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＰＨＣＣ）术后患者细胞免疫功能的影响和其临床疗效。方法对１６例ＰＨＣＣ术后患者进行了ＴＩＬ和ｒＩＬ２治疗,１２例从肝动脉插管输入,４例从门静脉插管输入。结果ＴＩＬ治疗后１６例患者外周血白细胞介素２（ＩＬ２）,Ｔ细胞亚群及比率均有不同程度上升;肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）,白细胞介素６（ＩＬ６）多有不同程度下降。随访６～２４个月,１４例肝癌根治性切除术患者,肿瘤无复发迹象,１例肝癌根治切除术患者ＴＮＦ上升了８ＩＵ,该患者治疗８个月后死于肝功能衰竭;１例肝癌姑息性切除,残癌无水酒精注射病人,ＴＩＬ治疗１８个月后肿瘤直径扩大２ｃｍ。结论ＴＩＬ治疗对提高ＰＨＣＣ术后患者抗肿瘤细胞免疫功能,防止肿瘤复发,抑制残瘤生长,延长患者生存期具有一定作用。     

大鼠睾丸发育过程基因表达的研究

本研究选取１、３ 和８（成年）周龄等不同发育阶段大鼠,应用睾丸组织树脂包埋形态学观察与ｍ ＲＮＡ 差异显示逆转录－聚合酶链反应技术（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ ＲＴ－ＰＣＲ,ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）相结合,探讨大鼠睾丸发育过程中,精子发生过程睾丸特异基因的表达。结果：对不同周龄大鼠睾丸ｍ ＲＮＡ 进行差异比较,共得到 ８２ 个ｃＤＮＡ 差异片段。又分别标记不同周龄大鼠睾丸全部 ｍ ＲＮＡ 为探针,对其中 ４０ 个ｃＤＮＡ差异片段进行斑点杂交,得到１２ 个初步鉴定的特异或表达增加的ｃＤＮＡ 差异片段,片段范围２５０～５００ ｂｐ,其中２ 个在１ 周龄睾丸组获得,４ 个在３ 周龄睾丸组获得,在８ 周龄组获得 ５ 个,一个为１ 周和３ 周龄共有而８ 周龄大鼠缺乏的ｃＤＮＡ 片段。通过形态学观察与ｍ ＲＮＡ 差异显示的结果对应分析,初步认为２ 个１ 周龄的特异基因片段属于睾丸二倍染色体生精细胞表达基因,４ 个３ 周龄睾丸特异基因片段也属二倍或四倍体生精细胞表达基因,其中Ｂ型精原细胞和初级精母细胞的表达基因占主要成分;而成年动物的５ 个特异基因片段是属单倍体的精子细胞以及减数分裂过程的精母细胞表达基因片段     

抑瘤素—M（OSM）在原核系统中的表达

目的和方法：抑瘤素－Ｍ是一种具有多种生物活性的细胞因子，采用ＰＣＲ的方法在ＯＳＭ全长的ｃＤＮＡ基础上截去编码Ｃ端的３１个氨基酸的核苷酸序列，将其分别克隆至ｐＢＶ２２０和ＴｈｉｏＦｕｓｉｏｎ表达系统中进行表达，并对其包涵体进行初步的变性、复性和活性测定。     

荷电微孔滤膜去除细菌,病毒效果的初步研究

目的：考察荷电微孔滤膜去除细菌，病毒的效果。方法：研究了膜孔径，过滤介质，过滤水量、过滤压力或流速等因素对荷电微孔滤膜瘤细菌及病毒效果的影响。结果：在一定的试验条件下，孔径在１．６μｍ以下的荷电微孔滤膜对大肠杆菌及大肠杆菌噬菌体ｆ２的去除率均可达到１００％，操作压力或流速对其有一定的影响。结论：荷电微孔滤膜对大肠杆菌及大肠杆菌噬菌体ｆ２有比较强的去除效果。     

rhIL—6促进血小板恢复的优化应用条件的研究

目的：研究不同给药条件对ｒｈＩＬ－６药效的影响，优化给药方式。方法：以γ射线照射６．５Ｇｙ的ＬＡＣＡ小鼠为造血系统损伤模型，分别按不同的给药途径（皮下或腹腔注射）、每日次数（每天１次或分２次给药）、每日剂量（５００μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×４，２５０μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×８）和开始治疗时间（照后３０ｍｉｎ、１２ｈ、２４ｈ和７２ｈ）等给ｒｈＩＬ－６，观察照后第１１、１４、１８和２２天外周血细胞数的变化。结果：发现ｒｈＩＬ－６采用每日２次皮下注射给药时血小板数显著高于对照组，亦高于每日１次皮下注射组和每日２次腹腔注射组；在有效剂量范围内和总给药剂量相同时，降低每日给药剂量相应延长给药时间并不降低ｒｈＩＬ－６的药效；ｒｈＩＬ－６不同开始治疗时间各组血小板（ＰＬＴ）升高幅度依次为照后１２ｈ、３０ｍｉｎ、２４ｈ和７２ｈ，其中２４ｈ前３个给药组血小板数比对照组升高有统计学意义。结论：ｒｈＩＬ－６促血小板生成较佳的条件是在照射后２４ｈ内（最好在照后１２ｈ）给药，每日２次皮下注射；当给药剂量较大时，可采用减少每日剂量，延长给药时间方案，以减少副作用     

利用噬菌体表面呈现技术制备HIV-1整合酶单链抗体的初步研究

目的：研制ＨＩＶ－１整合酶（ｉｎｔｅｇｒａｓｅ，ＩＮ）的重组噬菌体单链抗体。方法：采用噬菌体表面呈现方法。结果：由ＩＮ蛋白免疫的小鼠脾细胞ｍＲＮＡ中构建了单链抗体基因ｃＤＮＡ文库，克隆入噬菌粒载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ，经转化大肠杆菌ＴＧ１，获得了库容为３．５×１０５的表达文库。利用包被在酶联板上的ＩＮ蛋白进行四轮亲和富集，筛选出７６株具有ＩＮ结合活性的重组噬菌体。对随机挑选的一株克隆进行了ＤＮＡ序列分析，证明其符合小鼠抗体序列。结论：获得了抗ＨＩＶ－１ＩＮ的噬菌体单链抗体，为其进一步研究打下基础。     

利用T7和PR双启动子的新型表达载体的构建及其应用

构建具有λＰＲ与Ｔ７双启动动子的新型原核表达载体ｐＤＯＧ，以便使用同一载体研究不同诱导条件下，重组蛋白在大肠杆菌中表达，降解以及折叠的情况，从而选择最佳的诱导条件。方法采用ｐＢＶ２２０与ＰＥＴ－３表达载体作为原始材料，将ＰＥＴ－３上包括Ｔ７启动子与Ｔ７ｇ－１０释译起始序列的一段序列克隆到     

FAS抗原胞外区片段GST融合蛋白的产生

目的：获得重组ＦＡＳ抗原，用于抗体制备及进一步的功能分析。方法：用ＰＣＲ技术从完整的ＦＡＳｃＤＮＡ克隆上扩增其编码胞外区的部分，将ＰＣＲ产物直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体系统，ＤＮＡ序列分析证实序列完全正确；用ＥｃｏＲⅠ和ＳａｌⅠ将ＦＡＳ胞外区片段切出，定向克隆到经同样酶切处理的ｐＧＥＸ－ＫＧ表达载体，转化大肠杆菌，经优化ＩＰＴＧ的诱导条件，获得了ＦＡＳ胞外区与谷胱甘肽－Ｓ－转移酶的融合蛋白高效表达；用亲合层析法从细菌粗提物中纯化了ＧＳＴ－ＦＡＳ融合蛋白，免疫家兔制备了抗ＦＡＳ抗体。结果：用重组ＦＡＳ为免疫原制备的抗体能诱导Ｕ９３７细胞产生细胞凋亡。结论：重组ＦＡＳ抗原和制备的抗体能用于对ＦＡＳ系统的功能研究